单元过关检测(十) (时间:45分钟,分值:90分)
1. (10分)(2024江西鹰潭模拟)请根据现代生物工程技术回答下列问题: (1)
术大量扩增。该技术的基本过程是:
基因工程技术中对已获得的目的基因, 常采用PCR技
目的基因DNA受热变性后解链为单链, ____________ 与单链相应互补序列结合,然后在 DNA 聚合酶的作用下进行 ______________ ,如此重复循环多次。 (2)
下图所示核苷酸序列,并在图中箭头位置切断
限制酶Sma I能识别DNA。
用限制酶Sma I切割获取的目的基因需用 ________________ 酶构建基因表达载体。
(3) _____________________________________________________ 培育转基因小鼠除利用基因工程技术之外还需用到 ___________________________________________ 、 ____________ 等技术。 (4) ___________________________________________ 制备单克隆抗体通常选用细胞融合技术,使 ______________________________________________ 细胞与 ________ 细胞融合,融合成 功的细胞经过筛选就是所需要的 __________ 细胞。
解析:(1)利用PCR技术大量扩增目的基因的基本过程是:目的基因 为单链,引物与单链相应互补序列结合
DNA受热变性后解链
,然后在DNA聚合酶的作用下进行延伸,如此重复
循环多次。(2)题图显示:用限制酶 Sma I切割得到的是平末端,因此获取的目的基因需用 T4DNA连接酶构建基因表达载体。
(3)培育转基因小鼠时,利用基因工程技术得到的转基因
,才能将其培育成转基因小鼠。
小鼠受精卵,还需用到早期胚胎培养和胚胎移植等技术
制备单克隆抗体通常选用细胞融合技术
(4)
,使经抗原刺激的 B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 , 融合
成功的细胞经过筛选就是所需要的杂交瘤细胞。 答案:(1)引物 互补链的合成(或延伸)
⑵T4DNA连接
(3) 早期胚胎培养 胚胎移植
(4) (经抗原刺激的)B淋巴 骨髓瘤 杂交瘤
2. (10分)启动子探针型载体是一种有效、经济、快速分离基因启动子的工具型载体,其结 构如图所示,据图回答下列问题:
检测单朮
位点
转优单元
(1)限制性核酸内切酶的作用特点是
(2) ______________________________________________________________________ 将切割产生的DNA片段群体与无启动子的探针载体重组,需要用 _____________________________ 。 ⑶若把重组混合物转化给大肠杆菌,为提高转化效率,常用的方法是
(4)若插入片段中所含的编码区序列的碱基对数目不能被 3整除,报告基因能否正常表达?
为什么?
(1) 为防止酶切产物自身环化, 构建表达载体需用 2种限制酶,选择的原则是 __________ (单选)。 ① Ti质粒内,每种限制酶只有一个切割位点
② G基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点 ③ 酶切后,G基因形成的两个黏性末端序列不相同 ④ 酶切后,Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同 A .①③ C.②③
B.①④ D.②④
(2) 下表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知,细胞脱分化时使用的 激素是 ___________ ,自交系 ____________ 的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体。
I .获得抗除草剂转基因玉米自交系
T-DNA 抗生素就
A,技术路线如图。
槪書蛀因倚衣內許子)
Ti质粒
转化
激素 憔◎剂抗忤庭因
G 2, 4-D 6-BA (0.5 mg/L) 芽的分 化率(%) 13 80 83 85 IBA (2.0 mg/L) 根的诱 导率(%) 90 87 12 83 (2.0 mg/L) 结果 自交系 甲 乙 丙 丁 愈伤组织 形成率(%) 99 85 88 16 (3) 农杆菌转化愈伤组织时,T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤 组织,需使用含 __________________ 的选择培养基。
(4) 转化过程中,愈伤组织表面常残留农杆菌,导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上 生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达,其产物能催化无色物质
K呈现