三台中学2013级高二下期生物导学案
班级： ______
导学案编号：002
___ 组姓名 _______________ 教师评价 ___________
专题2课题1《微生物的实验室培养》
【课程标准】
具体内容标准:
进行微生物的分离和培养
用大肠杆菌为材料进行平面培养，分离菌落
【学习目标】
活动建议：
知识目标： 1. 举例说明有关培养基的基础知识
2. 概述无菌操作技术包括的主要内容
能力目标： 掌握纯化大肠杆菌的基本操作
【学习重难点】
重点：说出有关培养基的基础知识 难点：微生物培养中的有关实验操作
【自主探究案】
一、 基础知识 （一） 培养基
1. 按照配置成的状态,培养基的种类包括 _______________ 培养基和 __________ 培养基等。
2. 培养基的化学成分一般都含有 ________ 、 ______ 、 ___________ 、 _____________ 四类营养成分。 3. 在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对
以及 等的要求。例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添 加
菌时需要将培养
;培养霉菌时需要将培养基的
___________ 、
PH调至
;培养细
基的PH调至 _____________ ;培养厌氧微生物时需要提供 _____________ 的条件。 （二） 无菌技术
1. 获得纯净培养物的关键是 _________________ 。避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容：
① 对实验操作的 ____________ 、操作者的衣着和手进行清洁和 _______________ 。 ② 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行 _______________ 。
③ 为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 ______________________________ 附近进行。 ④ 实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 ________________________________ 相接触。
2. 消毒和灭菌
（1） 消毒是指使用 ________________________________________ 仅杀死物体表面或 _____________
的部分微生物（不包括 ________ 和 _______ ）。常用的消毒方法有 ____________ 、 __________ 。 此外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如用 ________________________________ 、 ____________ 等。此外，实验室里还用 _______________ 进行消毒。
（2） 灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体 ________________ 的微生物，包括芽孢和孢子。常
用的灭菌方法有 ______________________ 、 ___________________ 、 ________________________ ， 二、 实验操作：
1. 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
__________________ TTTT倒平板
，往往在灭菌前还
1
导学案002:微生物的实验室培养
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需^< _______________
2. 纯化大肠杆菌
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微生物接种的方法中最常用的是 _______________________ 和 ____________________________ 。 (1)平板划线法是指接种环在琼脂固体培养基表面 ______________________ 的操作，将聚集的菌种
_______________ 至y培养基的表面。
(2)稀释涂布平板法是指将菌液进行一系列的 __________________ ，然后将不同 ___________ 的菌液分
别涂布在琼脂固体培养基的表面 ,进行培养。在稀释度 _________________ 的菌液时，聚集在 一起的微生物将被分散成 _______________________ ，从而能在培养基表面形成单个的 ________ ，它在生态学上属于什么单位？ ______________________ .
三、 结果分析与评价
1. 如果接种大肠杆菌的培养基上生长的菌落颜色形状大小基本一致，说明接种符合要求。 2. 若培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中 _____________________ 未达到要求。 3. ________________ (作为对照的培养基)，在培养过程中出现了菌落，则说明培养基
____________ 不彻底，实验失败。 四、 菌种的保存
1. 对于频繁使用的菌种，我们可以采用 __________________ 法；利用固体斜面培养基培养后，保
存在 4C冰箱中，每 3?6个月转种培养一次，缺点 ____________________________________ 。
2. 对于需要长期保存的菌种，可以采用 __________________ 法；温度为 _________ 。
【合作探究案】
探究一：消毒与灭菌
1、 无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？ 2、 利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？ 3、 在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中，动作要迅速，原因是什么？ 4、 溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么？
探究二：有关“倒平板”操作
1. 培养基灭菌后，需要冷却到500C左右，才能用来倒平板。你用什么方法来估计培养基的 温度？
2. 为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 3. 平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
4. 在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用
来培养微生物吗？为什么？
探究三：有关“平板划线法”操作
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为什么仍然需
1.
在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，
要灼烧接种环吗？为什么?
2. 在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？
3. 在作第二次以及其后的划线操作是为什么总是从上一次划线的末端开始划线？
探究四：有关“稀释涂布平板法”操作
1、 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行，
想一想，涂布平板操作的第
结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,
2步应如何进行无菌操作？
2、 培养12h和24h后的菌落大小？菌落分布位置？原因？
3、 在某培养基上出现了 3种特征不同的菌落是什么原因？
【巩固提高案】
1. 下列措施中不属于消毒的是（ A. 酒精擦拭双手 CI2 C.皮肤受伤处涂紫药水D.灼烧接种环
）
B.向水中通入少量
）
2. 有关平板划线操作的叙述，正确的是（
A. 使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌
B. 打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞
C. 把皿盖打开，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可 D. 最后将平板倒置，放入培养箱中培养 3. 下列有关平板划线接种法的操作错误的是（ A. 将接种环放在火焰上燃烧
B. 将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液 D.接种环划线要将最后一区的划线与第一区的划线相连 4. 关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是（ A. 操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 B. 将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 C. 等培养基冷却至500C左右时进行倒平板 D. 将平板冷却凝固5-10分钟后将平板倒过来放置
5. 细菌培养过程分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次
用于杀灭哪些部位的杂菌（ 导学案002:微生物的实验室培养
）
）
）
C.蘸取菌液和划线要在火焰旁进行
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