第讲 微生物的培养与应用
[考纲明细] .微生物的分离和培养 .某种微生物数量的测定 .培养基对微生物的选
择作用 .微生物在其他方面的应用
考点 培养基及微生物的纯化培养技术
.培养基
()概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。()营养组成:一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。此外,还需要满足微生物生长对、
氧气以及特殊营养物质的要求。
()种类
①按照物理性质可分为液体培养基、固体培养基、半固体培养基。
②按照成分的来源可分为天然培养基和合成培养基。③按照功能用途可分为选择培养基、鉴别培养基等。
.(选修 资料卡片)琼脂是一种从红藻中提取的多糖。琼脂在 ℃以上熔化,在 ℃以下凝
固,在常规培养条件下呈现固态。
.(选修 资料卡片)牛肉膏和蛋白胨来源于动物原料,含有糖、维生素和有机氮等营养物
质。
.无菌技术
()含义:指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。
()关键:防止外来杂菌的入侵。()不同对象的无菌操作方法(连线)
答案 ①、②、⑥——Ⅰ、Ⅱ③、④、⑤——Ⅲ、Ⅳ
.大肠杆菌的纯化培养
()制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
①操作步骤
②倒平板的方法及注意事项
.请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程:丙→乙→甲→丁。
.乙中的灭菌方法是灼烧灭菌。
.丁中的操作需要等待平板冷却凝固后才能进行。
()纯化大肠杆菌的两种方法
)平板划线法
①概念:是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释
分散到培养基的表面。
②注意事项:
.灼烧接种环,待其冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。
.第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始,能使细菌的数目随着划线次
数的增加而逐渐减少,最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
.划线时最后一区不要与第一区相连。
.划线用力大小要适当,防止用力过大将培养基划破。
)稀释涂布平板法
①概念:是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固
体培养基的表面,进行培养。
②操作过程
()菌种的保存方法
①对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法。
②对于需要长期保存的菌种,可以采用甘油管藏的方法。
.(选修 旁栏思考)无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的?
提示 无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。
.(选修 旁栏小资料改编)微生物的接种方法只有平板划线法和稀释涂布平板法吗?微生物接种的核心是什么?
提示 不是。微生物的接种技术还包括斜面接种、穿刺接种等方法,其核心是防止杂菌污染,保证培养物的纯度。
.(选修 讨论)倒平板操作时为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰? 提示 通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。 .(选修 讨论)平板冷凝后,为什么要将平板倒置?
提示 平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以使培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。
.(选修 讨论)在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?
提示 不能。因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生,可能会造成污染。
题组 培养基及其制备方法分析