西北大学硕士毕业论文２．４．２溶磷作用的测定结果翟奢麟趣旗籁弹晕１Ｕ黠闼（ｄ）图３－５复合菌组对土壤中速效磷含量的影响Ｆｉｇ．３－５Ｅｆｆｅｃｔｏｆｃｏｍｐｌｅｘｍｉｃｒｏｂｉａｌｃｏｍｍｕｎｉ够ｏｎｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｔｈｅａｖａｉｌａｂｌｅＰｉｎｓｏｉｌ由图３—５可知，接种复合菌组的土壤中速效磷的含量达到１６２ｍｇ／ｋｇ，明显高于对照组和单一溶磷菌组。２．４．３解钾作用的测定结果由图３—６９知，接种复合菌组的土壤中速效钾的含量达到９６．４ｍｇ／ｋｇ，明显高于对照组和单一解钾菌组。∞∞∞孢∞∞婚∞∞俺。’Ｏ敝霹（ｄ）图３－６复合菌组对土壤中速效钾含量的影响Ｆｉｇ．３—６Ｅｆｆｅｃｔｏｆｃｏｍｐｌｅｘｍｉｃｒｏｂｉａｌｃｏｍｍｕｎｉｔｙ０１１ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｔｈｅａｖａｉｌａｂｌｅｋｉｎｓｏｉｌ西北大学硕士毕业论文３本章小结溶磷、解钾细菌可将土壤中难溶性磷、钾转化为作物可以吸收利用的速效磷、钾养分，固氮菌则可将大气中游离的氮固定下来，转化为作物可直接吸收利用的氮素，有利于作物营养均衡吸收，同时，还可以补充作物所需的其他微量元素（张宪政，１９９５）。在二次发酵中加入大量复合功能性微生物的目的就是为了通过大量活的微生物在土壤中的积极活动来提供作物需要的营养物质或产生激素来刺激作物生长，提高土壤肥力。本研究从实验室保存的多株固氮细菌、溶磷细菌和解钾细菌中筛选出生物活性较强的菌株，并对其进行复配，试验结果证明，复配的菌株能够提高土壤速效氮、速效磷、速效钾的含量，且效果明显优于单菌株对土壤的影响，说明菌株间发挥了明显的协同作用。因此将复配后的菌株作为二次发酵的接种剂，以提高产品中的有益活菌数，增强生物有机肥的肥效。３１西北大学硕士毕业论文第四章生物有机肥生产工艺条件优化１材料与方法１．１材料１．１．１原料同第二章。１．１．２复合微生物菌剂１．１．２．１一次发酵用复合菌剂将绿色木霉、米曲霉、枯草芽孢杆菌和假单胞菌分别在相应的培养基上扩大培养，具体步骤：①用无菌生理盐水洗涤保存斜面，至无菌三角瓶中摇匀即成菌悬液；②接种斜面培养物于种子瓶，细菌在３０。Ｃ，１８０ｒｐｍ培养１２ｈ得到种子液，霉菌在３０。Ｃ，２２０ｒｐｍ培养４８ｈ得到种子液；③将１０％的种子液接种到发酵瓶中扩大培养４８ｈ得到发酵液。分别将各菌株的发酵液与灭菌麸皮按１：１的比例混合，发酵２４．７２ｈ后晾干，制成固体菌剂。将制备的固体菌剂按绿色木霉：米曲霉：枯草芽孢杆菌：假单胞菌为２：２：１：１的比例混合均匀，制成复合菌剂。１．１．２．２二次发酵用复合菌剂将固氮细菌、溶磷细菌和解钾细菌分别在相应的培养基上扩大培养，具体步骤：①用无菌生理盐水洗涤保存斜面，至无菌三角瓶中摇匀即成菌悬液；②接种斜面培养物于种子瓶，在３０。Ｃ，１６０ｒｐｍ条件下培养２４ｈ得到种子液；③将１０％的种子液接种到发酵瓶中，在３０＊Ｃ，１６０ｒｐｍ条件下扩大培养４８ｈ得到发酵液。分别将各菌株的发酵液与灭菌麸皮按１＂１的比例混合发酵４８ｈ后晾干，制成固体菌剂。将制备的固体菌剂按圆褐固氮菌：巨大芽孢杆菌：胶冻样芽孢杆菌为１：１：１的比例混合均匀，制成复合菌剂。１．１．３培养基１．１．３．１扩大菌种培养基同第二、三章中的相应培养基。１．１．３．２固氮菌鉴定培养基阿须贝氏琼脂培养基（沈萍，２０００）。１．１．３．３溶磷细菌鉴定培养基３２西北大学硕士毕业论文葡萄糖１０９：ＮａＣｌ１．