水质氰化物的测定分光光度法
作业指导书
警告：氰化物属于剧毒物质，操作时应氨规定佩戴防护器具，避免接触皮肤和衣服；检测后的残渣残液应做妥善的安全处理。
1参考标准
《水质氰化物的测定容量法和分光光度法》HJ484-2009 方法2 异烟酸-吡唑啉酮分光光度法 2 适用范围
本规程适用于地表水、生活污水和工业废水采用异烟酸-吡唑啉酮比色法测定水质中的总氰化物。
最低检出浓度为0.004mg／L；测定下限为0.016mg／L，测定上限为0.25mg／L。 3定义
3.1总氰化物
是指在磷酸和EDTA存在下，于pH<2介质中，加热蒸馏，能形成氰化氢的氰化物，包括全部简单氰化物（多为碱金属和碱土金属的氰化物、铵的氰化物）和绝大部分络合氰化物，但不包括钴氰络合物。 3.2 易释放氰化物 在pH=4介质中，硝酸锌存在下，加热蒸馏，形成氰化氢的氰化物， 包括全部简单氰化物（多为碱金属和碱土金属的氰化物、铵的氰化物）和锌氰络合物，不包括铁氰化物、亚铁氰化物、铜氰络合物、镍氢络合物、钴氰络合物。 4 原理
4.1蒸馏原理
4.1.1总氰化物：向水样中加入磷酸和EDTA二钠，在pH<2条件下，加热蒸馏，利用金属离子与EDTA络合能力比与氰离子络合能力强的特点，使络合氰化物离解出氰离子，并以氰化氢形式被蒸馏出，用氢氧化钠溶液吸收。
4.1.2 易释放氰化物：向水样中加入酒石酸和硝酸锌，在pH=4条件下，加热蒸馏，简单氰化物和部分络合氰化物以氰化氢形式被蒸馏出，用氢氧化钠溶液吸收。 4.2 反应原理
在中性条件下，样品中的氰化物与氯胺T反应生成氯化氰，再与异烟酸作用，经水解后生成戊烯二醛，最后与吡唑啉酮缩合生成蓝色染料，其颜色与氰化物含量成正比，在638nm波长进行光度测定。 4 仪器
4.1 分光光度计；
4.2 25ml具塞比色管；
4.3 500ml全玻璃蒸馏器； 4.4 100ml量筒或容量瓶； 4.5 600W或800W可调电炉；
5 药品及试剂测定过程中，只使用公认的分析纯试剂和不含氰化物和活性氯的蒸馏水或具有同等纯度的水。 5.1 磷酸(H3PO4)：1.69g／ml
5.2 氢氧化钠(NaOH)溶液：1g/L、10g/L、20g/L。
5.3 EDTA二钠溶液（100g/L） 称取10.0g乙二胺四乙酸二钠盐溶于水，稀释定容至100ml，摇匀。 5.4 乙酸铅试纸
称取5g乙酸铅[Pb(C2H3O2)2·3H2O]溶于水中，并稀释至100ml。将滤纸条浸入上述溶液中，1h后，取出晾干，盛于广口瓶中，密塞保存。
5.5 碘化钾-淀粉试纸 称取1.5g可溶性淀粉，用少量水搅成糊状，加入200ml沸水，混匀，放冷，加0.5g碘化钾和0.5g碳酸钠，用水稀释至250ml，将滤纸条浸渍后，取出晾干，盛于棕色瓶中，密塞保存。 5.6 硫酸溶液：1+5
5.7 亚硫酸钠(Na2SO3)： 1.26％溶液（m/V） 5.8 氨基磺酸(NH2SO3H) 5.9 磷酸盐缓冲溶液(pH＝7)
称取34.0g无水磷酸二氢钾(KH2PO4)和35.5g无水磷酸氢二钠(Na2HPO4)于烧杯内，加水溶解后，稀释至1000ml，摇匀，放入试剂瓶，存于冰箱。
5.10 氯胺T：10g/L溶液
临用前，称取1.0 g氯胺T溶于水，并稀释至100 ml，摇匀，储存于棕色瓶中。
注：氯胺T发生结块不易溶解，可致显色无法进行，必要时需用碘量
法测定有效氯浓度，氯胺T固体试剂应保存在干燥器中，以免受潮分解失效。
5.11 异烟酸-吡唑啉酮溶液 5.11.1 异烟酸溶液
称取1.5g异烟酸(C6H6NO2)溶于24ml 2％氢氧化钠溶液中，加水稀释至100ml。
5.11.2 吡唑啉酮溶液
称取0.25g吡唑啉酮(3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮，C10H10N2)溶于20mlN，N-二甲基甲酰胺[HCON(CH3)2]。
临用前，将吡唑啉酮溶液和异烟酸溶液按1：5混合，即为异烟酸-吡唑啉酮溶液。
5.12 氰化钾(KCN)标准溶液
国家标准物质GBW(E)080115 水中氰标准溶液，具体浓度根据标准物质证书。
5.12.1 氰化钾标准使用溶液(1.00ml含1.00μg氰离子)
临用前，吸取一定体积的水中氰标准溶液于100ml棕色容量瓶中，使浓度为1.00mg/L，用1g/L的氢氧化钠溶液稀释至标线，摇匀。 6 采样及贮存要求
采集水样时，必须立即加氢氧化钠固定。一般每升水样加0.5g固体氢氧化钠。当水样酸度高时，应多加固体氢氧化钠，使样品的pH>12，并将样品存于聚乙烯塑料瓶或硬质玻璃瓶中。采样后，应在24h内分析样品，如不能立即分析，必须将样品存放在冷暗的冰箱内。
