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重金属汞残留的酶联免疫吸附检测技术研究
随着工业化、城市化发展，当前重金属残留污染呈上升趋势，重金属残留含量分析在环境、食品、卫生检测等领域受到了广泛关注。但以仪器方法为主的重金属污染检测方法(原子吸收光谱仪(AAS)、原子发射光谱仪／电感耦合等离子体(AES／ICP)、电感耦合等离子体原子发射光谱，质谱(ICP／MS)等)大多前处理周期较长，费用较高，难以适应环境及市场产品的现场抽查、生产企业自查及产品进出口快速通关的要求。因此，国内外对于市场销售及贸易过程中重金属残留污染物含量的快速、现场检测方法正受到前所未有的关注，为此投入了大量技术、资金和人力来开发和应用重金属残留含量分析新技术，并陆续形成生物化学传感方法、免疫方法、扫描电镜法、光诱导衰减波谱(SIBS)等重金属残留快速检测新方法。重金属免疫学检测方法的建立为重金属污染物的检测提供了另一种途径，该方法具有检测速度较快、费用低廉、简单易携、高度的灵敏度和选择性的特点，其中酶联免疫吸附法(Enzyme—linked immunosorbnent assy。ELlSA)技术较为成熟且样本前处理简单，便于大批量样本快速检测，可以适应重金属残留含量的微、痕量分析。
1 检测重金属残留含量的ELISA原理及技术
ELISA的基本原理是将特异的抗原抗体免疫学反应和酶学催化反应相结合，以酶促反应的放大作用来显示初级免疫反应。其检测方法是将受检标本(待测的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体发生反应，通过洗涤方法使固相载体表面上形成的抗原，抗体复合物与溶液
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中的其他物质分开，再加入酶标记的抗原或抗体，固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定比例关系，加入能与酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。ELISA检测重金属残留涉及到半抗原分子的制备、人工抗原分子的合成、动物免疫、抗体制备及纯化等几个关键技术环节。 2 ELISA检测重金属残留含量的技术方法
重金属离子免疫检测的关键在于重金属特异性单克隆抗体的制各，重金属特异性单克隆抗体制备的关键又在于重金属免疫原。由于重金属离子带有电荷，能与动物体内生物分子发生强烈的不可逆的反应，导致动物中毒。因此，可利用特异性的双功能螯合剂螯合重金属离子，形成能被动物免疫系统识别的金属-螯合剂的复合物，但这些重金属-螯合剂复合物是分子量低于lkD的半抗原，免疫原性低，不足以引起免疫反应，还需将之与载体蛋白偶联，才能形成完整的免疫原。制备重金属免疫原的关键在于双功能螯合剂筛选，双功能螯合剂应具有两个作用，除了能特异性螫合重金属离子之外，还能与载体蛋白偶联，形成免疫原。
3本研究的目的
①在线、实时、简易、易携带、高灵敏度，可以满足重金属残留
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的痕量分析要求；
②选择性好，可用于复杂样品的测量。一次性可处理大量样品； ③适用范围广，并易于推广到基层；
④专一性强、重复性好、且能持续地无限量供应； ⑤假阳性低。
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重金属汞残留地酶联免疫吸附检测技术地的研究
