原发性肝癌血管生成拟态表达对患者预后的影响

原发性肝癌血管生成拟态表达对患者预后的影响

李 杰1，马晓洁2，杜小波1，冯 岗1，谭榜宪2△

【摘 要】【摘要】 目的 探讨血管生成拟态(vasculogenic mimicry，VM)表达对原发性肝癌(primary liver cancer，PLC)患者预后的影响。方法 收集161 例临床病理资料完整的PLC 术后标本，15 例癌旁组织做为对照。采用CD31-PAS 双重免疫组化染色观察VM 的表达，并进行统计分析。结果 161 例PLC 患者VM 表达率为37.9%(61/161)，对照组15 例无VM 表达。VM 表达阳性者中位生存时间较阴性者少18.6 月，1、2、3 年的生存率分别为56%、40%和26%，生存分析显示其与VM 表达阴性者差异有统计学意义(Log-rank=10.705，P=0.001)。关联性分析结果显示VM 的表达与PLC 的TNM 分期、肿瘤大小及肝细胞癌Edmondson 分级有关(P 值分别为0.025、0.032 和0.006);肝硬化与VM 的表达存在明显的相关性(χ2=8.284，P=0.004);Ⅲ～Ⅳ期、同一肿瘤体积分组(≥5 cm，＜5 cm)PLC 患者以及HCC 患者1、2、3 年的生存率与VM 的表达存在明显的相关性。结论 PLC 中存在VM 表达，VM 表达阳性者生存时间短于VM 阴性者，VM 可能是影响原发性肝癌患者预后生存率的一个因素。

【期刊名称】实用医院临床杂志 【年(卷),期】2014(011)002 【总页数】5

【关键词】【关键词】 血管生成拟态;原发性肝癌;胆管细胞癌 【文献来源】

https://www.zhangqiaokeyan.com/academic-journal-cn_practical-journal-clinical-

medicine_thesis/0201225947110.html

肿瘤的生长需要血液供应，内皮细胞所构成的血管是肿瘤获取血供的主要形式。近年来，关于恶性食管间质瘤、肺癌、胃癌、视网膜母细胞瘤［1 ～4］等多种恶性肿瘤的研究均提到了一种区别于经典血管生成途径的全新的肿瘤微循环模式——血管生成拟态(vasculogenic mimicry，VM)。多数研究结果认为VM 是肿瘤患者预后的不利因素。VM 的形成不依赖于血管内皮细胞，而在特定的微环境中由肿瘤细胞表达部分内皮细胞表型，通过自身变形与细胞外基质相互作用，模拟正常血管生成途径取代内皮细胞形成可以输送血液的微循环管道。本研究应用免疫组化及特殊染色法观察原发性肝癌(primary liver cancer，PLC)组织中VM 的表达，结合患者的随访资料，探讨VM 表达与PLC 患者预后的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集川北医学院附属医院2007 年6 月至2010 年8 月手术治疗、经病理学确诊的196例PLC 患者的术后标本，排除非肝癌原因死亡(包括术中死亡、住院期间并发症死亡)，以及年龄大于80 岁或小于18 岁的患者，共纳入术前未接受放、化疗(包括肝动脉介入治疗)，临床病理资料完整的161 例，对照组选择15 例病理明确的PLC 癌旁组织。161 例中男122 例，女39 例;年龄23 ～78 岁，中位年龄54 岁;肝细胞肝癌(Hepatocellular Carcinoma，HCC)138 例，胆管细胞癌15 例，混合型8 例;临床分期Ⅰ～Ⅱ57 例，Ⅲ～Ⅳ104 例。肝细胞癌Edmondson 分级:Ⅰ～Ⅱ57 例、Ⅲ～Ⅳ81 例;伴有肝硬化的患者45 例。分期标准采用AJCC/UICC 第七版(2009)分期法，病理分级根据Edmondson 分级法，将Ⅰ～Ⅱ级合并为高分化组，Ⅲ～Ⅳ级合并为低分化组。

1.2 研究方法

1.2.1 CD31-PAS 双重染色 取蜡块肿瘤组织连续切片，明确诊断、分化程度以及是否合并肝硬化。CD31 小鼠抗人单克隆抗体(产品编号:ZM-0044)免疫组化染色按照PV6000 免疫组化染色试剂盒(产品编号:PV-6000)步骤进行，直至DAB 显色后显微镜控色，待内皮细胞着色后(棕黄色)，流水冲洗1 min 终止显色。在此基础上行PAS 特染:0.5%高碘酸溶液中还原10 min，流水冲洗2 min 后置于Schiff液中，避光环境下反应10 ～15 min，蒸馏水冲洗两次，每次1 min，流水冲洗2 min。苏木素浅染细胞核、盐酸酒精分化、返蓝、脱水透明、中性树胶封片。PAS 染液(产品编号:SP-0002)购自北京中杉金桥生物技术公司;DAB 显色剂(产品编号:AR1022)购于武汉博士德公司。

1.2.2 VM 判定标准 CD31 阳性(棕黄色)的管腔判定为内皮血管或肝血窦;CD31 阴性的管腔，外附PAS 阳性(淡红色)的细胞外基质，管腔内有红细胞，结合HE 染色进一步观察判定为VM 阳性。胆管细胞癌中VM 阳性的切片需进一步与胆管结构进行鉴别，管壁不完整，管壁细胞形态不规则、管腔内可见血细胞、管壁外附PAS 阳性的细胞外基质为VM 阳性。

1.2.3 随访 通过书信、电话、门诊、入户调查等方式进行全面随访，随访时间截止到2011 年11 月20日，随访终点为死亡、失访及生存至截止日期。 1.3 统计学方法 采用SPSS 17.0 软件包进行统计分析。计数资料比较采用χ2 检验或Fisher 确切概率法。行列表资料的关联性分析用χ2 检验。生存率采用寿命表法。生存分析及生存曲线采用Kaplan-Meier(Log-rank)法。P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果