依据荧光染料在样品中位置的不同进行拆分。
首先确定需要拆分的荧光染料在样品图像的位置,使用ROI绘图工具选定荧光染料区域。
在主界面菜单的[Image]工具栏中打开[Spectral Unmixing Setting]视窗。
在[Spectral Unmixing Setting]视窗的[category]中选择[ROIs]选项,点击[Add],将蓝色条选定的ROI区域添加到[Element],在[Element]中可改变每个ROI区域的表示颜色。下方的光谱图为三个ROIs的光谱分布图。
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点击[Umix]按钮,即可获得经拆分后的图像。
如果背景荧光也需要分离,可将背景选定为选定背景ROI,然后进行同样的操作即可。
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10、Living拆分
与ROI拆分同样依据荧光染料在样品中位置的不同进行拆分,区别在于可在Live状态下实时观察拆分后的扫描图像,并及时对荧光亮度进行调整。 首先使用ROI绘图工具选定荧光染料区域。
在主界面菜单的[Image]工具栏中打开[Spectral Unmixing Setting]视窗。
在[Spectral Unmixing Setting]视窗的[category]中选择[ROIs]选项,点击[Add],将蓝色 条选定的ROI区域添加到[Element],在[Element]中可改变每个ROI区域的表示颜色。下
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方的光谱图为三个ROIs的光谱分布图。
点击[close],在主界面快捷方式栏点击[Live Unmixing]按钮。
或者在主界面[Image]菜单中选择[Live Unmixing]选项也可实现同样操作
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点击[Live]按钮,得到扫描中的荧光拆分图像,可实时调节荧光亮度等。
再次点击[Live Unmixing]按钮或者在主界面[Image]菜单中再次选择[Live Unmixing]选项可恢复为普通Live图像(即32通道图像)。 11、盲拆分(Blind Unmixing)
利用程序自动识别并拆分不同荧光标记所发出的重叠光谱,得到拆分厚的图像。 在主界面[Image]菜单中选择打开[Blind Unmixing]视窗。设置盲拆分参数。
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