2001级硕士研究生生化及分子生物学实验技术试题
（注意：在下列试题中任意选做10道。） 1． 根据分离物质的原理可将色谱法（层析法）分成哪几类？并简要说明其中凝胶层析法的分离原理。 2． 现有一混合液，含有A、B两种蛋白质，其中A的pI值为4.7，B的pI值为10.7， 将这混合液通过阴离子交换层析柱进行分离，洗脱液的pH值为7.4，试分析A、B 两种蛋白质的洗脱顺序，并简要说明理由。 3．原子发射光谱法在元素分析中有何优点？ 4．简要说明PCR实验中引物设计的基本要求。 5．简述影响颗粒电泳迁移率的主要因素。
6．比较Southern、Northern、Western印迹（Blotting）的不同。
7．mRNA差异显示技术中两步扩增所需引物名称及序列特点、各自扩增模板及利用模 板方向各为何？
8．何谓Kd值？简述Kd的几种情况。
9．离子交换层析法通过哪些方式改变样品与固定相亲和力而将样品洗脱下来？ 10．试述在SDS-PAGE法测定蛋白质分子量中试剂SDS的作用。
11．全血DNA提取中，TritonX-100、SDS和饱和NaCl溶液各起什么作用？ 12．PCR反应体系包括哪些成分？如何提高扩增产物的特异性？ 13．何谓限制性核酸内切酶？其作用的底物有何结构特点？
中国科学院2001年硕士学位研究生 入学考试分子遗传学试题
一、 简要解释下列名词概念 （30分） 1. Nucleobase; Nucleoside; Nucleotide 2. Transcription; Reverse transcription 3. mRNA; tRNA
4. Genome; Transcriptome; Proteome
5. Acidic amino acids; Basic amino acids 6. T-DNA; Organelle DNA 7. Plasmid; Phagemid
8. Nucleic acid hybridization; PCR 9. DNA helicase; DNA polymerase
10. RFLP marker; SSR marker； SNP marker
二、 简述真核生物基因组DNA复制的主要步骤及真核生物染色体的基本组成与结 构。 （12分）
三、 何谓中心法则？如何基于该法则来解释生物形状的遗传和变异？（10分） 四、 何谓细胞器基因组？举例说明细胞器基因组研究对揭示真核生物的生命现象 与进化的意义。 （10分）
五、 以E.coli为例说明原核生物基因组结构及基因结构和表达的特点，并简述这些特点对原核生物适应生存环境的意义。（12分）
六、 何谓顺式（cis）和反式 （trans）因子？举例说明这两种因子对基因表达调控的影响。 （10分）
七、 举例说明基因工程在改良动物、植物或微生物经济性状中的应用潜力，你认为在运用基因工程改良动物、植物或微生物经济性状过程中应注意哪些重要问题？（8分）
八、 简要回顾人类对基因的研究与认识过程并根据你的见解给基因下一个定义。（8分）
上海第二医科大学2001年分子生物学考研试题 一、简答： 1、基因 2、反义核酸 3、限制性内切酶 4、核酶 5、肽链 6、杂交 7、接触抑制 二、问答： 1、5-Fu抗癌机制。 2、核苷酸的生物功用。
3、重组DNA(基因工程)的主要步骤。 4、PCR相关技术及应用。
2001年中国农科院博士入学分子遗传学试题 一、名词解释
1、异源双链体 2、无义突变（琥珀突变） 3、卫星DNA 4、TATA框 5、反式作用 6、引发体 （其它没记下） 二、简答题
1、RF1、RF2、RF3的作用各是什么？
2、图解真核生物翻译起始，并说明各因子的作用。 3、真核生物中tRNA、rRNA、mRNA的剪接各有何特点？
4、如果一段DNA序列的两端为反向重复序列，若发生同源重组将会产生什么结果？ 5、病毒与细菌在遗传体系上有何差别？
6、启动子的作用是什么？原核生物启动子的结构特征是什么？
三、分子标记近年来发展很快，试举出三种分子标记，并论述它们在植物育种或动物育种或微生物上的应用？（此题好像有点问题？）
中科院上海生化所 2001 Molecular Genetics Paper
一.名词解释
1.基因组 2.原病毒 3.分子杂交 4.启动子 5.端粒酶 6.副MM子
二.是非
1.半保留复制是指有50%的基因是新合成的，另50%的基因是上一代的。
2.微生物全基因组测序的进展完全证明了真核生物是从原核生物直接进化而来。 3.φχ174 phage 是一种很小的 E.coli phage,它有5386个核苷酸,其DNA 为 双链环状.
4.调节基因一般都位于operon附近,这种构造有利于调节基因对operon的控制.
