2511动物营养学报2016，28（8）：2504-ChineseJournalofAnimalNutrition
doi：10.3969/j.issn.1006-267x.2016.08.022
产γ-氨基丁酸屎肠球菌的筛选及-氨基丁酸的定量γ
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朱 泉 程金龙 朱元召
（1.
安徽农业大学动物科技学院，合肥230061；2.江苏优仕生物科技发展有限公司，宿迁223831；
3.安徽科技学院动物科学学院，凤阳233100；4.扬州大学动物科学与技术学院，扬州225009）
尹 龙 倪晋东 程茂基 杨章平
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摘 要：本试验旨在利用分子生物学方法鉴定分离得到1株产γ-氨基丁酸（GABA）屎肠球菌，
6，进行并定量测定所产GABA的量。从泡菜、酸奶、土壤、新鲜牛奶样品中筛选出一目标菌株F
6的16SrDNA基因，然后测定该基因序列和构建形态学特征与革兰氏染色鉴定；再扩增菌株FLC）法定量测定菌株F6发酵液中的GABA含量。结系统发育树；同时采用高效液相色谱（HP
6菌落大而光滑、圆形、直径1～2mm、边缘整齐、乳白色；在分离培养基上菌落周果表明：菌株F
围形成透明圈，使分离培养基呈黄色；在MRS固体培养基上菌落不透明，周围有透明圈。革兰
6为阳性菌。分子生物学鉴定分析显示，菌株F6的16SrDNA基因序列与氏染色鉴定菌株F
GenBank数据库中屎肠球菌（Enterococcusfaecium）的相似性大于99%。HPLC法测定得到GA-=-BA标准曲线线性方程为Y7080733.1395X4511.6927（R=0.9994），通过方程得出菌株F6发酵液中的GABA含量为7.1g/L，保留时间为7～10min。结果提示，本试验筛选得到1株
6。高产GABA的屎肠球菌F-DNA基因序列；高效液相色谱法定量；筛选关键词：屎肠球菌；γ氨基丁酸；16Sr
816.7 文献标识码：A 文章编号：1006-267X（2016）08-2504-08中图分类号：S
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乳酸菌具有调节机体胃肠道微生态平衡、有
益于畜禽健康、改善畜禽生产性能、减少环境污染、替代饲用抗生素等重要作用，在动物生产中的应用日益广泛。然而，乳酸杆菌为厌氧菌，抗逆性差、不耐氧、易失活，应用效果不稳定，而球菌较杆菌具有更强的抗逆性，菌株活性损失较低，未来球菌尤其是肠球菌的应用将更普遍。
- γ氨基丁酸（GABA）又称氨酪酸，分子式为CHNO，是哺乳动物中枢神经系统一种主要的抑制性神经递质，介导40%以上的抑制性神经传导。GABA对人具有调节血压、改善脑部机能、增强记忆力、抗焦虑、镇痛等生理活性，对畜禽
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[2-3]具有促进采食、抗应激、镇静、改善生产性能等功效，尤其是抗热应激作用显著。GABA合成制备的方法主要有化学合成、微生物发酵等，目前畜禽生产上应用的GABA多为化学合成提纯品，成本昂贵，颇少见应用微生物发酵产生的GABA。 长期以来，学者致力于研究乳酸菌等单一功能的微生态制剂与化学合成提纯的GABA，已清楚乳酸菌和GABA均是重要的功能性添加剂。但有关能分泌GABA的乳酸菌的研究较少。屎肠
erococcusfaecium）属肠球菌属，又称屎链球菌（Ent
球菌，可分成许多群，屎肠球菌属于D群，D群链球菌中的肠球菌包括粪肠球菌、屎肠球菌和坚忍
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收稿日期：2016-02-24
2015A247）；宿迁市农业科技支撑项目（L201405）；宿迁市产业发展引导资金项目基金项目：安徽高校自然科学研究项目计划（KJ
mail：zhudtq@163.com作者简介：朱 泉（1994—），男，安徽全椒人，硕士研究生，从事动物营养与饲料科学研究。E--mail：zhuyuanzhao111@163.com*通信作者：朱元召，教授，硕士生导师，E（M201512）
产γ-氨基丁酸屎肠球菌的筛选及γ-氨基丁酸的定量
