欧阳歌谷创编 2021年2月
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虎红平板凝集试验（RBPT）检测布
鲁氏菌病的原理和办法
欧阳歌谷（2021.02.01）
由于布鲁氏菌培养的营养条件苛刻并且时间长，所以布鲁氏菌病的诊断以血清学诊断为主。其原理主要是根据相应抗原抗体可以在体外产生特异性结合并呈现可见反响，用已知抗原(或抗体)检测体液中未知的抗体(或抗原)。
虎红平板凝集试验（RBPT）灵敏度高，价格廉价，操纵便利，检测快速，适于群体布鲁氏菌病的普查。在国际贸易中是牛、羊、猪布鲁氏菌病检测的指定试验，在我国也用于人布鲁氏菌病监测的初筛。
检测布鲁氏菌病所用的虎红平板凝集抗原是用抗原性良好的布鲁氏菌菌株经培养，灭活，离心收集菌体用虎红染料染色后，悬浮于乳酸缓冲液中制备而成。
试验原理：虎红平板凝集试验又称为班氏孟加拉红平板凝集试验。由于所用的抗原是酸性（PH3.63.9）带色的抗原，该抗原与被检血清作用时能抑制血清中的IgM类抗体的凝集活性、检查的抗体是IgG类，因此提高了反响的特异性。
虎红平板凝集试验具体办法如下：
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一、资料准备
1、虎红平板凝集抗原、标准阳性血清、阴性血清由制标单位提供，按说明书使用。
2、被检血清应新鲜，无明显卵白凝块，无溶血和无败北气味。 3、洁净的玻片或玻璃板，其上划分红4cm2的方格。 4、吸管或移液器，适于滴加0.03mL液体。 5、牙签、混合棒或火柴杆，供搅拌用。 二、操纵办法
1、实验前，应将血清和抗原在室温放置3060min。
2、将玻璃板上各格标识表记标帜被检血清号，然后加相应被检血清0.03mL。
3、在被检血清旁滴加虎红平板凝集抗原0.03mL。
4、用牙签类小棒搅动血清和抗原，使之充分混合，在5分钟内观察结果。
5、每次试验应设阴性血清、阳性血清对比。 三、结果判定
1、在阴、阳性血清对比成立的条件下，方可对被检血清进行判定。
2、受检血清在4min内呈现肉眼可见凝集现象者判为阳性(+)，无凝集现象，呈均匀粉红色者判为阴性()。
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四、办法评价
1、虎红平板凝集试验检测布鲁氏菌病，办法简便、快速、容易操纵，适于基层年夜面积检疫；
2、该办法敏感性较好，检查牛的阳性率稍高于绵羊、山羊。 3、因为在酸性环境下IgM活性受抑，该法主要是检查IgG类凝集抗体，所以特异性较好，与补体结合试验、二巯基乙醇（2ME）试验和抗球卵白试验有较高的吻合率。
4、该法受制备抗原时条件影响较年夜，所以每批制备抗原应予以检查、标化方可应用。
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虎红平板凝集实验
