电泳技术相关习题
一、名词解释
1. 电泳:指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。 2. 蛋白质的等电点:当溶液的酸碱度处于某一特定pH值时,它将带有相同数量的正、负电荷(即净电荷为零),致使蛋白质分子在电场中不会移动,称此特定的pH值为该蛋白质的等电点。
3. 电泳速度:在单位时间内,带电粒子在毛细管中定向移动的距离。 4. 迁移率:带电粒子在单位电场强度下的移动速度,常用μ来表示。 5. 迁移时间:毛细管中,带电粒子在电场作用下作定向移动的时间。 二、单项选择题
1 .瑞典科学家 A . Tiselius 首先利用 U 形管建立移界电泳法的时间是( ) A . 1920 年 B . 1930 年 C . 1937 年 D . 1940 年 2 .大多数蛋白质电泳用巴比妥或硼酸缓冲液的 pH 值是( ) A . ~ B . ~ C . ~ D . ~
3 .下列 有关电泳时溶液的离子强度的描述中,错误的是 ( ) A .溶液的离子强度对带电粒子的泳动有影响 B .离子强度越高、电泳速度越快 C .离子强度太低,缓冲液的电流下降
D .离子强度太低,扩散现象严重,使分辨力明显降低
4 .电泳时 pH 值、颗粒所带的电荷和电泳速度的关系,下列描述中正确的是( ) A . pH 值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越慢 B . pH 值离等电点越近,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越快 C . pH 值离等电点越远,颗粒所带的电荷越少,电泳速度也越快 D . pH 值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越快 5 .一般来说,颗粒带净电荷量、直径和泳动速度的关系是( ) A .颗粒带净电荷量越大或其直径越小,在电场中的泳动速度就越快 B .颗粒带净电荷量越小或其直径越小,在电场中的泳动速度就越快 C .颗粒带净电荷量越大或其直径越大,在电场中的泳动速度就越快 D .颗粒带净电荷量越大或其直径越小,在电场中的泳动速度就越慢
6 .电泳时对支持物的一般要求除不溶于溶液、结构均一而稳定外,还应具备( ) A .导电、不带电荷、没有电渗、热传导度小、 B .不导电、不带电荷、没有电渗、热传导度大 C .不导电、带电荷、有电渗、热传导度大 D .导电、不带电荷、有电渗、热传导度大 7 .醋酸纤维素薄膜电泳的特点是( ) A .分离速度慢、电泳时间短、样品用量少 B .分离速度快、电泳时间长、样品用量少 C .分离速度快、电泳时间短、样品用量少 D .分离速度快、电泳时间短、样品用量多
8 .聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的凝胶,其优点是( ) A .机械强度好、弹性小、无电渗作用、分辨率高
B .机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率高 C .机械强度好、弹性大、有电渗作用、分辨率低 D .机械强度好、弹性大、无电渗作用、分辨率高
9 . 20 世纪 60 年代中期问世的等电聚焦电泳,是一种( ) A .分离组份与电解质一起向前移动的同时进行分离的电泳技术 B .能够连续地在一块胶上分离数千种蛋白质的电泳技术 C .利用凝胶物质作支持物进行的电泳技术
D .利用有 pH 值梯度的介质,分离等电点不同的蛋白质的电泳技术
10 .毛细管等电聚焦电泳具有极高的分辨率, 通常可以分离的两种蛋白质其等电点差异小于 ( ) A . 单位 B . 单位 C . 单位 D . 单位
11 .下述免疫电泳优点的描述中,错误的是( ) A .加快了沉淀反应的速度
B .是将某些蛋白组分根据其带电荷的不同而将其分开,再与抗体起反应 C .本法微量化程度高 D .应用范围小
