XXXX医院检验科 AU全自动生化仪淀粉酶SOP 文件编号: 生效日期: 仪器序列号：XXXXXX SOP标准操作程序 AMY 淀粉酶（货号：OSR6182）
一、 目的：规范淀粉酶测定的操作程序，确保淀粉酶测定的结果准确
二、 适用范围：在Beckman Coulter AU分析仪上定量测定人尿液中的淀粉酶（AMY） 三、 临床意义
淀粉酶是一组水解酶，它能够水解通过邻近的葡萄糖残基上的碳原子 1 和 4 连接的 α-右旋葡萄糖单位构成的复杂碳水化合物。淀粉酶存在于体内的多个器官和组织中。它在胰腺中的浓度最高。在胰腺中，淀粉酶由腺泡细胞合成，然后经胰管系统分泌到肠道内。此外，唾液腺也分泌有效的淀粉酶，它在食物仍在口腔和食道内时，就开始水解淀粉。
导致血浆 α-淀粉酶升高的疾病包括：急性胰腺炎，腮腺炎，酒精中毒，肾机能不全以及病毒性肝炎，艾滋病，腹部伤寒，结节病，上腹部创伤等疾病。在 ERCP 检查之后，也可检测到淀粉酶升高。 在急性胰腺炎中，在症状出现之后的 5-6 小时，淀粉酶将升高，并保持升高 2-5 天。血浆活性的升高不反映疾病的严重程度；反之，胰腺的大范围破坏不一定会引起胰 α-淀粉酶血浆浓度的显著升高。 α 淀粉酶通过肾小球滤过排泄，其中 50% 被肾小管重吸收。一过性肾小管损伤，烧伤、糖尿病酮症酸中毒、急性胰腺炎以及蛋白尿会导致 α-淀粉酶清除率增加，这些情况下的重吸收将显著减少。在研究伴有巨大淀粉酶血症或肾功能不全的血淀粉酶过多时，适于测定尿液中的 α 淀粉酶。在晚期囊性纤维化、严重肝脏疾病和胰脏切除术中，已经观察到了低淀粉酶血症。此外，在肥胖受试者中，由于其唾液组分的浓度降低，也发现了低淀粉酶血症。 四、 方法原理
α-淀粉酶显色试验使用 4,6-亚乙基 (G7)-对硝基苯基 (G1)-α-D-麦芽糖庚糖（亚乙基-G7PNP）作为 底物。本底物与α-淀粉酶起反应，片段与α-葡萄糖苷酶起反应，引起对硝基酚 (PNP) 的 100% 释 放。在 410 nm 处吸光度的升高与样本中α-淀粉酶的活性成正比
反应原理：
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分析参数： 样本体积 吐水量 波长 读点1 1ul 0ul 410/480 20/27 吐水量 R2体积 方法 0ul 25ul RATE R1体积 吐水量 反应方向 100ul 0ul + 五、 标本的采集与处理
尿液：定时或随机样本。在储藏前，先将其pH调到7.0左右。在2-8℃储藏，可保持稳定10天；在15-25℃储藏，可保持稳定2天。 六、 标本拒收标准
1）严重血尿、乳糜尿 2）标本标识不明 七、 仪器与材料
7.1. 仪器：Beckman Coulter AU 生化分析仪
7.2. 试剂：Beckman Coulter AU专用淀粉酶（AMY）试剂【货号OSR6182】
A. B.
起草人: 日期： 试剂准备：本试剂为即用型试剂，可以直接放在仪器上。
储藏和稳定性：在2-8℃不开封储藏时，试剂可保持稳定到声明的失效期；开封后，在分析仪上储藏时，可保持稳定90天，如果观察到变色，应丢弃试剂。
修改人： 日期： XXXX医院检验科 AU全自动生化仪淀粉酶SOP C.
