南方农业学报JournalofSouthernAgriculture2018，49（7）：1378-1382·1378·南方农业学报ISSN2095-1191；CODENNNXAABhttp://www.nfnyxb.com49卷DOI：10.3969/j.issn.2095-1191.2018.07.18中药煎煮液对菜心体内5种多环芳烃的净化效果
2*
龙明华1，梁勇生1，，巫桂芬1，申海燕1，龙
彪1，唐3
璇1，李朋欣1，张慧娜1，
（1广西大学农学院，南宁530004；2南宁市农业科学研究所，南宁530021；3广西农业职业技术学院，南宁530007）
摘要：【目的】分析不同种类中药煎煮液对菜心体内多环芳烃（PAHs）的净化效果，为降低PAHs污染蔬菜风险提供参考依据。【方法】利用萘（NAP）、菲（PHE）、荧蒽（FLT）、苯并（α）蒽（BaA）和苯并（α）芘（BaP）5种PAHs混合液涂抹菜心1d后，再采用板蓝根、大青叶、淫羊藿、银杏叶、麦冬和黄芪6种中药煎煮液分别喷洒菜心植株，7d后检测分析菜心体内5种PAHs含量的残留情况。【结果】使用6种中药煎煮液（浓度分别为50.0、100.0和200.0g/L）喷洒PAHs涂抹胁迫的菜心后，检测到菜心体内的NAP、PHE、FLT、BaA和BaP含量分别为1.58~1.71、0、0~3.86、1.63~2.15和3.62~5.63μg/kg。6种中药煎煮液对PHE均有显著的净化效果（P<0.05），其中，板蓝根煎煮液对NAP和大青叶煎煮液对BaP的净化效果较明显，淫羊藿煎煮液对FLT的净化效果较佳，100.0g/L淫羊藿煎煮液对BaA也有一定的净化作用。【结论】中药煎煮液对菜心体内PAHs的净化效果与中药种类有关，与其使用浓度关系不密切，其中以大青叶和淫羊藿煎煮液的净化效果较佳。
关键词：菜心；多环芳烃（PAHs）；中药；净化作用中图分类号：S663.1
文献标志码：A
文章编号：2095-1191（2018）07-1378-05
PurificationeffectsoftraditionalChinesemedicinedecoctionliquidonfivekindsofpolycyclicaromatichydrocarbon（PAHs）inChinese
floweringcabbage
2*
LONGMing-hua1，LIANGYong-sheng1，，WUGui-fen1，SHENHai-yan1，
3
LONGBiao1，TANGXuan1，LIPeng-xin1，ZHANGHui-na1，
2
（1CollegeofAgriculture，GuangxiUniversity，Nanning530004，China；NanningInstituteofAgriculturalSciences，
3
Nanning530021，China；GuangxiAgricultureVocationalCollege，Nanning530007，China）
Abstract：【Objective】ThepurificationeffectsofdifferentkindsoftraditionalChinesemedicinedecoctionliquidon
thepolycyclicaromatichydrocarbon（PAHs）inChinesefloweringcabbagewereanalyzed.Itprovidedreferenceforredu-cingthePAHspollutionrisksofvegetables.【Method】ThemixedliquidsoffivekindsofPAHswereusedtodaubChinesefloweringCabbagefor1d，andthensixkindsoftraditionalChinesemedicinedecoctionliquidwereusedtosprayonit.After7d，theresidualofPAHscontentsinthevegetableweredetectedandanalyzed.ThefivekindsofPAHswerenaph-thalene（NAP），phenanthrene（PHE），fluoranthene（FLT），benzo（a）anthracene（BaA），andbenzo（a）pyrene（BaP），whilesixkindsoftraditionalChinesemedicinewereradixisatidis，foliumisatidis，herbaepimedii，ginkgoleaf，ra-dixophiopogonisandAstragalusmembranaceus.【Result】AftersprayingtheChinesefloweringCabbagewiththethreeconcentrations（50.0，100.0and200.0g/L）ofsixkindsoftraditionalChinesemedicinedecoctionsliquidwhichwasdaubedbyPAHs，thecontentsofNAP，PHE，FLT，BaAandBaPeinChinesefloweringcabbagewere1.58-1.71，0，0-3.86，1.63-2.15and3.62-5.63μg/kgrespectively.ThepurificationeffectsofsixkindsoftraditionalChinesemedicinede-coctionliquidonPHEweresignificant（P<0.05），andthepurificationeffectsofradixisatidisonNAPandthoseoffoliumisatidisonBaPwereobvious.ThepurificationeffectsofherbaepimediionFLTweresound，andherbaepimediialsohadcertainpurificationeffectsonBaA.【Conclusion】ThepurificationeffectsoftraditionalChinesemedicinedecoctionliquidonPAHsinChinesefloweringCabbagearerelatedtothekindsoftraditionalChinesemedicine，butarenotcloselyrelatedtoconcentration.Thepurificationeffectsoffoliumisatidisandherbaepimediidecoctionliquidarefine.
