增强型绿色荧光蛋白基因在日本血吸虫成虫体内的瞬时表达

增强型绿色荧光蛋白基因在日本血吸虫成虫体内的瞬时表

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袁小松;沈继龙;汪学龙;董慧芬;蒋明森

【期刊名称】《中国人兽共患病学报》 【年(卷),期】2006(022)001

【摘要】目的探讨异源性增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因在日本血吸虫成虫体内表达的可能性.方法运用电穿孔技术将质粒pEGFP-C1导入日本血吸虫成虫体内,提取分离体外培养48小时成虫的基因组DNA、总RNA和全虫蛋白,分别用PCR、RT-PCR和Western blot验证转基因在成虫体内的存在、转录和翻译.同时,使用激光共聚焦扫描显微镜对EGFP在成虫体内进行定位.结果 PCR和RT-PCR分别成功的扩增出760bp和276bp的预期大小的片断,Western-blot证实了EGFP基因在成虫体内的表达;激光共聚焦显微镜观察到,EGFP主要定位在成虫的皮层,口吸盘和尾部尤为明显.结论电穿孔技术成功地将异源基因引入日本血吸虫成虫体内并获得表达,为转基因血吸虫和基因功能的研究打下基础. 【总页数】4页(18-21)

【关键词】电穿孔技术;增强型绿色荧光蛋白;转基因血吸虫 【作者】袁小松;沈继龙;汪学龙;董慧芬;蒋明森

【作者单位】安徽医科大学病原生物学教研室,安徽省基因研究重点实验室,合肥,230032;安徽医科大学病原生物学教研室,安徽省基因研究重点实验室,合肥,230032;安徽医科大学病原生物学教研室,安徽省基因研究重点实验室,合肥,230032;武汉大学医学院病原生物学教研室;武汉大学医学院病原生物学教研室