专题二 微生物的培养与应用
注意事项：
1．答题前，先将自己的姓名、准考证号填写在试题卷和答题卡上，并将准考证号条形码粘贴在答题卡上的指定位置。
2．选择题的作答：每小题选出答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。
3．非选择题的作答：用签字笔直接答在答题卡上对应的答题区域内。写在试题卷、草稿纸和答题卡上的非答题区域均无效。
4．考试结束后，请将本试题卷和答题卡一并上交。
一、选择题（本题包括20小题，每小题3分，共60分，每小题只有一个选项最符合题意）
1．在纤维素分解菌分离与鉴定实验中，用到的培养基按照物理状态分类分别为（ ）
A．固体培养基、液体培养基 B．固体培养基、固体培养基 C．液体培养基、液体培养基 D．液体培养基、固体培养基
2．欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌，应选择下列固体培养基（仅列出碳氮源）中的（ ）
A．蛋白胨、柠檬酸铁铵 B．橄榄油、硫酸铵 C．乳糖、酵母膏 D．葡萄糖、蛋白胨
3．将三组生理状态相同的某植物幼根分别培养在含有相同培养液的密闭培养瓶中，一段时间后，测定根吸收某一矿质元素离子的量。培养条件及实验结果见下表：
培养瓶中气体 温度／℃ 离子相对吸收量/% 空气 17 100 氮气 17 10 空气 3 28
下列分析正确的是（ ）
A．有氧条件有利于该植物幼根对该离子的吸收
B．该植物幼根对该离子的吸收与温度的变化无关 C．氮气环境中该植物幼根细胞吸收该离子不消耗ATP D．与空气相比，氮气环境有利于该植物幼根对该离子的吸收
4．通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出（ ）
①大肠杆菌 ②霉菌 ③放线菌 ④固氮细菌 A．④③② B．④②③ C．④①② D．④②①
5．选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。为选择酵母菌和硝化细菌，应选用的培养基分别为（ ）
A．伊红美蓝培养基、含青霉素培养基 B．含青霉素培养基、含氨的无机培养基 C．含氨的无机培养基、含青霉素培养基 D．含青霉素培养基、伊红美蓝培养基
6．消毒和灭菌是两个不同的概念，下列哪些事物适用于消毒处理（ ） ①皮肤 ②饮用水 ③牛奶 ④注射器 ⑤培养皿 ⑥接种环 ⑦培养基 ⑧果汁 ⑨酱油 ⑩手术刀
A．①②③⑧⑨ B．④⑤⑥⑦⑩ C．①②④⑤⑥⑧ D．①②③④⑦⑧ 7．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中，关于倒平板的描述正确的是（ ）
①用左手打开皿盖
②等待平板冷却5?l0min，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上 ③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰
④等培养基冷却至60℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板 ⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖 A．②③⑤ B．②④⑤ C．①②③④ D．①②③⑤
8．如图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法不正
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确的是（ ）
A．①步骤使用的培养基已经灭菌
B．图中操作结束后需在培养基皿上标注菌种及接种日期等信息 C．④中只有最后一次划线的区域才可以得到所需菌落 D．①②③步骤操作时都需要在酒精灯火焰旁进行
9．如图是使用某接种方法在适宜的培养基上培养某种微生物的结果，相关叙述不正确的（ ）
A．该图最可能是用平板划线法进行接种 B．该接种方法适用于微生物的分离和计数 C．接种技术的核心是要防止杂菌的污染
D．可将未接种的培养基放在相同条件下培养，排除培养基是否有杂菌污染 10．用稀释涂布平板法统计细菌菌落数时，一般选择如图中哪几支试管中的稀释液来涂布平板（ ）
A．试管1、2、3 B．试管2、3、4 C．试管3、4、5 D．试管4、5、6
11．下列有关微生物培养的说法，正确的是（ ）
A．制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、消毒、倒平板
B．在筛选纤维素分解菌时选择培养这一步骤不可以省略 C．配置培养不同微生物的培养基时都要将pH调至中性或微碱性 D．获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵
12．做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是（ ）
A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖 B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上 13．下列有关说法，正确的是（ ） A．对于频繁使用的菌种，可采用甘油管藏法保藏 B．甘油管藏法保存菌种时用固体体培养基 C．甘油管藏法一般保存温度为-20℃
D．甘油管藏法每3～6个月将菌种从旧的培养基转移到新鲜培养基上 14．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是（ ） A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂
