高考生物选修3知识点总结
专题一基因工程
一、基因工程的 基本工具 1、 分子手术刀”一-
限制酶) 功能：能够
识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序
列，并且使每一条链中 特定部位的两个核苷酸之间的 磷酸二 酯键断开，因此具有专一性。
结果：经限制酶切割产生的 DNA片段末端通常有两种形 式：黏
性末端和平末端 。
2、 分子缝合针” 一一NA连接酶
(1)两种DNA连接酶(E ? coliDN连接酶和T4 — DNA连接 酶)的比较：
① 相同点：都缝合磷酸二酯 键。②区别:E ? coliDNA连接 酶只能连接 黏性末端；T4DNA连接酶能缝合两种末端，但 效率较低。
3、 分子运输车”一-载体
(1) 载体具备的条件：① 能在受体细胞中复制并稳定保 存。②具有一至多个限制酶切点 ，供外源DNA片段插入。 ③ 具有标记基因，供重组 DNA 的鉴定和选择。
专业word可编辑
(2) 最常用的载体是:质粒,它是一种裸露的、结构简单的、 独立
于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环 状DNA分子。 (3)
其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒
二、基因工程的基本操作程序 1、 目的基因的获取
从基因文库中获得、人工合成、PCR扩增。人工合成目的 基因的常用方法有 反转录法_和化学合成法_。(了解基因组 文库和CDNA文库？；如何从基因文库中提取目的基 因？？) 2、 基因表达载体的构建 (关键步骤) 组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因
(1) 启动子：是一段有特殊结构的 DNA片段,位于基因的 首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位 ，能驱动基因转 录出mRNA，最终获得所需的 蛋白质。
(2) 终止子：也是一段有特殊结构的 DNA片段，位于基 因的尾端。
(3) 标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目 的基因，从而将 含有目的基因的细胞 筛选出来。常用的标记基因是 抗生素基因
3、将目的基因导入受体细胞 检测目的基因是否翻译成蛋白质，提取蛋白质，用相应的抗
（1） 常用的转化（导入）方法：
导入植物细胞:常用农杆菌转化法 （双子叶植物），其次 还有基因枪法和花粉管通道法等。
导入动物细胞:最常用的方法是显微注射技术。此方法的受
体细胞多是受精卵。
导入微生物细胞:感受态细胞法。先用Ca2+处理细胞，使 其成为感受态细胞，再将重组表达载体 DNA分子溶于缓冲液 中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收 DNA分子，完成转化过程。原核生物作为受体细胞的原因是 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细 胞是大肠杆菌。
（2） 重组细胞导入受体细胞后，筛选含基因表达载体受体细 胞的依据是标记基因是否表达。 4、目的基因的检测和表达
检测转基因生物的染色体 DNA上是否插入了目的基因，方法 是采用DNA分子杂交技术。
检测目的基因是否转录出mRNA，方法是采用用标记的目的 基因作探针与mRNA杂交。 体进行抗原-抗体杂交。
有时还需进行 个体生物学水平 的鉴定。如转基因抗虫植物 是 否出
.
专业word可编辑
现抗虫性状。 三、蛋白质工程的概念
蛋白质工程 是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的 关系作为基础,通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进 行改造,或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活 的需求。（基因工程在原则上只能生产 自然界已存在 的蛋白 质）
专题2细胞工程
一、植物细胞工程
1、 理论基础（原理）：植物细胞全能性 2、 植物组织培养技术
（1） 过程：离体的植物器官、组织或细胞—愈伤组织—试管
苗—植物体
（2） 用途：微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育
种、细胞产物的工厂化生产。
（3）地位：是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新 诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学 法用聚乙二醇（PEG）作诱导剂。 品种的最后一道工序。 3、植物体细胞杂交技术
原理：细胞膜的流动性。意义：克服了远缘杂交不亲和的障 碍。 二、动物细胞工程 1、动物细胞培养
（1）取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织 ） -剪碎-用胰蛋白酶或胶原蛋白酶 处理分散成 单个细胞-制 成细胞悬液—转入培养瓶中进行 原代培养—贴满瓶壁的细胞 重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续 传代
培养。
（2） 细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上
。接 触抑制：细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面 相 互抑制时,会停止分裂增殖。
（3） 动物细胞培养需要满足以下条件
① 无菌、无毒的环境：培养液应进行 无菌处理。通常还要 在培养液中添加一定量的 抗生素，以防培养过程中的污染。 此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造 成危害。
② 营养:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素 等。需加入血清、血浆等天然成分。
③ 温度:适宜温度：哺乳动物多是 36.5 C+ 0.5 C ； pH : 7.2 ?7.4。
④ 气体环境：95%空气+ 5%CO2。。2是细胞代谢所 必需的,
CO2作用是维持培养液的 pH。
专业word可编辑
2、 动物体细胞核移植技术和克隆动物
（1） 哺乳动物核移植可以分为 胚胎细胞核移植（比较容易） 和体
细胞核移植（比较难）。
（2） 选用去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞比较大，容易 操作；卵（母）细胞细胞质多，营养丰富。 3、 动物细胞融合
（1） 原理级方法：细胞膜的流动性。诱导融合的方法：物 理法包括离心、振动、电刺激等。化学法用聚乙二醇 （PEG）作诱导剂。还可以用灭活的病毒诱导。
（2） 动物细胞融合的意义：克服了远缘杂交的不亲和性。
项目 细胞融合 细胞融合 诱导手段 用法 的原理 的方法 植物体 细胞膜的 物理法、 克服远缘杂交 细胞杂 流动性 去除细胞 壁化学法 不亲和性，获 交 后诱导 原生得杂种植株 质体 融合
高考生物选修3知识点总结