Keywords：Chinesefloweringcabbage；polycyclicaromatichydrocarbon（PAHs）；traditionalChinesemedicine；purificationeffect
收稿日期：2017-09-16基金项目：国家自然科学基金项目（31360479）；广西自然科学基金项目（2013GXNSFBA019091）；国家现代农业产业技术体系广
西蔬菜瓜果创新团队建设项目(nycytxgxcxtd-10-03)；广西研究生教育创新计划项目（YCBZ2012007）
作者简介：*为通讯作者，梁勇生（1979-），高级农艺师，主要从事蔬菜栽培技术及农产品质量安全研究工作，E-mail：b9523@163.
com。龙明华（1961-），教授，主要从事蔬菜育种及农产品质量安全研究工作，E-mail：longmhua@163.com
7期龙明华等：中药煎煮液对菜心体内5种多环芳烃的净化效果
·1379·0引言
【研究意义】多环芳烃（Polycyclicaromatichy-drocarbons，PAHs）是一类2~6环芳香族化合物，具有强致癌性、致突变性和致畸性，既可通过大气沉降作用附着在蔬菜叶片表面进入蔬菜体内，也可通过土壤溶液被蔬菜根系吸收进入蔬菜体内（Elsaeidetal.，2015）。多数PAHs类化合物难以降解，是持久性污染物（刁硕等，2017）。已有研究显示，生物体吸收菲（PHE）96h即达到平衡，生物富集因子为5000，吸收苯并（α）芘（BaP）192h达到平衡，生物富集因子为43000（Huangetal.，2013）。经过生物体长时间的富集及食物链的放大作用，PAHs在生物体内的富集可达非常危险水平，其生态风险极高（Luetal.，2009）。目前，PAHs的积累性污染已威胁到农作物质量安全，直接危害人类健康（王涛等，2016）。菜心是较易受PAHs污染的食叶类蔬菜，以其为PAHs胁迫对象进行不同种类中药煎煮液净化PAHs含量效果分析，对降低PAHs污染蔬菜风险和提高蔬菜质量安全水平具有重要意义。【前人研究进展】许超等（2009）研究认为，种植玉米可加快土壤中芘的降解速度。Zhu等2009）研究认为，玉米根系分泌物在无NaN3条件下可促进PHE从土壤中解吸。钟磊等（2010）研究发现，PHE降解复合微生物菌群对PHE的降解率在95%以上。诸卫平（2013）研究发现，金银花和丁香煎煮液对土壤中的PAHs有明显降解和净化作用。Shao等2015）研究表明，油菜、黑麦草和高羊茅去除PAHs效果较好，其中油菜对PHE和芘的去除率分别达98%和86%。潘声旺等（2016）、汤敏和欧阳平（2016）研究发现，对PAHs的净化主要通过自然降解、物理化学降解、植物降解和微生物降解来实现。杨明忠等（2016）研究认为，植物自身产生的酶类等物质与植物体内的PAHs含量有一定响应。【本研究切入点】我国开展PAHs净化或降解的研究起步较晚，但研究的力度呈上升趋势，目前主要侧重于微生物降解和植物自我降解修复两个方面（陈悦等，2015），鲜见有关蔬菜中PAHs净化作用研究的报道，也未见利用中药对菜心体内PAHs进行净化的相关报道。【拟解决的关键问题】菜心经萘（NAP）、PHE、荧蒽（FLT）、苯并（α）蒽（BaA）和BaP5种PAHs涂抹胁迫后再用板蓝根、大青叶、淫羊藿、银杏叶、麦冬和黄芪6种中药煎煮液进行喷洒处理，利用高效液相色谱法检测分析菜心体内各PAHs的残留情况，探索净化蔬菜体内PAHs的有效方法，为生产上降低PAHs污染蔬菜风险提供参考依据。
1材料与方法
1.1
试验材料四九甜脆菜心（BrassicaparachinensisBailey）