B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂 C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂 D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂
15．分离土壤中分解尿素菌的实验操作中，对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是（ ）
A．制备浸出液的土壤取自土壤的表层 B．涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌 C．牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源 D．接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒
16．下列有关培养基和菌种鉴定的叙述错误的是（ ） A．可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型
B．菌落的大小、颜色、有无荚膜、隆起程度等特征都可作为菌种肉眼鉴定的依据
C．利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌 D．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌 17．原油中含有大量有害的、致癌的多环芳烃。土壤中有些细菌可以利用原油
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中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈。为筛选出能高效降解原油的菌株并投入除污，某小组同学设计了相关实验。下列有关实验的叙述，不正确的是（ ）
A．应选择被原油污染的土壤取样 B．配制以多环芳烃为唯一碳源的选择性培养基 C．将土壤稀释液灭菌后接种到选择性培养基上 D．能形成分解圈的即为所需菌种
18．下列有关刚果红染色法的叙述，正确的是（ ） A．刚果红可以和纤维素、淀粉等多糖形成红色复合物 B．出现透明圈的菌落一定是纤维素分解菌 C．在倒平板时加入的刚果红溶液不需要灭菌 D．在菌落形成后加入的刚果红溶液不需要灭菌
19．分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是（ ） A．经选择培养后即可将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 B．选择培养这一步可省略，但纤维素分解菌少 C．经稀释培养后，用刚果红染色 D．此实验中需设置对照组
20．抗生素可由微生物产生，具有抑菌作用，能在琼脂培养基中扩散。在筛选产生抗生素的菌种时，先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌，在27℃下培养3天，形成菌落。然后接种乙、丙、丁三种致病菌（图a），继续在同样条件下培养3天，结果如下图b。分析结果，得出的结论是（ ）
①甲菌产生了抗生素
②丙菌的生长被乙菌产生的抗生素抑制 ③乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制 ④丁菌产生的抗生素抑制了丙菌的生长 A．①④ B．①③ C．②③ D．②④
二、非选择题（本题包括3小题，每空2分，共40分）
21．（16分）饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用?若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等?以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图?请分析作答?
（1）培养基中除了添加 以外，应含有碳源、氮源、水、无机盐等基本营养物质?
（2）为防止杂菌污染，要对培养基和培养皿等进行 ?
（3）接种以前要进行的一系列操作，目的是在固体培养基表面形成 ?根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的 就能大致推测出样品中的活菌数?通常每种稀释液需涂布 个平板，取其平均值?若将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得平均值是C，则1g土壤中含有此菌的菌株数是 ?
（4）若要对上述菌株进行纯化，通常使用的划线工具是 ;接种时，在第一区域划线后须将该工具 后再划线，在第二次划线时须从第一次划线的末端开始，这样做的目的是从上一区域获得菌种。
22．（12分）幽门螺杆菌是栖息在胃粘膜的革兰氏阴性螺旋状杆菌，具有强的脲酶（能降解尿素）活性，其代谢类型属于异养厌氣型（氧气浓度在5%?8%左右适合，完全无氧或空气环境中无法生存)，这种细菌是慢性胃炎、甚至胃癌发生的元凶。
（1）为了对胃炎患者的胃粘膜提取物稀释样液中幽门螺杆菌进行分离，应将样品稀释液接种于以_________为唯一氮源的固体选择培养基上，接种后的培养皿在___________条件下，倒置于37℃的恒温培养箱中培养。
（2）欲检测上述培养基中是否具有幽门螺杆菌这类细菌的存在，向培养基中添加酚红指示剂，培养基中菌落周围显示红色环带，即表明这类细菌的存在，这种检测过程的机理是_____________。
（3）采用液体培养基培养幽门螺杆歯菌，为了测定菌液中的菌体数量，一般
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采用_____________法将一定量的菌液接种到固体培养基上，统计菌落的数量来代表菌体数，这种检测方法测得的结果一般偏_____________（填“大”或“小”)，原因是_____________________________。
