第一部分 微生物的利用 实验2 分离以尿素为氮源的微生物
A．选择培养基 B．鉴别培养基 C．半固体培养基 D．无氮培养基
2涂布分离细菌时使用的玻璃刮刀应保存在70%酒精中，取出后又要放在酒精灯火焰上1本实验中的尿素培养基属于( )
灼烧，这2步分别属于什么技术( )
A．灭菌、灭菌 B．消毒、消毒 C．灭菌、消毒 D．消毒、灭菌
3尿素又称脲，它是什么有机物降解的产物…( ) A．核酸 B．蛋白质 C．淀粉 D．脂肪
4本实验的土样最好取自( ) A．有大量植物生长的地方取 B．临水的地方取
C．有哺乳动物排泄物的地方取 D．干燥、空旷的地方取
5分离以尿素为氮源的微生物所采用的分离方法是( ) A．涂布分离法 B．划线分离法 C．稀释分离法 D．选择分离法 6脲酶的化学本质是( ) A．脲 B．蛋白质 C．尿素 D．核酸
7下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是…( )
A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂糖、水 B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂糖、水 C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂糖、水 D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水 8有脲酶的细菌菌落周围出现着色环带的原因是( ) A．外泌的脲酶将尿素水解成氨，氨为碱性，使酚红变为红色 B．外泌的脲酶呈碱性使酚红变为红色 C．外泌的脲酶将酚红分解成呈红色的物质 D．酚红与脲酶反应后生成了呈红色的物质 9将下列的实验步骤按正确的顺序排列( )
①将培养皿倒置于恒温箱中培养24～48 h ②土壤取样 ③观察菌落数④样品稀释
制备细菌悬液 ⑤将稀释液涂布到以尿素为唯一氮源的培养基上
A．②④①⑤③ B．②①④⑤③ C．⑤①④②③ D．②④⑤①③
10分析下面培养基的配方：KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O 、葡萄糖、尿素、琼脂糖。请完成问题：
(1)在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是________和________。
(2)想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用？ 如果具有，又是如何进行选择的？
11请将稀释液的稀释度在下图中加以准确标注：
12本题探究如何从土壤中将自生固氮菌分离出来。请据题完成以下问题。
(1)实验原理：自生固氮菌是一种能利用空气中的N2做为氮源的细菌。若用无菌培养基
进行培养，其培养基不需要添加________这类营养要素，而其他细菌则不行。
农田的表层土壤中，自生固氮菌的含量比较多。将用表层土制成的稀泥浆，接种到无菌培养基上进行培养。在这种情况下，只有自生固氮菌才能生长繁殖。用这种方法，可以将自
生固氮菌与其他细菌分离开来。
(2)材料用具：农田的表层土壤、无氮培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、盛9 mL无菌水的
试管、无菌吸管、无菌涂布器、无菌培养皿、盛90 mL无菌水的锥形瓶、恒温箱。
(3)方法步骤：
①倒平板：分别将无菌培养基、牛肉膏蛋白胨培养基倒平板，操作过程应在火焰旁。②制备土壤稀释液：取土样10 g加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。用无菌
吸管吸取上清液1 mL，转至9 mL的无菌水的大试管中，依次稀释到10稀释度。
－7
－3
－7
③涂布：按照由10～10稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布，每个稀释度下，
无氮培养基应至少涂布________个平板，牛肉膏蛋白胨培养基涂布1个平板。
④培养：放入恒温箱内，在28～30 ℃下培养3～4天。
⑤细菌的计数：当菌落数目稳定时，选取菌落数在________的平板进行计数。如果测试
的平均值为50，则每克样品中的菌落数是________。(稀释度是10)
－5
(4)预测结果：相同稀释度下，牛肉膏蛋白胨培养基平板上的菌落数应多于无氮培养基上
的数目。请说明原因：______________________________________________________。
13(2009上海高考，39)氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(图1)筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如
表1。
图1
表1 培养基的组成
液体培
养基 Ⅰ号 Ⅱ号 Ⅲ号 蛋白胨 牛肉膏氯化 钠 5 g 5 g 5 g 硝酸铵 无机盐(无碳) 蒸馏水1 L1 L1 L 氯苯10 g —— 5 g — —5 mg 50 mg — 3 g 3 g — 适量 适量 20～80 mg(1)配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应添加1%的________。
(2)培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是________。
(3)从用途上来说，Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于________培养基和________培养
基。在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是________。
(4)在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为
________。
(5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养，得到生长曲线(如图2)。从图2可知，SP1菌在________培养条件下最早停止生长，其原因是_______________________________________________________________________________
_。
图2
高中生物第一部分微生物的利用实验2分离以尿素为氮源的微生物自我小测浙科版选修1
