11级生物技术1酵工程实验计划班发案
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生物技术一班发酵工程实验计划方案
一、实验日程表
序号 实验项目 时间 实验内容安排 1、 固体培养基配制500mL/组，分装2瓶； 2、 培养皿清洗及包扎10副/组；无菌水90mL/瓶，9 mL/试管共6支； 3、 1 mL or2 mL吸管包扎8支/组； 4、 液体培养基制备：500ml/组，分装8瓶，灭菌0.1MPa,20min. 1、菌种的分离纯化:超净工作台消毒（UV照射20min）→75%乙-2醇擦拭台面；分离样品→无菌水溶解(稀释10倍)→涡旋震荡5min；倒平板(10副平皿/组)→平板划线分离→30℃倒置培养→目标菌株获得→制片及观察（显微摄影）。 1、接种准备工作：超净工作台消毒（UV照射20min）→75%乙醇擦拭台面。 2、纯种培养接种：平板单一菌落→种子培养基（2环/瓶）→涡旋震荡3-5min； 3、摇瓶培养：摇床设置及调节（30℃，200r/m）→摇瓶固定→启动培养。 1 培养基制备与灭菌 预计8学时 2 菌种分离 预计4学时 3 种子制备 预计4学时 发酵罐结构认识、操作规程及分批发酵操作 4 预计8学时 1、 发酵培养基配制：20Lor35L。 2、 发酵罐操作培训：发酵罐初始状态检查及调节→清洗（清水冲洗2-3遍）→发酵罐运行启动→发酵罐运行参数设置→空罐灭菌（0.15MPa,20min）→进料→实罐灭菌（0.1MPa维持30min）→冷却→火焰封口接种→发酵参数稳定状态调节与维持。 3、 发酵取样：取样管灭菌→取样→再灭菌； 4、 发酵中间过程分析（0 hour）： pH测定（pH计or精密试纸）；酸度（中和法）；酶浓度测定（福林酚法）；菌体浓度测定（A600光密度法） 5、 中间取样：每间隔4h, 取样管灭菌→取样→再灭菌.共计4-6次 ； 6、 发酵结束工作：器皿、设备还原，环境清洁
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二、实验分组
第一组：薛盛、张川、周宁、殷清玉宇、周辰栋、杨朝伟、吴迪、 刘洋、刘丽婷 （负责人：吴迪）
第二组：张怡、沈飞、徐依依、陆佳桦、吴冰燕、王芸清鉴、叶晨、 汪素红、刘杏、刘文跃 （负责人：沈飞） 第三组：田玉寒、闻宁、林飞敏、李林棋、丁铭、周欣欣、罗斯、 蒋秋艳、刘宇霞 （负责人：田玉寒）
三、时间分配
前三周的周二晚发酵理论课照上，因此各组的固定实验时间如下： 第一组固定实验时间：周一下午、周三晚上 第二组固定实验时间：周二中午、周四上午 第三组固定实验时间：周五下午、周五晚上 后三周的周二晚无理论课，各组集中在周二晚实验
前三周每周安排两次实验，以获取更多的实验数据，后三周每周一次集体实验
几个重要时间节点为：第10周正式进入实验程序；
第13周获得目标菌株1株； 第14周完成种子的摇瓶培养；
第15周分别完成上罐发酵； 第16周实验收尾工作。
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