附录四 常用缓冲溶液的配制
(一)磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液
0.2 mol/L 0.2 mol/L
0.1 mol/L 0.1 mol/L pH Na2HPO4 pH Na2HPO4
柠檬酸 (mL) 柠檬酸 (mL) (mL) (mL)
2.2 0.40 19.60 5.2 10.72 9.28 2.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.85 2.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.40 2.8 3.17 16.83 5.8 12.09 7.91 3.0 4.11 15.89 6.0 12.63 7.37 3.2 4.94 15.06 6.2 13.22 6.78 3.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.15 3.6 6.44 13.56 6.6 14.55 5.45 3.8 7.10 12.90 6.8 15.45 4.55 4.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.53 4.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.61 4.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.83 4.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.27 4.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.85 5.0 10.30 9.70 8.0 19.45 0.55 Na2HPO4分子量=141.98;0.2 mol/L溶液为28.40 g/L。 Na2HPO4·2H2O分子量=178.05;0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量=358.22;0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。 C6H8O7·H2O分子量=210.14;0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。
(二)柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0.1 mol/L) 0.1 mol/L 柠檬酸 (mL) 18.6 17.2 16.0 14.9 14.0 13.1 12.3 11.4
0.1 mol/L 柠檬酸钠 (mL) 1.4 2.8 4.0 5.1 6.0 6.9 7.7 8.6 5.0 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 pH pH 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 0.1 mol/L 柠檬酸 (mL) 8.2 7.3 6.4 5.5 4.7 3.8 2.8 2.0 0.1 mol/L 柠檬酸钠 (mL) 11.8 12.7 13.6 14.5 15.3 16.2 17.2 18.0
4.6 10.3 9.7 6.6 1.4 18.6 4.8 9.2 10.8 柠檬酸:C6H8O7·H2O分子量=210.14 ;0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。 柠檬酸钠:Na3C6H5O7·2H2O分子量=294.12 ;0.1 mol/L溶液为29.41 g/L。
(三)醋酸-醋酸钠缓冲液(0.2 mol/L) pH (18℃) 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 0.2 mol/L 0.75 1.20 1.80 2.65 3.70 0.2 mol/L 9.35 8.80 8.20 7.35 6.30 pH (18℃) 4.8 5.0 5.2 5.4 5.6 0.2 mol/L 5.90 7.00 7.90 8.60 9.10 0.2 mol/L 4.10 3.00 2.10 1.40 0.90 NaAc (mL) HAc (mL) NaAc (mL) HAc (mL) 4.6 4.90 5.10 5.8 6.40 0.60 NaAc·3H2O分子量=136.09;0.2 mol/L溶液为27.22 g/L。 冰乙酸11.8 mL稀释至1 L(需标定)。
(四)磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液(0.05 mol/L)
X 毫升 0.2 mol/L KH2PO4+Y毫升0.2 mol/L NaOH 加水稀释至20毫升。 pH (20℃) X (mL) Y (mL) pH (20℃) X (mL) Y (mL) 5.8 5 0.372 7.0 5 2.963 6.0 5 0.570 7.2 5 3.500 6.2 5 0.860 7.4 3.950 6.4 5 1.260 7.6 5 4.280 6.6 5 1.780 7.8 5 4.520 6.8 5 2.365 8.0 5 4.680
(五)磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(0.2 mol/L) pH 5.8 5.9 6.0 6.1
