凋亡抑制基因survivin真核表达载体的构建及其在
SHG44细胞中的表达
张家墅;甄海宁;章翔;张瑞;韩涛;左毅;王鹏;霍军丽
【期刊名称】《第四军医大学学报》 【年(卷),期】2009(030)016
【摘要】目的:克隆细胞凋亡抑制蛋白基因survivin(SVV)的编码序列,构建含SVV基因的真核细胞表达载体并观察其在人胶质瘤细胞系SHG44中的表达.方法:利用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)扩增SVV基因编码序列,扩增产物双酶切后定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中,成功构建SVV基因真核表达载体pcDNA3.1-SVV.通过脂质体介导用pcDNA3.1-SVV转染SHG44细胞,经G418筛选,RT-PCR、免疫蛋白印迹(Western Blot)和免疫细胞化学方法鉴定SVV的表达.结果:经酶切鉴定和核苷酸序列分析,证实成功构建了SVV基因真核表达载体pcDNA3.1-SVV.蛋白和RNA水平检测表明SVV基因在SHG44细胞中稳定表达.结论:真核表达载体pcD-NA3.1-SVV使SVV基因在SHG44细胞中稳定表达. 【总页数】4页(1457-1460)
【关键词】survivin;真核表达栽体;神经胶质瘤;SHG44细胞 【作者】张家墅;甄海宁;章翔;张瑞;韩涛;左毅;王鹏;霍军丽
【作者单位】第四军医大学西京医院全军神经外科研究所,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院全军神经外科研究所,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院全军神经外科研究所,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部免疫学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部免疫学教研室,陕西,西安,710033;第四
凋亡抑制基因survivin真核表达载体的构建及其在SHG44细胞中的表达