种子购自广西柳州市兴旺蔬菜良种经营部；板蓝根、大青叶、淫羊藿、银杏叶、麦冬和黄芪6种中药购自广西南宁市一心药店。16种PAHs混标液购自美国SIGMA-ALORICH公司；5种PAHs标准物购自日本东京化成工业株式会社，其信息见表1；乙腈、二氯甲烷和正己烷为色谱纯，丙酮为分析纯。主要仪器设备：高效液相色谱仪（美国WATERS公司），ECOSILHPLCCOLUMN-C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）。
表15种PAHs的相关信息
Table1InformationofthefivekindsofPAHs
名称环数
分子量毒性因子NameRingMol.wtTEFs萘NAP2128.000.001菲PHE3178.230.001荧蒽FLT4202.250.001苯并（α）蒽*BaA*4228.300.100苯并（α）芘*BaP*
5
252.32
1.000
*属于导致动物致癌的化合物
*indicatedcarcinogeniccompoundstoanimals
1.2试验方法
1.2.1中药煎煮液及PAHs混合液配制中药煎煮液配制：称取50.0、100.0和200.0g板蓝根、大青叶、淫羊藿、银杏叶、麦冬和黄芪各1份，浸泡过夜后煎煮熬制，4层纱布过滤，定容至1.0L，分别配制成50.0、100.0和200.0g/L板蓝根、大青叶、淫羊藿、银杏叶、麦冬和黄芪药液，4℃保存备用。
10.0mg/LPAHs混合液配制：称取NAP、PHE、FLT、BaA和BaP各0.0020g，加入丙酮充分溶解后定容至1.0L，密封于棕色瓶中，4℃保存备用。1.2.2试验设计为避免外界因素影响，本研究采用温室大棚深液流水培养法对菜心进行栽培管理，营养液配方采用日本园试通用配方。将10.0mg/LPAHs混合液用丙酮溶液稀释配制成600.0μg/LPAHs混合液备用，用软毛刷将其涂抹到苗龄为28d的菜心叶片和茎秆上，每株涂10.0mL，即每株涂抹6.0μgPAHs。涂抹PAHs混合液1d后，分别将上述6种不同浓度中药煎煮液用喷壶均匀喷洒于菜心植株上，以喷洒蒸馏水为对照（CK），每株喷100.0mL，每处理3株，重复3次，中药煎煮液喷洒处理7d后收获菜心并检测其地上食用部分的NAP、PHE、FLT、BaA和BaP含量。
1.2.3PAHs提取和测定参照高彦征等（2005）的方法对菜心样品中的PAHs进行提取和检测。为使目标检测物较好地分离，本研究采用梯度洗脱方式提取PAHs，洗脱程序见表2。图1为16种PAHs混标液的液相色谱检测效果图。其中，NAP、PHE、FLT、BaA和BaP的保留时间分别为4.63、9.12、11.779、17.488和23.235min。
（（·1380·表2PAHs梯度洗脱程序
Table2GradientelutionprocedureofPAHs
南方农业学报49卷时间（min）流动相A（乙腈）（%）流动相B（纯水）（%）TimeMobilephaseA（acetonitrile）MobilephaseB（purewater）050503752558515301000
异不显著（P>0.05，下同），其中，3个浓度板蓝根处理
的NAP含量均最低，且明显低于CK；同种中药不同浓度煎煮液处理后，菜心体内的NAP含量间差异不明显。说明6种中药对菜心体内的NAP均有一定净化作用，但仅板蓝根对NAP的净化效果较明显。
表3中药煎煮液对菜心体内NAP含量的影响（μg/kg）
Table3InfluenceoftraditionalChinesemedicinedecoctionli-quidonthecontentofNAPinB.parachinensis（μg/kg）
中药名称
TraditionalChinesemedicine
中药煎煮液浓度（g/L）
ConcentrationoftraditionalChinese
medicinedecoctionliquid50.0100.0200.0
