……………………………………………………………名校名师推荐…………………………………………………
12．向溶有DNA的物质的量浓度为2 mol/L的NaCl溶液中不断加入蒸馏水,在这个过程中DNA和杂质蛋白质等的溶解度变化情况分别是（ ） A.减小 减小 B.先减小后增大 增大 C.增大 增大 D.减小 增大 【答案】B 【解析】
试题分析：DNA在0.4mol/l时溶解度最小，这时DNA析出。而其它杂质和蛋白质的溶解度变化不大，不会析出。 考点：本题考查DNA的相关知识。
13．相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的行进过程可表示为下图中的哪一个( )。
【答案】B 【解析】
试题分析：凝胶色谱法是根据蛋白质相对分子质量大小来分离蛋白质的。相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，移动较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部，只能在凝胶外移动，路程短，移动较快。图B表示正确。
考点：本题考查蛋白质分离技术凝胶色谱法的原理，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络结构的能力。
14．SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中决定蛋白质或多肽移动速度的主要因素是（ ） A. 蛋白质分子所带的电荷 B. 蛋白质分子的形状 C. 蛋白质分子的相对分子质量 D. 缓冲溶液的pH 【答案】C
【解析】SDS能使蛋白质发生完全变性，由几条肽链组成的蛋白质复合体在
SDS的作用下会解聚成单条肽链，因此测定的结果只是单条肽链的分子量。SDS能与各种蛋白质形成蛋白质—SDS复合物，SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种蛋白质间的电荷差别，使电
6
……………………………………………………………名校名师推荐…………………………………………………
泳迁移率完全取决于分子的大小，故本题正确答案为C。
15．下列有关提取和分离血红蛋白的叙述，错误的是（ ） A．样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液
B．通过透析可以去除样品中分子质量较大的杂质，此为样品的粗提取 C．可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化 D．可通过SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血红蛋白的纯度 【答案】B 【解析】
试题分析：样品的处理就是通过一系列操作收集到血红蛋白溶液，所以A正确；通过透析可以去除样品中分子质量较小的杂质，此为样品的粗提取，B错误；可通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去，即样品的纯化，C正确；SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法是蛋白质纯化鉴定使用最多的方法，所以D正确。
考点：本题考查提取和分离血红蛋白的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理判断或得出正确结论的能力。
二、非选择题
16．某同学使用下列装置或操作进行有关实验，请据图回答问题。
（1）甲图中玻璃棒使用要点是____________，以保证DNA分子结构的完整性。 （2）乙、丙用于提取和分离血红蛋白，应先对样品用___________图装置进行；丙图中液体Ⅱ应为________，丙图装置分离时，待红色的蛋白质_________时，用试管收集流出液。
【答案】 轻缓，并沿同一个方向 乙 20mmol/L的磷酸缓冲液(pH为7.0) 接近色谱柱底端
【解析】试题分析：本题主要考查DNA粗提取的实验原理及过程、分离与提取血红蛋白的原理与方法，解答本题时要掌握DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，其中DNA在0.14mol/l的NaCl溶液中的浓度最低，可析出DNA；在提取与分离血红蛋白
7
……………………………………………………………名校名师推荐…………………………………………………
时，对透析法和凝胶色谱法的理解和运用是解题的关键，应先对蛋白质进行透析，质量大的蛋白质易沉降。
（1）甲图烧杯中是DNA浓NaCl溶液，DNA溶解度很高，而DNA在0.14mol/ml的NaCl溶液中的溶解度最低，所以加入蒸馏水的目的是降低NaCl溶液的浓度，析出DNA，为了保证DNA分子结构的完整性，此时玻璃棒使用要点是轻缓，并沿同一个方向搅拌。 （2）乙、丙用于提取和分离血红蛋白，由于蛋白质等大分子物质不能通过透析袋，应先对样品用乙图装置进行透析，丙图中液体Ⅱ应为20mmoL／L的磷酸缓冲液（pH为7 .0），丙图装置分离时，底端试管中首先收集到的是相对分子质量较大的血红蛋白，待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出液。
17．（10分）红细胞中含有大量的血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的，血红蛋白的主要功能是携带O2右CO2，可选用猪、牛、羊或其他哺乳动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题：
（1）血红蛋白提取和分离的程序可分为四步： 、 、 和 。
（2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。
①加入柠檬酸钠的目的是 。 ②以上所述的过程即是 ，它包括 、 、分离血红收溶液和透析。
（3）然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行
纯
度
鉴
定
。
样
品
纯
化
的
目
的
是 。
（4）电泳法利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及 、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。 【答案】（1）样品处理 粗分离 纯化 纯度鉴定
（2）①防止血液凝固 ②样品处理 红细胞的洗涤 血红蛋白的释放 （3）通过凝胶色谱法将相对分子量大的杂蛋白除去 （4）分子的大小
【解析】血红蛋白提取和分离的程序可分为四步,分别是：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。在实验中加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固；样品处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红收溶液和透析四步。样品纯化的目的是通过凝胶色谱法将相对分子量大的杂蛋白除去，进而使SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法中迁移速率只取决于分
8
……………………………………………………………名校名师推荐…………………………………………………
子大小。电泳法利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
考点：本题考查血红蛋白的相关知识，意在考查考生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用的能力。
18．（1）当____________________充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。 （2）腐乳制作中加盐可以_______________，使豆腐块变硬，也能____________________，避免豆腐块腐败变质。
（3）培养基中除加入水、无机盐、碳源、氮源外，还需要满足微生物生长对_______________的要求。（至少答两项）
（4）固定化酶或者固定化细胞方法包括___________________________________三种。 （5）凝胶色谱法分离蛋白质时先从层析柱中洗脱出来的是____________________的蛋白质。
（6）玫瑰精油的化学性质__________________________，（至少答两项）能随水蒸气一同蒸馏。
【答案】 氧气、糖源 析出豆腐中的水分 抑制微生物生长 pH、特殊营养物质（或者生长因子）以及氧气 包埋法、化学结合法和物理吸附法 相对分子质量较大 稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂 【解析】【试题分析】
本题考查果醋和腐乳的制作原理、培养基的成分、固定化细胞技术、凝胶色谱法分离蛋白质、玫瑰精油的提取等相关知识，题目比较简单，都能直接从课本上找到相关答案。考生只需根据题意回忆所学基础知识，即可顺利作答。同时也提示考生，在平时的学习过程中，一定要重视课本基础知识的识记和理解。
（1）当氧气、糖源都充足时，醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸。
（2）腐乳制作中加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期的制作过程中不会过早酥烂。同时，盐还能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。
（3）培养基中除加入水、无机盐、碳源、氮源外，还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质（或生长因子）以及氧气的要求。
（4）固定化酶或者固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法三种固定化。
（5）凝胶色谱法也称做分配色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。在进行凝胶过滤柱层析过程中，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通
9
……………………………………………………………名校名师推荐…………………………………………………
道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。因此，从层析柱中洗脱出来的是相对分子质量较大的蛋白质。
（6）玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏。
10
人教版高中生物选修1血红蛋白的提取与分离 精编作业