5.体外分子进化是使核酸分子在体外经过多次酶催化的扩增,从而积累突变的过程. 6.SP01是枯草杆菌的phage,它通过对RNA pol δ因子的更换实现其早,中,晚基因 表达的时序控制,这和T7噬菌体的生活方式非常类似. 7.细菌中衰减子的作用方式是用翻译的手段来控制转录. 8.RNA病毒又称为还原病毒.
9.Ti质粒来源于低等植物，目前被广泛用于植物基因工程。
10.Ac-Ds 是玉米中的一组转座控制成分，其中 Ds 来源于Ac序列，Ac对Ds的作用是顺式的。 11.只有用相同的内切酶获得的DNA片段末端才能用DNA连接酶连接起来。
12.在原核生物基因表达的正调控系统中，加入无辅基诱导蛋白后基因活性被开启。
13.由于MM子存在摇摆性，使得一种tRNA分子常常能够识别一种以上同一种氨基酸的MM子 。 14.原核生物中封闭性启动子复合物为二元复合物，开放性启动子复合物为三元复合物。 15.脚印法（footprinting）是用于研究protein与DNA相互作用的一种技术。 16.增强子的作用具有细胞或组织的特异性。
17.SRP （信号识别颗粒）能够与ribosome 结合并使肽链的起始暂时受阻，所以是翻译的负调控因子。
18.mRNA内部不存在甲基化的核糖核酸。
19.在真核生物的线粒体和叶绿体中的少数RNA pol都是核基因编码的。 20.topoisomerase 可以产生和消除超螺旋状态。
三.选择
1.原核生物中同一转录元里近基因的一个无义突变能阻止远基因的表达称为无义突变的极性效应，该现象
与RNA pol的哪一个亚基相关？ a. α b. β c.σ d.ρ
2. 真核生物的翻译起始复合物在何处形成？ a. 起始MM子AUG处 b. 5‘末端的帽子结构 c. TATA框 d. CAAT 框
3.下列何种生物形式的基因组中没有内元？ a，酵母 b，四膜虫 c T4噬菌体 d，大肠杆菌
4 下列哪种酶不能用来聚合酶链式反应PCR？
a，Taq DNA合成酶 b T7 DNA合成酶 c，引物酶 d，klenow片段
5.1微克的长度为1kb的DNA片段含有多少个分子？ a.~10^9 b.~10^12 c.~10^5 d.~6*10^21
6.在真核生物的染色体中，DNA约占多少？ a.66% b. 6% c. 27% d.80%
7.非洲爪蟾体细胞中rDNA拷贝数约有500个，而在卵母细胞中的拷贝数约增加了———倍，可以用来转录合成
卵裂所需要的ribosome。 a.1000 b.2000 c.4000 d.400
8.Lambda phage 的阻遏蛋白和cro蛋白均通过———的结构与DNA结合。 a. Cys-His ZF b.cys-cys ZF c. α-helix-turn-α-helix d.Leu zipper
9 真核生物组蛋白有一种特殊修饰作用，即组蛋白——上连接一个ubiquitin，这种修饰作用最初在 鼠肝中发现。
a.H2b b.H1 c.H2a d .H4
10.在E.coli中用于表达外源基因的vector在启动子下游通常含有S-D序列，这个序列的作用是——。 a 为ribosome提供识别位点。 b 提供转录位点。 c 增强启动子活性。 d 提高RNA稳定性。
11.还原病毒基因组结构有很高的相似性，通常都含有——三类基因。 a.gal,pol.env b.gal,src,ori c.pac,lac,LTR d.gin,tat,cin
12.鼠类的preproinsulin ，前胰岛素原Ⅰ基因是一个——。 a 半处理的mRNA返座产物 b 假基因 c 转座子序列 d 原病毒序列。
13.下列何种factor不会诱变DNA ？
a .亚硝酸 b . UV c .丫啶橙 d. 饱和脂肪乳剂
14.以下哪种情况不属于同源重组？ a 细菌接合
b 非姊妹染色体交换 c 细菌的转导
d 细菌plasmid的转化。
四.问答题。
1.根据 DNA复性动力学研究，DNA序列可以分成哪几种类型？并加以举例说明。 2.不同MM子使用频率的差异是如何影响基因表达量的？ 3.简述突变与碱基多样性的关系。
4.常用顺式作用和反式作用来描述基因的转录调控，试说明这两种作用的含义。
5.细菌的半乳糖operon在存在glucose时仍然可以被诱导，试解释之。并说明其对细菌正常生理过程的意义。
6.HGP即将完成，对下一步的研究谈谈你的看法。
2001级硕士研究生生化及分子生物学实验技术试题(精)
