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一、选择题
圣才电子书 十万种考研考证电子书、题库视频学习平台 第5章 分子生物学研究法（上）——DNA、RNA及蛋白质操作技术
1．RNA电泳转膜后与探针杂交的技术叫做（ ）。[河北大学2016研] A．Southern blot B．Northern blot C．Werstern blot D．原位杂交 【答案】B
【解析】Northern blot（诺瑟杂交）是一种通过检测RNA的表达水平来检测基因表达的方法。通过电泳的方法将不同的RNA分子依据其分子量大小加以区分，然后通过与特定基因互补配对的探针杂交来检测目的片段。
2．cDNA文库包括该种生物（ ）。[电子科技大学2012研] A．某些蛋白质的结构基因 B．所有蛋白质的结构基因 C．所有结构基因 D．内含子和调控区 【答案】A
3．生物质谱所用的内肽酶是（ ）。[北京大学2009、2010研] A．CPA
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www.100xuexi.com B．CPB C．CPY D．Trypsin 【答案】D
圣才电子书 十万种考研考证电子书、题库视频学习平台 【解析】ABC三项，CPA、CPB、CPY分别是羧肽酶A、羧肽酶B、羧肽酶Y。羧肽酶是一类肽链外切酶，能专一地从肽链的C端开始逐个降解，释放出游离氨基酸，用于C端氨基酸残基分析。D项，Trypsin是胰蛋白酶，是最常用的蛋白水解酶，专一性强，只断裂赖氨酸或精氨酸的羧基参与形成的肽键，是肽链内切酶即内肽酶。
4．PCR反应中变性、退火、伸延的大致温度分别为（ ）。[电子科技大学2009研] A．95，55，72 B．95，72，55 C．72，95，55 D．55，72，95 【答案】A
5．分子排阻色谱分离蛋白质是根据（ ）。[南开大学2009研] A．蛋白质的电荷 B．蛋白质分子的大小 C．蛋白质的形状 D．蛋白质的特异性 【答案】B
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www.100xuexi.com 圣才电子书 十万种考研考证电子书、题库视频学习平台 【解析】分子排阻色谱法又称凝胶色谱法，根据蛋白质分子的大小将蛋白质分离，分子量大者首先被洗脱下来，分子量小者后被洗脱下来。
6．某蛋白质pI为7.5，在pH 6.0的缓冲液中进行自由界面电泳，其泳动方向为（ ）。[华东理工大学2008、2009研]
A．原点不动 B．向正极泳动 C．向负极泳动 D．向两极分别泳动 【答案】C
【解析】pI＞pH，蛋白质带正电荷，在电场中向负极移动。
7．Southern印迹的DNA探针（ ）杂交。[浙江工业大学2008研] A．只与完全相同的片段
B．可与任何含有相同序列的DNA片段 C．可与任何含有互补序列的DNA片段
D．可与用某些限制性内切核酸酶切成的DNA片段 E．以上都不是 【答案】C
【解析】Southern印迹杂交是研究DNA图谱的基本技术，基本原理是具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下，可按碱基互补的原则特异性地杂交形成双链。利用经琼脂糖凝胶电泳分离、经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单
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www.100xuexi.com 圣才电子书 十万种考研考证电子书、题库视频学习平台 链DNA片段转移至固相支持物上，经固定后与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量。
8．在原核生物中转移噬菌体裸露的完全基因组DNA属于（ ）。[上海交通大学2006研]
A．接合 B．转化 C．转染 D．转导 【答案】C
【解析】A项，接合是指两个细菌之间通过性菌毛直接交换DNA的过程。B项，转化是指将质粒或其他外源DNA导入处于感受态的宿主细胞，并使其获得新的表型的过程。C项，转染是指将重组噬菌体DNA直接导入受体细胞，进行复制与繁殖的方式。D项，转导是指通过病毒将宿主的DNA转移到另一个宿主的细胞而引起的基因重组现象。
9．（多选）有关逆转录酶的论述哪些是正确的？（ ）[重庆大学2011研] A．具有依赖于RNA的DNA聚合酶活性 B．具有依赖于DNA的DNA聚合酶活性 C．不具备5′→3′或3′→5′核酸外切酶活性 D．催化合成反应时，需要模板及3′-OH引物 【答案】ABCD
【解析】逆转录酶是以RNA为模板指导三磷酸脱氧核苷酸合成互补DNA（cDNA）的
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www.100xuexi.com 圣才电子书 十万种考研考证电子书、题库视频学习平台 酶，是一种多功能酶。①具有以RNA为模板的DNA聚合酶的活性。以dNTP为底物，以RNA为模板，tRNA为引物，在tRNA 3′-OH末端上，按5′→3′方向，合成与RNA模板互补的DNA单链，称为互补DNA（cDNA）。②具有RNaseH活性。③DNA指导的DNA聚合酶活性。以cDNA为模板合成第二条DNA链。此外，逆转录酶还具有DNA内切酶等活性，但不具有5′→3′或3′→5′外切酶活性，因此不具有校正功能。
二、填空题
1．RecBCD具有多种酶活性，其主要酶活性包括______，______和______。[深圳大学2013研]
【答案】（依赖于ATP的）核酸外切酶活性；（可被ATP增强的）核酸内切酶活性；（需要ATP的）解螺旋酶活性
【解析】RecBCD复合物所具有的三种酶活性：依赖于ATP的核酸外切酶活性、可被ATP增强的核酸内切酶活性和需要ATP的解螺旋酶活性。
2．质粒的复制类型有两种：受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为______，不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为______。[电子科技大学2009研；中国科学院研究生院2012研]
【答案】严紧型质粒；松弛型质粒
3．第一个被解析出晶体结构的蛋白是______。[中山大学2009研] 【答案】胰岛素
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