POCT概述
即时检测(Point-of-care Testing,POCT)也称床边检测,指在患者身边,由非检验专业人员(临床人员或患者)利用便携式仪器快速分析患者标本并准确获取结果的分析技术,或者说测试不在主实验室而在一个可移动的系统内进行。 即时检测的优势: ? 大型自动化仪器的补充
?节省分析前、后标本处理步骤 ?缩短标本检测周期 ?快速报告检验结果 ?节约综合成本
第一节 POCT的基本原理及主要技术
一、POCT的基本原理
POCT技术的基本原理大致可分为四类:
1、把传统方法中的相关液体试剂浸润于滤纸和各种微孔膜的吸水材料中,成为整合的干燥试剂块,然后将其固定于硬质型基质上,成为各种形式的诊断试剂条; 2、把传统分析仪器微型化,操作方法简单化,使之成为便携式和手掌式的设备; 3、将上述两者整合为统一的系统;
4、应用生物感应技术,利用生物感应器检测待测物。 二、POCT的主要技术
1.简单显色(干化学法测定)技术
将多种反应试剂干燥、固定在纸片上,加上检验标本(全血、血清、血浆、尿液等)后产生颜色反应,用肉眼观察定性或仪器检测(多为半定量)。 2.多层涂膜(干化学法测定)技术
由感光胶片制作技术移植而来。将多种反应试剂依次涂布在片基上,制成干片,用仪器检测,可准确定量。 3.免疫金标记技术
胶体金颗粒具有高电子密度的特性,金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的标记处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,这一反应可通过银颗粒的沉积被放大。 4.免疫荧光技术
通过检测板条上激光激发的荧光,定量检测以pg/ml为单位的检测板条上单个或多个标志物。 5.生物传感器技术
利用离子选择电极,底物特异性电极,电导传感器等特定的生物检测器进行分析检测。
6.生物芯片技术
生物芯片技术是最新发展起来的技术。其特点是在小面积的芯片上同时测定多个项目。
7.红外和远红外分光光度技术
此类技术常用于无创性检测仪器,如经皮肤检测血液中血红蛋白、胆红素、葡萄糖等成分。 8.其他技术
第二节 常用的即时检测仪器介绍
目前POCT检测仪器的分类尚无一个统一的标准,但大致有下面三种分类方法:
1、按照用途分型:
快速血糖检测仪 电解质分析仪 血液分析仪 血气分析仪
抗凝测定仪 心肌损伤标志物检测仪 药物应用监测仪 酶联免疫检测仪 放射免疫分析仪 甲状腺激素检测仪等 2、根据仪器的大小和重量分型:
便携型 桌面型 手提式 手提式一次性使用型 3、根据所用的一次性装置分型:
卡片式装置 单一或多垫试剂条 微制造装置 生物传感器装置 其他多孔材料等装置
第三节 常用的即时检测仪器介绍
㈠多层涂膜技术相关POCT仪器
多层涂膜技术源于感光胶片制作技术,采用干化学技术,将液体样本直接加到固定于特定载体的干试剂上,样本中的水作为溶剂,样本中的待测成分与试剂进行化学反应,然后进行分析检测。
包括化学涂层技术多层膜法和差示电位多层膜法。 化学涂层技术多用于全自动生化分析仪,这类仪器临床应用较普遍,如快速血糖仪进行血糖等生化项目的检测。
差示电位多层膜法的仪器多用于电解质的测定。 ㈡免疫金标记技术相关的POCT仪器
免疫金标记技术是将胶体金颗粒与标记的抗原、抗体形成免疫金复合物的一种技术。
包括免疫渗滤和免疫层析技术相关的POCT仪器。 如HCG、FSH等金标定量检测仪,该仪器可快速定量检测血清和尿液中的待测物,样品无须复杂处理,操作简单方便,3分钟快速报告结果,内置标准曲线,检测范围宽。
㈢免疫荧光测定技术相关POCT仪器