0.2 mol/L Na2HPO4 (mL) 8.0 10.0 12.3 15.0 0.2 mol/L NaH2PO4 (mL) 92.0 90.0 87.7 85.0 7.0 7.1 7.2 7.3 pH 0.2 mol/L Na2HPO4 (mL) 61.0 67.0 72.0 77.0 0.2 mol/L NaH2PO4 (mL) 39.0 33.0 28.0 23.0
6.2 6.3 6.4 6.5 6.6 6.7 6.8 18.5 22.5 26.5 31.5 37.5 43.5 49.0 81.5 77.5 73.5 68.5 62.5 56.5 51.0 7.4 7.5 7.6 7.7 7.8 7.9 8.0 81.0 84.0 87.0 89.5 91.5 93.0 94.7 19.0 16.0 13.0 10.5 8.5 7.0 5.3 6.9 55.0 45.0 Na2HPO4·2H2O分子量=178.05;0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量=358.22;0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。 NaH2PO4·H2O分子量=138.01;0.2 mol/L溶液为27.6 g/L。 NaH2PO4·2H2O分子量=156.03;0.2 mol/L溶液为31.21 g/L。
(六)巴比妥纳-盐酸缓冲液 pH (18℃) 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 0.04 mol/L 巴比妥钠 (mL) 100 100 100 100 100 100 100 0.2 mol/L HCl (mL) 18.4 17.8 16.7 15.3 13.4 11.47 9.39 PH (18℃) 8.4 8.6 8.8 9.0 9.2 9.4 9.6 0.04 mol/L 巴比妥钠 (mL) 100 100 100 100 100 100 100 0.2 mol/L HCl (mL) 5.21 3.82 2.52 1.65 1.13 0.70 0.35 8.2 100 7.21 巴比妥钠分子量=206.18;0.04 mol/L溶液为8.25 g/L。
(七)Tris-HCl缓冲液(0.05 mol/L)
50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100毫升。 pH (25℃) 7.10 7.20 7.30 7.40 7.50
X (mL) 45.7 44.7 43.4 42.0 40.3 pH (25℃) 8.10 8.20 8.30 8.40 8.50 X (mL) 26.2 22.9 19.9 17.2 14.7
7.60 7.70 7.80 7.90 38.5 36.6 34.5 32.0 8.60 8.70 8.80 8.90 12.4 10.3 8.5 7.0 8.00 29.2 Tris分子量=121.14 ;0.1 mol/L溶液为12.114 g/L。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳,使用时注意将瓶盖严。
(八)、硼酸-硼砂缓冲液 (0.2 mol/L硼酸根) pH 7.4 7.6 7.8 0.05 mol/L 1.0 1.5 2.0 0.2 mol/L 9.0 8.5 8.0 硼砂 (mL) 硼酸 (mL) pH 8.2 8.4 8.7 0.05 mol/L 硼砂 (mL) 3.5 4.5 6.0 0.2 mol/L 硼酸 (mL) 6.5 5.5 4.0 8.0 3.0 7.0 9.0 8.0 2.0 硼砂:Na2B4O7·10H2O分子量=381.43;0.05 mol/L溶液(等于0.2 mol/L硼酸根)含19.07 g/L。 硼酸:H3BO3分子量=61.84;0.2 mol/L的溶液为12.37 g/L。 硼砂易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存。
(九)硼砂-氢氧化纳缓冲液(0.05 mol/L硼酸根)
X毫升0.05 mol/L硼砂+Y毫升0.2 mol/L NaOH加水稀释至200毫升。 pH 9.3 9.4 X (mL) 50 50 Y (mL) 6.0 11.0 pH 9.8 10.0 X (mL) 50 50 Y (mL) 34.0 43.0 9.6 50 23.0 10.1 50 46.0 硼砂Na2B4O7·10H2O分子量=381.43;0.05 mol/L硼砂溶液(等于0.2 mol/L硼酸根)为19.07 g/L。 (十)碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.1 mol/L)(此缓冲液在Ca2+、Mg2+存在时不得使用). pH 20℃ 9.16 37℃ 8.77 1 0.1 mol/L Na2CO3 (mL) 9 0.1 mol/L NaHCO3 (mL)
9.40 9.51 9.78 9.90 10.14 10.28 10.53 10.83 9.12 9.40 9.50 9.72 9.90 10.08 10.28 10.57 2 3 4 5 6 7 8 9 8 7 6 5 4 3 2 1
Na2CO3·10H2O分子量=286.2; 0.1 mol/L溶液为28.62 g/L。 Na2CO3 分子量=106; 0.1 mol/L溶液为10.6 g/L。 NaHCO3 分子量=84.0; 0.1 mol/L溶液为8.40 g/L。