化香果多酚的纯化工艺及其抗氧化活性研究
徐 曼1,2,3，汪咏梅1,2,3＊，张亮亮1,2,3，胡新宇1,2,3
【摘 要】摘 要 采用大孔树脂对化香果提取物进行纯化，对比5种大孔树脂对化香果多酚的吸附-解吸效果，通过静态吸附-解吸实验筛选出D101大孔树脂作为较佳纯化材料，并确定D101大孔树脂吸附纯化较佳工艺条件为：样品液质量浓度3.2 mg/mL、样品液pH 4、上样流速2 mL/min、吸附时间2 h；洗脱液乙醇体积分数70%、洗脱流速2 mL/min、解吸时间1 h。纯化后化香果多酚纯度由67.35%提高至87.39%，表明该纯化工艺具有显著效果。抗氧化活性测试结果表明化香果多酚具有较好的抗氧化活性，纯化以后的化香果多酚的抗氧化能力得到增强。 【期刊名称】植物学研究 【年(卷),期】2018(007)004 【总页数】10
【关键词】关键词 化香果，多酚，大孔树脂，纯化，抗氧化活性
文章引用:徐曼, 汪咏梅, 张亮亮, 胡新宇. 化香果多酚的纯化工艺及其抗氧化活性研究[J]. 植物学研究, 2018, 7(4):453-462.
Received: Jun.21st, 2018; accepted: Jul.12th, 2018; published: Jul.19th, 2018
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1.引言
化香树果序为胡桃科植物化香树(Platycarya strobilacea Sieb.et Zucc.)的果序，化香树在我国西北、华东、华中、华南等地均有广阔分布。化香树在我国已有应用，根皮、树皮、叶、果实可以用作生产栲胶，树皮纤维能代替麻；叶可做农药，也可供药用，能顺气，祛风，化痰，止痛，燥湿，杀虫[1]。有关文献报道，利用溶剂对化香树果序进行提取，发现化香果序中含有丰富的生物活性物质，例如植物多酚、鞣花酸、黄酮等[2] [3]。已有研究表明多酚类化合物具有抑菌、抗病毒、抗肿瘤等生物活性作用，对细菌、真菌、酵母菌等常见的致病菌、病毒有很强的抑制作用[4] [5] [6]。作者针对化香果有效成分利用开展研究工作[7] [8]，进一步开展化香果多酚物质的提取纯化工艺和多酚抗氧化性能研究，对更好的利用化香果序资源，具有重要的指导意义。大孔吸附树脂具有稳定性高、吸附选择性强、吸附量大、吸附效果明显、解吸条件温和、使用周期长等优点，近年来被广泛用于功能性成分的分离与富集[9] [10]。本实验对化香果多酚纯化工艺和抗氧化性能进行研究，以期为化香果多酚类物质的工业化生产和应用提供方法及理论依据。
2.材料与方法
2.1.材料与设备 2.1.1.材料与试剂
化香果提取物，中国林科院林产化学工业研究所单宁实验室制备；没食子酸标准品、福林-酚试剂、DPPH?试剂、XAD-7型大孔树脂，Sigma公司；生育酚，东京化成工业株式会社；D101、AB-8、NKA-9、ADS-5型大孔树脂，天津和成树脂有限公司；三吡啶三吖嗪(TPTZ)，阿拉丁试剂有限公司；2,6-二叔丁基-
4-甲基苯酚(BHT)、抗坏血酸、无水碳酸钠、无水乙醇、甲醇、盐酸、氢氧化钠、醋酸钠、三氯化铁、硫酸亚铁，均为国产分析纯。 2.1.2.仪器与设备
Agilent Cary 8454紫外分光光度计，美国安捷伦公司；PE-20pH计，瑞士梅特勒-托利多公司；BE204E分析天平，梅特勒-托利多公司；SHA-CA水浴恒温振荡器，金坛荣华制造有限公司；层析柱(?1.8 cm × 30 cm)；SHZ-D (III)循环水式真空泵，巩义裕华。 2.2.实验方法 2.2.1.多酚含量测定
采用福林-酚法测定化香果提取物中的多酚含量[11] [12]。吸取0.2 mL待测样品溶液于10 mL棕色容量瓶内，依次加入0.5 mL 50%福林-酚、1.5 mL 20%碳酸钠溶液，用一级水定容，避光反应2 h后于760 nm波长下测定吸光度。 2.2.2.标准曲线绘制
以没食子酸作为标准品，配置不同质量浓度的溶液，按2.2.1节方法测定。以吸光度(y)为纵坐标，没食子酸质量浓度(x)为横坐标绘制标准曲线。得线性回归方程：y = 2.1934x + 0.0244 (R2 = 0.9979)。 2.2.3.多酚纯度测定
将化香果粗提物和纯化后多酚冻干粉配置成测定液，按照 2.2.1节测定溶液的多酚浓度，按公式(1)计算多酚纯度[13]。
式中：C—待测样品溶液的多酚浓度，mg/mL；V—待测溶液体积，mL；m—称取化香果提取物样品的质量，mg。 2.2.4.大孔树脂预处理
化香果多酚的纯化工艺及其抗氧化活性研究