当水样中含有大量硫化物时，应先加碳酸镉或碳酸铅固体粉末，除去硫化物后，再加氢氧化钠固定。否则，在碱性条件下，氰离子和硫离子作用形成硫氰酸离子而干扰测定。
注：检验硫化物方法，可取1滴水样或样品，放在乙酸铅试纸上，若变黑色(硫化铅)，说明有硫化物存在。
7 分析步骤
7.1 氰化氢的释放和吸收
7.1.1 量取200ml样品，移入500ml蒸馏瓶中(若氰化物含量高，可少取样品，加水稀释至200ml)，加数粒玻璃珠。 7.1.2 往接收瓶内加入10ml氢氧化钠溶液（10g/L），作为吸收液。当样品中存在亚硫酸钠和碳酸钠时，可用氢氧化钠溶液（40g/L）作为吸收液。
7.1.3 馏出液导管上端接冷凝管的出口，下端插入接收瓶的吸收液中，检查连接部位，使其严密。
注：蒸馏时，馏出液导管下端要插入吸收液面下，使吸收完全。
7.1.4 将10mlEDTA二钠溶液（5.3）加入蒸馏瓶内。
7.1.5 迅速加入10ml磷酸，当样品碱度大时，可适当多加磷酸，使pH<2，立即盖好瓶塞，打开冷凝水，打开可调电炉，由低档逐渐升高，馏出液以2～4ml／min速度进行加热蒸馏。 7.1.6 接收瓶内溶液近100ml时，停止蒸馏，用少量水洗馏出液导管，取出接收瓶，用水稀释至标线，此碱性馏出液“A”待测定总氰化物用。 7.1.7 干扰物的排除
a)若样品中存在活性氯等氧化剂，由于蒸馏时，氰化物会被分解，使结果偏低，干扰测定。可量取两份体积相同的样品，向其中一份样品投加碘化钾-淀粉试纸l～3片，加硫酸酸化，用亚硫酸钠溶液滴至碘化钾-淀粉试纸由蓝色变为无色为止，记下用量。另一份样品，不加试纸，仅加上述用量的亚硫酸钠溶液，然后按步骤7.1.1至7.1.6操作。 b)若样品中含有大量亚硝酸离子将干扰测定，可加入适量的氨基磺酸分解亚硝酸离子，一般1 mg亚硝酸离子需要加2.5mg氨基磺酸，然后按步骤7.1.1至7.1.6操作。
c)若样品中有大量硫化物存在，将200ml样品过滤，沉淀物用1％氢氧化钠洗涤，合并滤液和洗涤液，然后按步骤7.1.1至7.1.6操作。 7.2 空白试验
用实验用水代替样品，按步骤7.1.1至7.1.6操作，得到空白试验馏出液“B”待测定总氰化物用。 7.3 测定
分别吸取10.00ml馏出液“A”和10.00ml空白试验馏出液“B”于具塞比色管中，按8.2、8.3、8.4进行操作。 8 曲线制作
8.1 取8支具塞比色管，分别加入氰化钾标准使用溶液0、0.20、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00和5.00ml，各加氢氧化钠溶液（1g/L）至10ml。 8.2 向各管中加入5 ml磷酸盐缓冲溶液，混匀，迅速加入0.2ml氯胺T溶液，立即盖塞子，混匀，放置3～5min。 8.3 向各管中加入5ml异烟酸-吡唑啉酮溶液，混匀，加水稀释至标线，摇匀，在35℃的水浴中放置40min。 8.4 用分光光度计，在638nm波长下，用10mm比色皿，以水作参比，
测定吸光度，并绘制校准曲线。 8 数据处理 8.1 计算方法
总氰化物含量c4(mg／L)以氰离子(CN-)计，按式(1)计算： C=(A-A0-a)*V1/b/V/V2 式中：
A—试样的吸光度
A0—试剂空白的吸光度 a—校准曲线截距 b—校准曲线斜率
V—预蒸馏的取样体积，ml；
V1—试样(馏出液“A”)的总体积，ml；
V2—试份(比色时，所取馏出液“A”)的体积，ml。 9 精确度和准确度要求
重复性：相对标准偏差分别为7.4％和1.8％。 准确度：回收率为92％～97％。 11 注意事项
11.1 少量油类对测定无影响，中性油或酸性油大于40mg/L时干扰测定，可加入水样体积的20％量的正己烷，在中性条件下短时间萃取排除干扰；
11.2 试样中存在活性氯等氧化物干扰测定，可在蒸馏前加亚硫酸钠溶液排除干扰。
11.3 试样中存在亚硝酸离子干扰测定，可在蒸馏前加氨基磺酸排除干扰。
11.4 试样中存在硫化物干扰测定，可在蒸馏前加碳酸镉或碳酸铅固体粉末排除干扰。
11.5 氰化物属于剧毒物，在操作氰化物及其溶液时，要特别小心。避免沾污皮肤和眼睛。吸收溶液一定要用移液管或用洗耳球吸溶液，切勿吸入口中；
11.6 操作人员暴露部位（如手臂、手等部位）如有伤口，必须至少4层纱布包扎后方可以操作；
11.7 为使结果准确，将10mlEDTA二钠溶液加入蒸馏瓶后，迅速加入10ml磷酸，必须立即盖好瓶塞！防止氰化物损失，造成结果偏低； 11.8 所有氰化物废液未经解毒处理，不可以直接倒入下水道！应集
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