X型题
1．遗传工程的主要内容包括（1992研考）
A.载体和目的基因的分离 B.限制性内切酶的切割，并把载体和目的基因合成重组DNA C.DNA重组体的转化表达 D.DNA重组体的扩增 2．重组DNA技术中，常用到的酶是（2001研考）
A.限制性核酸内切酶 B.DNA连接酶 C.DNA解螺旋酶 D.反转录酶 3．从带有遗传信息的mRNA构建成DNA重组体，要利用（1995研考） A.质粒 B.限制性核酸内切酶 C.DNA连接酶 D.反转录酶 4．下列关于质粒载体的叙述，正确的是（2003研考）
A．具有自我复制能力 B．有些质粒常携带抗药性基因 C．为小分子环状DNA D．含有克隆位点 5．在分子克隆中，目的DNA可来自（2005研考）
A．原核细胞基因组DNA B．真核细胞基因组DNA
C．PCR 合成的DNA D．真核细胞mRNA反转录获得的cDNA 6．重组DNA技术中可用于获取目的基因的方法有（2009研考） A.化学合成法 B.PCR C.Western blotting D.基因敲除 7．进行基因工程实验时，常用的技术有（1994研考）
A．分子杂交技术 B．DNA探针技术 C．质粒重组技术 D．基因调控技术 8．DNA重组技术中，用来筛选重组体的方法有（2010研考）
A.标志补救 B.分子杂交 C.特异性抗体与产物的结合 D.紫外分光光度计的分析 二、名词解释
1.DNA克隆 2.限制性核酸内切酶 3.基因载体 4.克隆载体 5.表达载体 6.质粒DNA 三、填空题
1．限制性内切核酸酶识别的核苷酸序列的个数为 、 和 ，其切口有 端和 端。
2. 基因工程常用的载体DNA分子有 、 和 。
3．目的基因获取的途径或来源有 、 、 和 。 四、简答题
1.根据给出的部分序列，请写出下列限制性核酸内切酶的全部识别序列：5′-XXXTTC-3′
3′-XXXXXX-5′
2.简述原核表达体系有哪些不足之处。
3.简述基因工程筛选过程中的分子杂交法和免疫学方法的区别。 4.简述重组DNA技术的基本操作步骤。
5. 基因工程中常用的载体有哪些种类？比较克隆载体和表达载体有那些不同之处？ 五、论述题
1.说明基因工程中α互补筛选的原理。
[参考答案]
一、选择题
A型题 1．D 2．A 3．C 4．A 5．A 6．D 7．B 8．D 9．B 10．D 11．C 12．B 13．A 14．C 15．E 16．A 17．A 18．C 19．E 20．E 21．C 22．C 23．C 24．E 25．B 26．E 27．A 28．E 29．E 30．B 31．A 32．E 33．D 34．C 35．B 36．D 37．C 38．A 39．B 40．C 41．E 42．E 43．B 44．C 45．A 46．C 47．E 48．B
49．D 50．A 51．D 52．C
B型题 1．A 2．B 3．D 4．A 5．D 6．B 7．D 8．E 9．A 10．B 11．B 12．A 13．C 14．C 15．B 16．D 17．C 18．A 19．B 附：近年研考及执考试题
A型题 1.A 2.A 3.D 4.D 5.C 6.B 7．C 8．B 9．D 10．E 11．E B型题 1.A 2.A 3.B 4.D
X型题 1.ABCD 2.ABD 3.ABCD 4.ABCD 5.ABCD 6.AB 7.ABC 8.ABC 二、名词解释
1.应用酶学的方法，在体外将目的DNA与载体DNA接合成一具有自我复制能力的DNA分子——复制子，继而通过转化或转染宿主细胞，筛选出含有目的基因的转化子细胞，再进行扩增提取获得大量同一DNA分子，也称基因克隆或重组DNA。
2.是识别DNA的特异序列, 并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶。 3.为携带目的基因，实现其无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子。 4.克隆载体为使插入的外源DNA序列被扩增而特意设计的载体称为克隆载体。
5.为使插入的外源DNA序列可转录翻译成 多肽链而特意设计的载体称为表达载体。 6.质粒是存在于细菌染色体外，能自主复制的小型环状双链DNA分子。 三、填空题
1．4个；6个；8个；粘；平 2．质粒DNA；噬菌体DNA；病毒DNA 3．化学合成法；基因组DNA；cDNA；聚合酶链反应 四、简答题
1. 5′-GAATTC-3′ 3′-CTTAAG-5′
（注：答题依据是限制性核酸内切酶识别的序列为反向重复的回文结构）
2.①缺乏转录后加工修饰；②缺乏翻译后加工修饰；③表达的蛋白质常呈包涵体；④很难表达大量的可溶性蛋白质。
3.前者是利用32P标记的探针与转移至硝酸纤维素抹上的转化子DNA或克隆的DNA片断进行分子杂交，直接选择并鉴定目的基因。后者是利用特异性抗体与目的基因表达产物相互作用进行筛选，属于非直接选择法。
4. ①目的基因的获取；②克隆载体的选择和构建；③外源基因与载体的连接；④重组DNA导入受体菌；⑤重组体的筛选⑥克隆基因的表达
5.基因工程中常用的载体有质粒；噬菌体；粘粒；病毒；酵母人工染色体。克隆载体用于扩增目的基因；需要有复制起点；筛选标志和多克隆位点。表达载体用于表达目的基因；除克隆载体的结构外还需要有启动子等转录调控序列和SD序列等翻译的调控序列。 五、论述题
1.载体中插入大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因的α片段，受体细胞含有β-半乳糖苷酶基因的ω片段，其N端缺失；在载体的α片段中插入目的基因，将重组体导入受体细胞，在β-半乳糖苷酶底物X-gal的培养基中培养宿主菌，含有目的基因的受体菌α片段被破坏，无酶的活性，X-gal不能分解，是白色菌落；空载体菌有完整的α片段，酶有活性，X-gal能分解，是兰色菌落。
第21章 DNA重组及重组DNA技术（1校）(1) - 图文
