乙型肝炎病毒感染血清学标志物与HBV-DNA的关系探讨
黄 洁1，吴建华2△
【摘 要】摘 要:目的 探讨血清乙型肝炎病毒标志物(HBV-M)与HBV-DNA之间的关系。方法 分别采用增强化学发光酶联免疫分析(ECLIA)技术及实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对262例血清进行HBV-M、HBV-DNA检测，HBV-M包括HBV表面抗原(HBsAg)、抗HBV表面抗体(HBsAb)、HBV e抗原(HBeAg)、抗HBV e抗体(HBeAb)、抗HBV核心抗体(HBcAb)。结果 HBeAg阴性患者的HBV-DNA、HBsAg、HBeAb阳性率与HBeAg阳性患者比较，差异均有统计学意义(P<0.01)。HBeAg阴性患者HBV-DNA对数值不低于5的有29例(36.7%)。不同年龄患者HBeAg、HBeAb阳性率的差异有统计学意义(P<0.01)。HBV-DNA阳性标本中有25例HBsAg小于250IU/mL，其中12例(48.0%)HBV-DNA对数值不低于5。HBV-DNA阳性患者的HBV-DNA对数值与HBeAg、HBeAb呈正相关(r分别为0.542、0.607，P<0.01)。结论 HBV-M与HBV-DNA联合检测有助于判断HBV的感染情况。 【期刊名称】国际检验医学杂志 【年(卷),期】2014(000)009 【总页数】3
【关键词】关键词:肝炎病毒，乙型； 生物学标记； DNA； 聚合酶链反应； 增强化学发光酶联免疫分析 ·临床检验研究论著·
增强化学发光酶联免疫分析(enhanced chemiluminescence enzyme immunoassay,ECLIA)技术将高敏感性的化学发光技术与高特异性的免疫反应
结合起来，具有敏感性高、特异性强、线性范围宽、操作简便、稳定性好等优点[1-2]，能够快速、准确定量检测血清标志物水平。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)技术具有高敏感性和特异性，能准确定量检测血清乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)-DNA[3-4]，后者作为判断病毒复制活跃程度和是否具有传染性的直接、可靠依据，与疾病进展密切相关。目前关于血清HBV标志物(HBV marker,HBV-M)与HBV-DNA关系的研究较少，笔者对262例肝病科的患者血清HBV-M和HBV-DNA水平进行了定量检测，以探讨二者的量化关系，为临床判断HBV的感染情况及疗效监测提供指导。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选择2012年9～12月于湖北省中医院肝病科就诊的患者262例，其中，男156例，女106例；年龄17～80岁，平均41岁，患者彼此无亲缘关系，均符合慢性乙型肝炎诊断标准(2010年版)[5]。
1.2 检测方法 采集上述患者清晨空腹静脉血。采用ECLIA技术进行HBV-M检测，检测仪器为瑞士罗氏(Roche)公司Roche Modular E170全自动电化学发光免疫分析仪，检测试剂、定标液、质控品均为仪器原装配套；采用FQ-PCR技术进行HBV-DNA检测，检测仪器为美国Applied Biosystems公司ViiATM 7实时荧光定量PCR系统，检测试剂由上海复星医学科技发展有限公司提供，质控品由北京康彻思坦生物技术有限公司提供。操作均严格按产品说明书进行。
1.3 判断标准 以HBV表面抗原(HBV surface antigen,HBsAg)≥0.064IU/mL为阳性；以抗HBV表面抗体(anti-HBV surface antibody,HBsAb)≥10IU/L为
阳性；HBV e抗原(HBV e antigen,HBeAg)、抗HBV e抗体(anti-HBV e antibody,HBeAb)、抗HBV核心抗体(anti-HBV core antibody,HBcAb)检测结果根据标本产生的光信号与临界值光信号值(cut off index,COI)的比值来衡量量化程度，其中，HBeAg COI≥1为阳性，HBeAb及HBcAb的COI≤1为阳性；以HBV DNA≥1.0×103拷贝/mL为阳性。
1.4 统计学处理 HBV-DNA以对数值表示，经Microsoft Excel整理。采用SPSS17.0软件进行统计学分析。计量资料用表示，组间比较采用t检验和t′检验；计数资料用率表示，率的比较采用χ2检验，相关性分析采用Spearman秩相关系数检验，以α=0.05为检验水准，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
262例标本HBV-M、HBV-DNA检测结果见表1。检出HBV-DNA阳性152例，其中，HBeAg阳性73例(48.0%)，HBeAg阴性79例(52.0%)。HBeAg阴性患者的HBV-DNA、HBsAg、HBeAb阳性率与HBeAg阳性患者比较，差异均有统计学意义(P<0.01)。HBeAg阴性患者HBV-DNA对数值不低于5的有29例(36.7%)。不同年龄患者HBV-DNA对数值、HBsAg阳性率的差异无统计学意义(P>0.05)；但其HBeAg、HBeAb阳性率的差异有统计学意义(P<0.01)，年龄越大，HBeAg阳性率越低，而HBeAb阳性率越高，见表2。HBV-DNA阳性标本中有25例HBsAg小于250IU/mL，其中12例(48.0%)HBV-DNA对数值不低于5。
152例HBV-DNA阳性患者的HBV-DNA对数值与HBeAg、HBeAb呈显著正相关(r分别为0.542、0.607，P<0.01)，与HBsAg弱相关(r=0.207，P=0.01)，与HBsAb、HBcAb无相关性(P>0.05)。HBeAg阳性患者HBV-
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