免疫荧光技术是以荧光物质标记抗体而进行抗原定位或抗原含量检测的技术,又称为荧光抗体技术(fluorescent antibody technique)。 具有特异性强、敏感性高、速度快等特点。
采用该类技术的即时检测仪器有iCHROMATM Reader全定量免疫荧光检测仪等。
一台理想的床旁检测仪器应具备一下特点: 1.仪器小型化,便于携带;
2.操作简单化、一般3~4个步骤即可完成实验; 3.报告即时化,缩短检验周期; 4.经权威机构的质量认证;
5.仪器和配套试剂中应配有质控品,可监控仪器和试剂 的工作状态; 6.仪器检验项目具备临床价值和社会学意义; 7.仪器的检测费用合理;
8.仪器试剂的应用不应造成对患者和工作人员的健康损 害或对环境污染的不利影响。
第四节 即时检测仪器的临床应用
一、即时检测仪器的临床应用 1、在糖尿病诊治方面的应用
便携式血糖仪是诊断糖尿病POCT仪器中的最佳典范。
应用:动态监测血糖、测定糖化血红蛋白与尿微量白蛋白等指标。
特点:体积小,便于携带,操作简单快速,可用全血标本进行即时测定,标本无需抗凝、用血量少、无标本制备过程、检测周期(TAT)大大缩短。 2、在心血管疾病方面的应用
对于心血管疾病或怀疑是心血管疾病的患者: CRP即时检测仪器检测常规或超敏CRP 金标定量检测仪检测cTnI、Mb等
干化学分析仪检测CK-MB(单项或三项联合检测) 荧光传感器检测脑钠肽(BNP)等
通过即时检验仪器检测这些项目对于心血管疾病的防治有重要意义。 3、在感染性疾病中的应用
采用生物芯片和免疫金标记技术相关POCT仪器对细菌性阴道病、衣原体、性病等检测较培养法更为快速和灵敏。
POCT仪器也可用于医院中手术前传染病四项(HBsAg、HCV、HIV、TP)检测、内镜检查前的病毒性肝炎筛选等。 4、在发热性疾病方面的应用
CRP即时检测仪器对CRP的检测,与血常规联合应用,对鉴别发热患者感染病原体的性质(细菌或病毒)比单一检测更具特异性,为临床提供更充足的实验指标和诊断依据,可减少抗生素使用的盲目性,该检测组合已得到临床医师的普遍认可和支持。
5、在ICU病房内的应用
POCT检测仪器最能符合ICU病房患者的危急、重症的病情特点。 目前临床上ICU病房已使用的有:
体外系统的电化学感应器,可周期性地控制患者的血气、电解质、红细胞压积和血糖等;
体内系统,将生物传感器安装在探针或导管壁上,置于动脉或静脉管腔内,由监视器定期获取待测物的数据(由于体内监测仪系统耗费巨大,目前尚未被广泛应用)。
6、在儿科诊疗中的应用
对儿童疾病的诊断检测要求轻便、易用、无创伤或创伤性小、样品需求量少、无需预处理、快速得出结果等,以缩短就诊周期,还需要关注父母的满意度。 POCT能较好地达到上述要求,而且在诊断病情时父母可一直陪伴在孩子身边,更好地与医护人员交流。 7、循证医学中的应用
POCT弥补了传统临床实验室流程烦琐的不足,操作人员可以在实验室外的任何场所进行,快速、方便地获取患者某些与疾病相关的数据,便于达到循证医学有据可循的目的。 8、医院外的应用
由于POCT检测仪器体积小、便于携带,操作简便等,因此广泛应用于家庭自我保健、社区医疗、体检中心、救护车上、事故现场、出入境检疫、禁毒、戒毒中心、公安部门等医院外各场所。 二、即时检测仪器的临床应用实例 (一)快速检测血糖仪 1、检测原理:
目前快速血糖仪多采用葡萄糖脱氢酶法,根据酶电极的响应电流与被测血样中的葡萄糖浓度呈现线性关系计算血标本中的葡萄糖浓度值。当被测血样滴在电极的测试区后,由于电极施加有一定的恒定电压,电极上固定的酶与血中的葡萄糖发生酶反应,血糖仪显示葡萄糖浓度值。 2、维护: (1)血糖仪的清洁:用软布蘸清水清洁,不要用清洁剂清洗或将水渗入血糖仪内。 (2)血糖仪的校准:利用模拟血糖液检查血糖仪和试纸条相互运作是否正常。当出现以下几种情况时需要对血糖仪进行校准: ①第一次使用新购的血糖仪; ②使用新的一盒试纸条时;