０９：（ＮＨ４）２ｓ０４０．３９：ＭｇＳ０４?７Ｈ２００．３９；ＭｎＳ０４?４Ｈ２００．０３９；ＣａＣＯａＯ．５９；ＫＣｌ０．３９：ＦｅＳ０４。７Ｈ２０７．０—７．２。０．０３９；卵磷脂０．２９：酵母粉Ｏ．５９；琼脂１８９：水１０００ｍＬ；ｐＩ－Ｉ１．１．３．４解钾细菌鉴定培养基蔗糖５．０９：Ｎａ２ＨＰ０４?１２Ｈ２０ＦｅＣｌ３‘６Ｈ２０２．０９：ＭｇＳ０４?７Ｈ２００．５９；ＣａＣ０３７．５—８．０。Ｏ．１９：０．００５９：琼脂１８９；蒸馏水１０００ｍＬ：ｐＨ１．２一次发酵试验设计将原料堆成长２ｍ、宽ｌｍ、高Ｏ．８ｍ的条垛进行静态发酵。采用翻堆方式通风供氧，选择复合微生物菌剂接种量、含水率、Ｃ／Ｎ比和翻堆次数四个因素进行单因素实验研究。本文以温度和发芽指数作为评价指标，初步确定四个因素的最适作用范围，然后对四个因素进行正交优化试验，确定最佳发酵工艺参数，并确定一次发酵的时间。环境温度为３０℃左右。１．２．１单因素试验１．２．１．１含水率对牛粪发酵的影响设置三个试验组和一个对照组，调整原料的Ｃ／Ｎ为３０：１（添加木屑或尿素），复合微生物菌剂的接种量为３‰，２ｄ翻堆一次，发酵周期２０ｄ。试验组中牛粪与稻壳粉的混合比例不同，含水率分别为６０％，７０％，８０％，对照组不添加稻壳粉，含水率８８％。１．２．１．２Ｃ／Ｎ对牛粪发酵的影响设置两个试验组和一个对照组，复合微生物菌剂的接种量为３‰，２ｄ翻堆一次，发酵周期２０ｄ。试验组牛粪与稻壳粉的混合比例为３０：９，含水率为７０％，通过添加尿素（Ｃ／Ｎ为０．４３）调整Ｃ／Ｎ，Ｃ／Ｎ分别为３０：１，４０：１，对照组不添加稻壳粉，通过晾晒的方式，调整含水量至７０％。１．２．１．３翻堆次数对牛粪发酵的影响设置三个试验组和一个对照组，将牛粪与稻壳粉按３０：９的比例混合均匀，含水率为７０％，原料的Ｃ／Ｎ为３０：１，复合微生物菌剂的接种量为３‰，发酵周期２０ｄ，试验组的翻堆次数分别为３ｄ，６ｄ，９ｄ一次，对照组不翻堆。１．２．１．４复合微生物菌剂接种量对牛粪发酵的影响３３西北大学硕士毕业论文设置三个试验组和一个对照组，将牛粪与稻壳粉按３０：９的比例混合均匀，含水率为７０％，原料的Ｃ／Ｎ为３０：１，２ｄ翻堆一次，发酵周期２０ｄ。试验组的复合微生物菌剂的接种量分别为１‰，３‰，５‰，对照组不接种复合微生物菌剂。１．２．２正交试验根据单因素实验，采用４因素３水平的正交表对复合微生物菌剂接种量、含水率、Ｃ／Ｎ、翻堆次数四个因素进行正交组合，选择种子发芽指数对发酵结果进行评价。１．３二次发酵工艺第一次发酵温度下降至ｌＪ４０℃左右时，加入氮、磷、钾有益菌群，进行第二次发酵，每天翻堆一次，使温度保持在适宜细菌生长繁殖范围内。测定二次发酵过程中固氮菌、磷细菌、钾细菌活菌数的变化情况，并确定二次发酵终止时间。１．４测定方法１．４．１温度测定由玻璃温度计检测，测堆体四角３０．５０ｃｍ处及堆体中央共五处温度值，求和算平均值。１．４．２水分检测称取试样２０９，在１０５＂Ｃ下干燥２４１１，恒重至０．１９，测定水分。１．４．３Ｃ／Ｎ比测定有机物中碳的总含量与氮的总含量的比叫做碳氮比。依据土壤有机质研究法（文起孝，１９８４）测定。１．４．３．１总碳的测定方法重铬酸钾氧化Ｊ＇ｂａｎ热法。１．４．３．２总氮的测定方法重铬酸钾法—硫酸消化法。１．４．４有机质的测定称取２．Ｏｇ试样，精确至０．０００１９，置于已恒重的瓷坩埚中，将坩埚放入马弗炉中同样温度下灼烧１０ｍｉｎ，同样冷却称重，直到恒重。
牛粪发酵生产生物有机肥的工艺优化及应用研究 - 图文