23．（12分）研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物。请就如何从土壤中获得纤维素分解菌回答以下问题。
（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和____酶。
（2）若获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是_________，操作时采用的灭菌方法是_______。
（3）刚果红可以与纤维素等多糖形成______色复合物，但并不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在_______时就加入刚果红。_______（第一种、第二种）方法会使菌落之间发生混杂。
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2018-2019学年高二下学期专题二训练卷
生 物（二）答 案
1. 【答案】D
【解析】在纤维素分解菌分离与鉴定实验中，梯度稀释前进行选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度，这一步一般选用液体培养基，筛选纤维素分解菌用了固体培养基，D正确。
2. 【答案】B
【解析】欲分离筛选出能分泌脂肪酶的细菌，应选择以脂肪为唯一碳源的固体培养基。只有橄榄油、硫酸铵的培养基中的碳源为脂肪（橄榄油），而其它培养基中的碳源都不是脂肪。综上分析，B正确。
3. 【答案】A
【解析】表中信息显示：在相同的温度条件下，空气培养瓶中离子相对吸收量大，说明有氧条件有利于该植物幼根对该离子的吸收，A正确；同是空气培养瓶，在不同的温度条件下离子相对吸收量不同，说明温度变化会影响根对离子的吸收，B错误；在相同的温度条件下，氮气培养瓶中离子相对吸收量较空气培养瓶中离子相对吸收量小，说明幼根细胞吸收该离子消耗ATP，而且氮气环境不利于该植物幼根对该离子的吸收，C、D错误。
4. 【答案】B
【解析】在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，但固氮细菌的氮源是氮气，可在该培养基上正常生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌，则霉菌等真菌可正常生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌，但不影响放线菌的生长。
5. 【答案】B
【解析】伊红美蓝培养基是专一鉴别大肠杆菌的培养基，硝化细菌对青霉素敏感，含青霉素培养基不能筛选硝化细菌，A错误；酵母菌对青霉素不敏感，但细菌对青霉素敏感，因此含青霉素培养基可以用于筛选酵母菌，硝化细菌能利用环境中的氨氧化释放的化学能将CO2和H2O合成为糖类等有机物，所以含氨的无机培养基可以筛选硝化细菌，B正确；酵母菌是异养生物，不能用含氨的无机培养基筛选，硝化细菌对青霉素敏感，含青霉素培养基不能用于硝化细菌的筛选，C错误；综上分析，含青霉素培养基可以用于筛选酵母菌，伊红美蓝培养基是专一鉴别大肠杆菌
的培养基，D错误。
6. 【答案】A
【解析】消毒是用比较温和的物理或化学方法杀死部分微生物的方法，不包括芽孢和孢子，灭菌是用强烈的物理或化学方法杀死一切微生物包括芽孢和孢子。①皮肤应进行消毒，②饮用水应进行消毒，③牛奶应进行消毒，④注射器应进行灭菌，⑤培养皿应进行灭菌，⑥接种环应进行灭菌，⑦培养基应进行灭菌，⑧果汁应进行消毒，⑨酱油应进行消毒，⑩手术刀应进行灭菌。综上所述，需要中进行消毒的是①②③⑧⑨。A正确。
7. 【答案】A
【解析】倒平板时用左手使培养皿打开稍大于锥形瓶瓶口的缝隙，①错误；等待平板冷却5?l0min，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，防止皿盖上冷凝的水珠滴落在培养基上，②正确；右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰，杀灭瓶口可能存在的杂菌，③正确；培养基灭菌后，等培养基冷却至50℃左右时倒平板，④错误；右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖，防止杂菌落入，⑤正确。A正确。
8. 【答案】C
【解析】制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本过程为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板五个步骤。①步骤表示倒平板，在倒平板之前培养基已经灭菌，A正确；图中操作结束后需在培养基皿上标注菌种及接种日期等信息，B正确；在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落，C错误；①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，D正确。
9. 【答案】B
【解析】该图最可能是用平板划线法进行接种，A正确；平板划线法适于微生物的分离纯化，不适于计数，B错误；在操作时，为防止杂菌污染，需进行严格的消毒和灭菌，C正确；为了检测培养基是否有杂菌污染，可将未接种的培养基放在相同条件下培养，D正确。
10. 【答案】C
【解析】由于1、2号试管稀释倍数较小，试管中细菌数目较多，而6号试管中细菌数目较少，所以用稀释涂布平板法统计细菌菌落数时，一般选择图中试管3、4、5中的稀释液来涂布平板，C正确。
11. 【答案】D
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高中生物专题二微生物的培养与应用单元测试(二)新人教版选修1
