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两种Ames试验方法在蒲葵子提取物致突变试验中灵敏度的研究

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两种Ames试验方法在蒲葵子提取物致

突变试验中灵敏度的研究

(作者: ________ 单位: ___________ 邮编: ___________ )

【摘要】目的通过Ames试验与彷徨试验对蒲葵子正丁醇提 取

物的致突变试验结果,比较两种试验的灵敏度。方法对蒲葵子用正 丁醇浸提,用Ames试验方法(掺入法)与彷徨试验方法,对

TA100

鼠伤寒沙门氏菌株进行致突变试验。 结果两种试验方法结果显示,蒲 葵子正丁醇提取物在5~ 500卩g/ml剂量范围,以Amesti验方法与 彷徨试验均检测出阳性结果,而在

0.025卩g/ml与0.5卩g/ml剂

量下,彷徨试验能检测出阳性结果,而Ames方法未检测出阳性结果。 结论在较低浓度时,彷徨试验能检测出

Ames试验检测不出的阳性结

果,表明彷徨试验灵敏度较 Amest式验高。

【关键词】 正丁醇提取物;Ames彷徨试验;灵敏度

Abstract : ObjectiveTo compare the sensitivity of the Fluctuati on test and Ames test for exam in ati on of the sudde n cha nge caused by Chin ese fan-palm sub -n ormal butyl alcohol extraction.MethodsChinese

fan-palm was extracted with the normal

butyl alcohol, and Ames test and Fluctuation test were

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carried out to detect TA100 mouse salm on ella

typhimurium.ResultsThe results dem on strated that the extract in the range of 5

?500 卩 g/ml , the Ames test method and the

fluctuation test method detected the positive result, and in the range of 0.025

?0.5 卩 g/ml, the Fluctuation test could

exam ine positive result, but the Ames test could not cha nge. Conclusionln

low concentration, the Fluctuation

test can

examine positive result but Amestest can not, which indicated that the Fluctuation test has higher sensitivity test.

Key words : Normal butyl alcohol Fluctuati on test; Sen sitivity

extraction;

Ames;

than the Ames

鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验(Ames试验),是 利

用一组组氨酸营养缺陷型菌株加入待测物在有或没有微粒体活化 系统条件下,发生回复突变的特征鉴定化学物质的诱变活性,

现已成

为初步筛选化学物潜在致突变的首选方法。 彷徨试验也是一种细菌回 复突变试验,根据营养缺陷型菌株与受试化学物温育后在缺之相应营 养物的培养液中的生长情况判断所试化学物的诱变活性,

节省试验材

料(辅酶I其需Ames平板掺入法用量的20%)。实验结果表明,Ames 试验结果与动物致突变性有90%勺相符率,而彷徨试验对于弱的、具 有

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细胞毒性和低浓度的诱变/致突变物的检测有其优超性。 方法是较好的化学物质诱变活性评价的试验方法。

1材料 1.1受试药物

因此这些

蒲葵子正丁醇提取物:蒲葵子分别用 95临醇回流提取,浓缩成 浸膏后,用正丁醇反复浸提,得到提取物的浓缩部分 (以下简称蒲葵 子提取物)。

1.2实验菌株鼠伤寒沙门氏菌变异株组氨酸缺陷型

TA100(由美

国SIGMA公司提供),经鉴定为合格菌株,置于平板备用。

1.3阳性对照物①2-氨基芴,美国SIGMA公司;②叠氮钠,美 国 SIGMA公司。

1.4 Ames试验培养液按文献方法]1]配制,彷徨试验培养液按 美国SIGMA公司提供方法配制,体外活化系统(S9混合液)按标准方 法经多氯联苯诱导大鼠肝微粒体酶制备而成]2]。

2方法

2.1 Ames试验用标准平板掺入法]1],在经灭菌的45C左右含 顶层琼脂2 ml的试管中,依次加入受试物、菌液各 0.1 ml, S9混合 液0.5 ml,充分混匀后倒在底层培养基平板上铺平,

37C培养48 h,

每次试验同时设阴性,阳性对照,每个浓度设两个平行平皿,每个受 试物至少重复1次,计数平均每毫升回空菌落数。

两种Ames试验方法在蒲葵子提取物致突变试验中灵敏度的研究

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