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请问你曾经被IHC、ICC和IF所困扰过吗?
作者:北京义翘神州
在实验中,有没有一种感觉,就是对免疫组化(IHC),免疫细胞(ICC),以及免疫荧光(IF)傻傻分不清,那么今天我们就来讨论一下这三者的区别,先贴图上来以便有个大致的区分。
从图中我们可以看出,免疫检测技术可以根据报告标签的不同,分为免疫化学和免疫荧光两类,而根据样品类型不同,可以分为组织和细胞检测技术。因此,才会延伸出三个相近的概念。
为了更好的区分这三个概念,我们还可以根据他们的英文词根来分析一下,他们的英文名分别是免疫组织化学Immunohistochemistry (IHC),免疫细胞化学Immunocytochemistry (ICC),免疫荧光 Immunofluorescence (IF)。
词根分析:
Immuno-指的是免疫技术(例如,抗体和抗原的结合) Histo-指的是组织(细胞以及它周围的细胞外基质) Cyto-指的是细胞(不包含细胞外的基质)
Chemistry-在这里指的是化学检测方法(例如,颜色的变化) Fluorescence-对被激发的荧光团的检测
通过对词根的解释,相信你在心中不再迷茫了吧。 这三个应用技术都属于免疫技术,都是将抗原与抗体的结合可视化,即通过一定的方法可以直接看到实验结果。而常用的方法就是化学显色和荧光显色。如果报告标签是酶促的,就是免疫化学,如果是荧光的,就是免疫荧光。
其实我们纠结免疫荧光的一个原因还在于免疫荧光的英文名字Immunofluorescence
(IF),但若是写成免疫组织荧光(IHF)或是免疫细胞荧光(ICF),那我们是不是就豁然开朗了。虽然这两个词汇在英文文献中应用的还不是很广泛,但绝对不是我自己杜撰的哦,已经有些学者在使用了,规范化应该也只是时间的问题。
可能文字描述还是有些晦涩难懂,那我们就直接上图吧。先不看下面答案,仅从几张图片,你能明白哪张图代表哪种应用吗?
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A免疫组织化学:兔EGFR单克隆抗体(10001-R043-50)—人胎盘 B 免疫细胞化学:兔α微管蛋白单克隆抗体抗—MEF1细胞 C免疫荧光组织:兔Cdk5单克隆抗体—鸡脑组织
D免疫荧光细胞:兔JNK2/MAPK9(10745-R004-50)单克隆抗体—人Hela细胞 A图和B图是免疫化学(Immunochemistry),这种应用是抗体检测目标蛋白,发生了化学反应,然后显色,根据样本类型的不同,又可以分为免疫组织化学(A)和免疫细胞化学(B)。
C图和D图是免疫荧光(Immunofluorescence),这种应用根据抗体检测目标蛋白然后通过偶联荧光基团来显色。根据样本类型的不同可以分为免疫荧光组织(C)和免疫荧光细胞(D)。
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免疫组化和免疫荧光的区别
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