12 .毛细管电泳的特点是( )
A .容易自动化,操作繁杂,环境污染小 B .容易自动化,操作简便,环境污染大 C .容易自动化,操作繁杂,环境污染大 D .容易自动化,操作简便,环境污染小 13 . 毛细管等速电泳 常用于分离( ) A .小离子、小分子、肽类及蛋白质 B .大离子、小分子、肽类及蛋白质 C .小离子、大分子、肽类及蛋白质 D .小离子、中分子、肽类及蛋白质
14 .下述有关毛细管区带电泳的叙述中,不正确的是( ) A .也称为毛细管自由溶液区带电泳 B .是毛细管电泳中使用最少的一种技术 C .根据组分的迁移时间进行定性
D .根据电泳峰的峰面积或峰高进行定量分析
15.下述对毛细管凝胶电泳原理的叙述中,不正确的是 ( ) A .是将板上的凝胶移到毛细管中作支持物进行的电泳 B .凝胶具有多孔性
C .能根据待测组分的离子强度不同而进行分离 D .起类似分子筛的作用
1、C 2、D 3、B 4、D 5、A 6、B 7、C 8、D 9、D 10、A 11、D 12、D 13、A 14、B 15、C
三、判断题
1、电泳分离技术适用于分离各种离子和非离子的混合物() 错 2、高压电泳是指电场强度>20伏/cm,常用于高分子离子的分离() 错
3、电场引力F的大小取决于粒子荷电量Q及电场强度E() 对 4、在非分子筛的连续电泳系统中,不同种类的带电物质其电泳动率取决于Q/r比值()对 5、电泳缓冲液常用离子强度为~ mol/L之间() 错 6、SDS-PAGE主要用于分离分子量不同的蛋白质混合物() 对 7、蛋白质在小于等电点的pH溶液中向阳极移动,而在大于等电点的pH溶液中向阴极移动() 错
8、电泳缓冲液离子强度越高,电泳泳动率越快() 错 四、简答
1、溶液的Ph值对电泳速度有何影响
答:溶液的pH值决定了带电质点的解离程度,也决定了物质所带电荷的多少。对蛋白质、氨基酸等两性电解质而言,pH值离等电点越远,颗粒所带的电荷越多,电泳速度也越快。反之,则越慢。
2.电泳设备对支持物一般有何要求
答:要求不溶于溶液,不导电,吸液量多而稳定,不带电荷,没有电渗,不吸附蛋白质等其它电泳物质,热传导度大,结构均一而稳定,分离后的成份易析出等。 3.简述聚丙烯酰胺凝胶电泳特点及应用范围。
答:特点:具有机械强度好、弹性大、透明、化学稳定性高、无电渗作用、设备简单、样品量小(1μg~100μg)、分辨率高等。
应用范围:可用于蛋白质、核酸等分子大小不同的物质的分离、定性和定量分析。还可结合去垢剂十二烷基硫酸钠(SDS),以测定蛋白质亚基的相对分子质量。 4、简述等电聚焦电泳法的原理、特点。
答:原理:不同的蛋白质等电点不同,如果分子处于pH和等电点一致的溶液中,则泳动就停止进行。如果溶液内的pH是位置的函数,或者说有一个pH的位置梯度,那么在一个稳定连续的线性pH梯度的溶液(两性载体电解质)中进行分离,每一种被分离的两性物质都移向与它的等电点相一致的pH位置,在那里不再移动(称为聚焦)。由于在这点净电荷(正负抵消)为零,因而又称等电聚焦。
特点:①使用两性载体电解质,在电极之间形成稳定的、连续的、线性的pH梯度;②由于“聚焦效应”,即使很小的样品也能获得清晰的、鲜明的区带界面;③电泳速度快;④分辨率高;⑤加入样品的位置可任意选择;⑥可用于测定蛋白质类物质的等电点;⑦适用于中、大分子量(如蛋白质、肽类、同工酶等)生物组分的分离分析。 5、简述毛细管电泳法进样技术的注意事项。 答:(1)毛细管一旦插入样品溶液,应立即开始进样操作,否则将会产生毛细作用及虹吸现象,引起误差并使谱带展宽;(2)如果电极和毛细管接触,毛细作用可能导致进样时样品区带出现间断现象,使定量精度降低,区带展宽,甚至使峰分裂;(3)只要检测器的灵敏性能提供足够的信号强度,进样区带越小越好,加大进样区带会使校效和分离度降低;(4)注意温度对进样体积的影响;(5)样品溶液中的溶剂必须是能和运行缓冲液互溶的并不引起后者的沉淀,另外,前者的离子强度要低于后者的离子强度。