第11章 种质保存
一、填空:
1、种质保存分为 原地保存 和 异地保存 两种方式;
2、超低温保存分为: 快速冷冻法、慢速冷冻法 、分步冷冻法和 干燥冷冻法 四种冷冻方法;
3、分步冷冻法分为: 两步冷冻法 和 逐级冷冻法 两种方式; 4、冷冻保存后细胞和器官最基本的活力检测方法是 再培养法 。
二、名词解释:
1、人工种子(artificial seeds)或体细胞种子(somatic seeds)。任何一种在离体培养条件产生的繁殖体,无论是在涂膜胶囊中包裹的、裸露的或经过干燥的,只要能够发育成完整的植株,均称之为人工种子。
2、种质保存(germplasm conservation):是利用天然或人工创造的适宜环境,保存种质资源,使个体中所含有的遗传物质保持其完整性,有高的活力,能通过繁殖将其遗传特性传递下去。
3、超低温保存(cryopreservation ):也叫冷冻保存(freeze preservation ),一般以液态氮(-196℃)为冷源,使温度维持在-196℃。在如此低温下,新陈代谢活动基本停止,处于“生机停顿”状态。
三、问答题:
1、提高冷冻后细胞或组织存活率的方法有哪些? (1)植物材料的性质
冷冻前材料材料的性质,包括物种、基因型、抗寒性、年龄、形态结构和生理状态等,都会对冷冻效果产生很大影响。
(2)冷冻前的预处理:同步化、预培养、低温锻炼、冷冻防护剂 (3)、解冻方法:快速解冻法;慢速解冻法 (4)、重新培养
2、为增强细胞的抗冻力,可对冷冻前的材料进行哪些预处理措施? (1)悬浮培养或继代培养 (2)预培养 (3)低温锻炼 (4)冷冻防护剂
3、常用的冷冻防护剂有哪些?其作用是什么? (1)常见种类:二甲基亚砜(DMSO),甘油,糖,糖醇类等
(2)作用:降低冰点,促进过冷却和“玻璃态化”的形成;提高溶液的黏滞性,阻止冰晶形成;DMSO可使膜物质分子重新分布,增强细胞膜的透性,在温度降低时,加速细胞内的水流往细胞外结冰,防止细胞内结冰产生伤害;稳定细胞内的大分子正常结构,特别是膜结构,阻止低温对膜的伤害。
4、冷冻保存的应用前景有哪些? (1)长期保持种质的遗传稳定性 (2)长期保存去病毒的种质
(3)保持稀有珍贵及濒危植物的种质资源 (4)保持不稳定性的培养物,如单倍体
(5)保持培养细胞形态发生的能力 (6)防止种质衰老
(7)延长花粉的寿命,解决不同开花期和异地植物杂交上的困难
(8)冷冻解冻过程可能起着离休筛选作用,将那些生命力强、抗逆性强的细胞系选择下来,再生植株可能成为抗逆(抗寒)的新品种。 (9)便于国际间的种质交换。