板蓝根Radixisatidis1.581.591.59大青叶Foliumisatidis1.651.651.64淫羊藿Herbaepimedii1.681.691.69银杏叶Ginkgoleaf1.611.651.64麦冬Radixophiopogonis1.701.711.69黄芪Astragalusmembranaceus1.681.641.69CK1.721.721.72
1.3
统计分析
试验数据采用Excel2010和SPSS15.0进行统计分析。
2结果与分析
2.1不同中药煎煮液处理对菜心体内NAP的净化效果
由表3可知，在CK和不同浓度中药煎煮液喷洒处理的菜心体内均检测到NAP，各中药煎煮液处理菜心的NAP含量（1.58~1.71μg/kg）均低于CK，但差
0.030吸光值Absorbancevalue0.0250.0200.0150.0100.0050.000
0.00
5.00
10.00
15.00
20.0025.0030.0035.00
保留时间（min）Retentiontime
Fig.1
图116种PAHs混合标准液的高效液相色谱图
Highperformanceliquidchromatography（HPLC）figureof16kindsofPAHsstandardsolution
表4中药煎煮液对菜心体内PHE含量的影响（μg/kg）
Table4InfluenceoftraditionalChinesemedicinedecoctionliquidonthecontentofPHEinB.parachinensis（μg/kg）
中药名称
TraditionalChinesemedicine
中药煎煮液浓度（g/L）
ConcentrationoftraditionalChinese
medicinedecoctionliquid50.0100.0200.00b0b0b0b0b0b0b0b0b0b0b0b0b0b0b0b0b0b1.09a1.09a1.09a
2.2不同中药煎煮液处理对菜心体内PHE的净化
效果
由表4可知，CK的菜心体内可检测到PHE，含量为1.09μg/kg，而在各中药煎煮液处理的菜心体内均未检测到PHE。说明6种中药煎煮液对PHE具有显著的净化作用（P<0.05，下同）。
2.3不同中药煎煮液处理对菜心体内FLT的净化效果
由表5可知，在50.0g/L的6种中药煎煮液处理菜心体内未检测到FLT；100.0g/L淫羊藿处理的菜心体内未检测到FLT，而以100.0g/L板蓝根、大青叶、银杏叶、麦冬和黄芪煎煮液处理菜心后，其体内均检测到FLT，但含量（0~1.81μg/kg）均显著低于CK；在200.0g/L板蓝根、大青叶、淫羊藿和黄芪煎煮液处理菜心体内均未检测到FLT，而在200.0g/L银杏叶和麦冬煎煮液处理的菜心体内可检测到FLT（含量为1.65~3.86μg/kg），其中银杏叶处理的FLT含量显著低于CK，麦冬处理的FLT含量低于CK，但差异不显著。说明使用50.0g/L中药煎煮液即可净化FLT对菜心的污染，
板蓝根Radixisatidis大青叶Foliumisatidis淫羊藿Herbaepimedii银杏叶Ginkgoleaf
麦冬Radixophiopogonis黄芪A.membranaceusCK
同列数据后不同小写字母表示差异显著（P<0.05）。表5~表7同
Differentlowercaselettersinthesamecolumnrepresentedsignificantdifference（P<0.05）.ThesamewasappliedinTable5-Table7
使用100.0g/L中药煎煮液对FLT的净化效果反而不佳。3个浓度淫羊藿煎煮液处理的菜心体内均未检测到FLT，说明其对FLT的净化效果最佳，而麦冬煎煮液处理菜心体内检测到的FLT含量随麦冬煎煮液浓度的增加而增加，说明其对FLT污染的净化效果最差。
_________________中药煎煮液对菜心体内5种多环芳烃的净化效果_________________
