多药耐药基因导入人胎盘源性间充质干细胞对其化疗耐药性影响的体外研究

多药耐药基因导入人胎盘源性间充质干细胞对其化疗耐药

性影响的体外研究

叶明珠;韩丽英;李荷莲;张海英

【期刊名称】《中国实用妇科与产科杂志》 【年(卷),期】2007(023)003

【摘要】目的 将含有多药耐药基因(mdr1)的逆转录病毒载体转染人胎盘源性间充质干细胞(MSC),评价mdr1基因在MSC中的表达及耐药基因导入对MSC耐受化疗药物作用的影响.方法 2005年3月至2006年5月采用percoll密度梯度离心法自吉林大学二院妇产科健康分娩供者胎盘组织中分离MSC;脂质体转染法将含mdrl基因的重组质粒导入293T包装细胞,获得的病毒上清感染MSC,RT-PCR法、流式细胞术和免疫荧光染色检测mdr1基因在MSC中的表达;罗丹明(Rh123)排泌试验检测外源基因编码产物P-糖蛋白(P-g170)功能;MTT法测定转染前后MSC对化疗药物耐受性的改变.结果 mdr1基因导入MSC后稳定转染效率达80.3%,RT-PCR 证实mdr1基因可于转染MSC中有效表达,转染后MSC表达P-g170的阳性细胞百分率为31.6%,对照组为0.2%;Rh123排泌试验证实P-g170具有功能活性.基因转染后MSC对多种化疗药物的耐药性明显强于未转染MSC.结论 mdr1基因体外转染人胎盘源性MSC可获得高效、稳定的功能性蛋白表达,且可明显提高MSC对多种化疗药物的耐受性.

【总页数】3页(181-183)

【关键词】多药耐药;基因;转染;胎盘;干细胞;移植 【作者】叶明珠;韩丽英;李荷莲;张海英