文件编号: 生效日期: 仪器序列号：XXXXXX 页码 / Pages: 版本 / Revision: 参与反应成分的最终浓度：
HEPES缓冲液 (pH 7.15) 50 mmol/L 氯化钙 1 mmol/L NaCl 70 mmol/L
4,6-亚乙基-G7PNP > 1.4 mmol/L α-葡萄糖苷酶 ≥ 4.8 kU/L 防腐剂
此试剂作为体外诊断用；不要入口，吞下有害；避免接触皮肤，带上适当的手套；必
须将试剂及其容器作为有害废物处理 带上适当的手套；必须将试剂及其容器作为有 害废物处理。
7.3. 定标品：Beckman Coulter AU 尿液复合定标液 Urine Calibrator，货号ODC0025 7.4. 质控液：Biorad Liquichek Urine Chemistry Controls Cat. No. 397 和 398 八、 定标
Urine Calibrator，货号ODC0025。定标品值可溯源到手动 IFCC 参考方法和 IRMM/IFCC-456 详细操作步骤参见仪器操作规程
当发生下列情况时，重新定标分析：试剂批号改变或质控值显著变化；仪器提示需要定标时；对分析仪进行了重要的预防性维护，或更换了关键部件。 九、 质控
在Beckman Coulter AU 生化分析仪上测定Biorad Liquichek Urine Chemistry Controls Cat. No. 397 和 398
按照优良实验室规范（GLP）建议，在每天检验患者样本、以及在每次进行定标/空白测定时，均应检验质控品。每天测定两个水平的质控血清。本实验室获得的结果，可能与给定的均值不同，因此实验室在根据要求运行多次后，得出特定于被分析物的质控目标值，这些目标值应在相关产品文献提供的相应可接受范围内。
如果发现新的趋势或数值突然变化，应检查全部工作参数 当发生下列情况时，需要再次质控：重新定标、仪器保养后
十、 定标及质控达不到要求
10.1. 10.2.
查看定标报告，根据提示采取相应的措施 质控达不到要求：
A. 对同一份质控物质进行进行重新测定 B. 同批号内更换质控物质进行重新测定 C. 更换不同批号质控物质进行重新测定 D. 对失控项目进行重新定标
E. 检查仪器参数，进行仪器保养和维护 F. 请示上级主管，向专家请教
十一、
参考范围
期望值可能随着年龄、性别、样本类型、饮食和地理位置的不同而有所差异。各实验室应验证期望值对其人群的可转移性，必要时应按照优良实验室规范（GLP），测定自己实验室的参考范围。用于诊断时，应始终结合患者病史、临床检查和其他发现来评估结果。
本实验室综合评估后采取以下参考范围：
男 ≤ 490 U/L (8.16 μkat/L) 或 280 U/g 肌酐 女 ≤ 450 U/L (7.50 μkat/L) 或 380 U/g 肌酐 起草人: 日期： 修改人： 日期： XXXX医院检验科 AU全自动生化仪淀粉酶SOP 十二、具体性能特征
文件编号: 生效日期: 仪器序列号：XXXXXX 页码 / Pages: 版本 / Revision: 线性：在10 - 4800 U/L (0 – 80.0 μkat/L)的浓度范围内，本实验呈线性。 精密度：通过对3份血清混合物长达20天得分析，获得下列数据 N=60 平均值U/L 46 585 3732 批内检测 SD 0.62 5.04 21.11 CV% 1.35 0.86 0.57 SD 1.53 7.41 44.65 总计 CV% 3.34 1.27 1.20 灵敏度：灵敏度为最低可检测水平代表非零淀粉酶的最低可测量水平。本实验室通过重复测定不含被分析物的样本20次，将其绝对平均值加上三倍标准差，得出淀粉酶灵敏度可达到2U/L。 干扰物质：研究发现，本方法对干扰物质具有如下敏感性：
黄疸： 浓度达40mg/dL(684umol//L)的胆红素，干扰小于10% 溶血： 浓度达5g/L的血红蛋白，干扰小于5% 抗坏血酸：浓度达50mg/dl时，干扰小于5% 十三、参考文献
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7. Junge W, Wortmann W, Wilke B, Waldenstrom J, Weittenhiller A, Finke J, Klein G, Development and evaluation of assays
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8. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 5th ed. AACC Press, 2000.
起草人: 日期： 修改人： 日期：
AMY urine OSR6182