③怀疑血糖仪和试纸条出现问题时;
④测试结果未能反映出患者感觉的身体状况时; ⑤血糖仪不小心摔落后。
3、快速检测血糖仪检测结果的质量保证: (1).首先要做好硬件管理,严格按照仪器要求维护所用设备,注意防潮,潮湿的空气可以使水分附着在仪器的检测通道上而影响检测结果。另外,试纸条取出后马上加盖,以免吸附水份变性。
(2).快速检测血糖仪的测定方法要正确,有研究显示,如果采用的是末梢血,自然流出的指尖血更准确可靠, 不可过分挤压, 以免混入组织液, 对结果造成稀释。正确方法为:用75% 的酒精消毒左手的无名指指尖,根据患者指尖皮肤的厚度选择刺针的档次,针刺后自然流血,滴入测定孔里,覆盖整个测定区。
(3).要注意某些药物对结果的影响,如:维生素、谷胱甘肽等,对异常结果要再次复检。
(4).在临床护理中常会发现一些末梢部位不适合采血者;如:过度水肿;角质层过厚等。在需要紧急检测的时候一定要具体问题具体分析,因人而异,以求结果的准确。
(5).要定期采用已知值的标本对仪器进行校正,以便对仪器的准确性做出评价。 4、快速检测血糖仪的临床应用价值:
快速检测血糖仪具有POCT检测仪器小型化,便于携带,操作简单,报告即时等优点,且检测费用合理,仪器试剂的正确应用不会对患者和工作人员的健康或对环境污染造成不利影响。
快速检测血糖仪具备广泛的临床价值和社会学意义,可为医务工作人员和糖尿病患者及其患者本人连续动态检测血糖带来便利,为疾病的控制和转归具有十分重要的意义。
(二)IRMA血气分析仪 1、检测原理:
IRMA血气分析仪由7.5V电池供电。血样通过微型电极传感器,由传感器通过电化学的原理将各种电信号转化为参数(ADC),最后由微处理机对这些数据处理后将结果存储和显示。定期检测温度质控和电子质控,确保结果稳定可靠。 2、维护:
IRMA血气分析仪的日常维护:电池的维护, 打印机的清洁,气压表的校准以及一般清洁。
保证最佳的电池性能:使用电池接近“空”时要及时充电,充完电的电池不要继续留在充电器中,否则会降低电池性能。 打印机:经常清洁。
气压表:要每年校准一次,确保分析仪的准确度。 常需清洁的系统部件如下:
①清洁触摸屏、充电器、电源供给器及分析仪表面; ②2.定期清洁电池接触点,电池充电器的接触点;
③清洁红外探头:每天检查红外探头的表面,细看有没有灰尘或污染,清洁后探头的方玻璃表面应当是光亮的,反射性能好,测试前探头一定要干透; ④4.清洁边缘连接器。
3、RMA快速血气分析仪检测结果的质量保证:
(1).抗凝剂要求 12500IU的肝素钠用100ml生理盐水稀释做抗凝剂,注射器抽取抗凝剂转动数次,针筒向上将抗凝剂排空准备抽血;
(2).采血要求 不用抗凝剂,采血量仅为0.5ml,需在3分钟内检测完毕;用抗凝剂,采血量仅需大于1.5ml,在30分钟内检测完毕;
(3).测试片保存温度在4~30℃,从冰箱取出后不可再放入冰箱; (4).按保养规程菜单行仪器保养。
4、IRMA快速血气分析仪的临床应用价值:
IRMA快速血气分析仪密闭零污染、零使用限制、零保养、采用完善成熟的技术原理、完善全面的质量控制体系、完善准确的信息存储和管理系统。
①一次性使用测定片,快速、简易、方便,无需电极保养,无需处理定标偏移,随意选择测定指标,降低成本;
②螺旋式/封闭式进样口,封闭式注入血样,防止医护人员因溅出的血液而感染;