金针菇褐化病毒(FvBV)脱毒方法

金针菇褐化病毒(FvBV)脱毒方法

张俊玲1,2 章炉军2 刘建辉2 李亮2 尚晓冬2 谭琦1,2*

【摘 要】【目的】评价5种不同脱毒方法对金针菇(Flammulina velutipes)菌株的脱毒效果，筛选出脱毒率高和脱毒后金针菇菌株菌丝生长速度、生物量、漆酶活力等性状改善明显的脱毒方法。【方法】以栽培金针菇菌株F-4889为研究材料，从菌丝体中提取大小约2.0 kb的病毒dsRNA，经RT-PCR鉴定该病毒为金针菇褐化病毒(FvBV)。采用菌丝尖端分离、原基组织分离、原生质体单核化、有性生殖和核迁移5种脱毒方法对金针菇菌株进行脱毒处理，利用dsRNA技术和RT-PCR检测脱毒效果。【结果】菌丝尖端分离脱毒后得到1株脱毒菌株；原基组织分离法未能脱毒；原生质体单核化脱毒法得到3株脱毒单核菌株和2株原单杂交脱毒菌株；有性生殖脱毒法获得脱毒孢子单核菌株23株和单孢杂交脱毒菌株8株；核迁移脱毒后得到5株核迁移脱毒菌株。脱毒率依次为25.0%、0、7.5%、57.5%和100%。脱毒菌株的菌丝生长速度、生物量、漆酶活力等均优于出发菌株、菌丝尖端和原基组织分离菌株。【结论】这5种方法中原生质体单核化、有性生殖和核迁移脱毒法脱毒效果较佳，均能有效脱除FvBV，脱毒率高，脱毒后菌株菌丝生长速度、生物量、漆酶活力等均明显提高。

【期刊名称】微生物学通报 【年(卷),期】2015(042)010 【总页数】10

【关键词】dsRNA技术，反转录PCR，FvBV，脱毒，原生质体单核化，有性生殖，核迁移