三种化学诱变剂对汤姆青霉PT95化学诱变效应的研究
李改平;韩建荣;郭妍
【摘 要】分别用诱变剂甲基磺酸乙酯(EMS)、1甲基N'-硝基-N-亚硝基胍(MNTG)和吖黄素对汤姆青霉rnPT95菌株的分生孢子进行化学诱变。EMS的致死率为48.4％，得到4种突变体；MNTG的致死率为21.7％，得rn到1种突变体；吖黄素致死率为19.5％，得到2种突变体，表明EMS的诱变效应最好。本实验所得的几种突变株rn经过在查氏平板上培养证明都不能形成菌核。 【期刊名称】《山西大学学报（自然科学版）》 【年(卷),期】2002(025)001 【总页数】4页(P59-62) 【关键词】青霉;化学诱变;突变体 【作 者】李改平;韩建荣;郭妍
【作者单位】山西职工医学院,山西,太原,030012;山西大学生命科学系,山西,太原,030006;山西大学生命科学系,山西,太原,030006 【正文语种】中 文 【中图分类】基础科学
山西大学学报（自然科学版） 25(1) :59~ 62,2002Journalof
ShanxiUniversity(Nat.Sci.Ed.)文章编号： 0253-2395 (2002) 01-0059-04 三 种化学诱变剂对 汤姆青霉 PT95 化学诱变效 应的研究 李改平 1 ，韩建荣2 ，郭卅2(1.山西职工医学院，山西太原 030012;2.山西大学生命科学系，山西太原
030006)摘要：分别 J司诱变剂甲基磺酸乙街（EMS）、 1一甲基－N'-.s肖基－N一亚局基M>.(MNTG）和 p'( 黄素对汤姆青霉 PT95 菌林的分生J包子进行化学诱变。 EMS 的致死率为 48.4 %，得到 4 种突变体； MNTG 的致死率为 21.7 %，得 到1种突变体；可黄素致死率为 19.5%，得到 2 种突变体，表明 EMS 的诱变效应最好。本实验所得的几种突变株经过在查氏平板上培养证明都不能形成菌核。关键词：青霉；化学诱变；突变体 中图分类号 ： 0175.26文献标识码：A现在国内外有关丝状真菌和酵母菌产生类胡萝卡素的报道日益增多，主要集中在少数几个菌 种 ，如 Blakeslea tris户ora ’ Phycomyces
blackesleeαnz,Phalliα rhodozyma 等〔1.2］。某些青霉菌株也可产生 R一胡萝 卡 素，如汤姆青霉 （Penicillium thomii series ） 中就会积累大量自一胡萝 卡 素口，气以前的研究表明，汤姆青霉的菌 核只能在固体培养基上生成［3,4）。为了进一步提高汤姆青霉 PT95 菌株中 R一胡萝卡素的含量，我们采用化学 诱变化法对汤姆青霉 PT95 的分生抱子进行诱变处理以获得高产突变体。1材料和方法 1.1菌种 山西大学生命科学系保藏的汤姆青霉 （Penicillium thomill series)PT95 菌株。1.2培养基 PDA 培养基用于 PT95 的菌种培养，查氏培养基用于突变株的筛选和培养。1.3化 学诱变 1.3.1甲基磺酸乙醋（EMS ）的诱变［5]将PT95 接种于 PDA 培养基上 25 ℃培养， 7d 后产生大量分生抱子。用 5ml 无菌水刮洗抱子制成抱子 悬液， 3000 r/min 离心 15 min ，弃上清液。再用 pH7.0 的
0.05mol/L 的磷酸缓冲液洗涤 2 次～ 3 次，并用缓 冲液稀释至 106 个抱子／ml ，取 4 mll06 抱子／ml 的抱子悬液加入 16ml 己灭菌的 pH 7.0 的 0.05mol/L 磷酸 缓冲液中，加入 0.2ml 甲基磺酸乙醋（EMS ）原液分别振荡处理 15 min 、 30 min 、 45 min 、 60 min 后加入 o.5ml25%次亚硫酸铀中止反应。以 10 倍稀释法作一系列稀释，取 10-3 、 10-4 、 10-5稀释液各 0.1 ml 涂查氏平 板，每个稀释度涂 3 个平板。于 25 ℃温箱中倒置培养 20 d 后菌落计数，算出 15 min 、
45 min 、 60 min 的存活 率、致死率。观察诱变效应，挑出菌落形态差异明显的突变菌落继代培养。收稿日 期 ： 2001-10-02作者简介：李改平 (1964斗，女， 1983 年 7 月毕业于山西大学生命科学系，现为山西职工医学院讲师，主要从事生物、医学遗传研究．山西大学学报（自然科学版） 25(1) :59~ 62,2002 Journalof ShanxiUniversity(Nat.Sci.Ed.) 文章编号： 0253-2395 (2002) 01-0059-04 效 应的研究李改平 1 ，韩建荣2 ，郭卅2要：分别 J司诱变剂甲基磺酸乙街（EMS）、 1一甲基－N'-.s肖基－N一亚局基M>.(MNTG）和 p'( 黄素对汤姆青霉PT95 菌林的分生J包子进行化学诱变。 EMS 的致死率为 48.4 %，得到 4 种突变体； MNTG 的致死率为 21.7 %，得到种突变体；可黄素致死率为 19.5%，得到 2 种突变体，表明 EMS 的诱变效应最好。本实验所得的几种突变株关键词：青霉；化学诱变；突变体中图分类号 ： 0175.26 文献标识码：A现在国内外有关丝状真菌和酵母菌产生类胡萝卡素的报道日益增多，主要集中在少数几个菌 种 ，如Blakeslea tris户ora ’ Phycomyces blackesleeαnz,Phalliα rhodozyma 等〔1.2］。某些青霉菌株也可产生 R一胡萝 卡素，如汤姆青霉 （Penicillium thomii series ） 中就会积累大量自一胡萝 卡 素口，气以前的研究表明，汤姆青霉的菌核只能在固体培养基上生成［3,4）。为了进一步提高汤姆青霉 PT95 菌株中 R一胡萝卡素的含量，我们采用化学诱变化法对汤姆青霉 PT95 的分生抱子进行诱变处理以获得高产突变体。1 材料和方法1.1 菌种山西大学生命科学系保藏的汤姆青霉 （Penicillium thomill series)PT95 菌株。1.2 培养基PDA 培养基用于 PT95 的菌种培养，查氏培养基用于突变株的筛选和培养。1.3 化 学诱变1.3.1 甲基磺酸乙醋（EMS ）的诱变［5]PT95 接种于 PDA 培养基上 25 ℃培养， 7d 后产生大量分生抱子。用 5ml 无菌水刮洗抱子制成抱子悬液， 3000 r/min 离心 15 min ，弃上清液。再用 pH7.0 的 0.05mol/L 的磷酸缓冲液洗涤 2 次～ 3 次，并用缓冲液稀释至 106 个抱子／ml ，取 4 mll06 抱子／ml 的抱子悬液加入 16ml
三种化学诱变剂对汤姆青霉PT95化学诱变效应的研究
