正交法优选孔枕益智片五味子的提取工艺

正交法优选孔枕益智片五味子的提取工艺

左红香1，金 勇2

【摘 要】摘要：目的 优选孔枕益智片中五味子有效成分五味子醇甲提取工艺方法.方法 采用正交设计试验，以HPLC测得五味子醇甲的含量为观察指标对五味子提取工艺进行优化.结果 优选工艺为五味子以8、6、6倍量80%乙醇提取3次，提取时间均为3 h.结论 所选提取工艺稳定、可行. 【期刊名称】北华大学学报（自然科学版） 【年(卷),期】2011(012)002 【总页数】3

【关键词】五味子；五味子醇甲；提取工艺；正交设计

孔枕益智片由龟板、龙骨、石菖蒲、远志、五味子等组成，主治思虑过度，阴虚火升，心悖怔忡，头晕失眠，多梦健忘等症[1-2].五味子中的有效成分五味子素能提高大脑皮质的工作能力及感受器的感受性能；能改善人的智力活动，提高工作效率；能改善视力；扩大视野；改善听力，提高皮肤感受器的分辨力.为全面考察五味子的提取工艺条件，分别用水和乙醇对五味子药材进行提取，同时参照药典五味子药材含量测定项以五味子醇甲的含量为测定指标，优选提取溶媒.以最佳提取溶媒为溶剂，采用正交法对五味子中有效成分五味子醇甲含量进行测定，从而选择五味子提取的最佳工艺，为工业生产提供依据.

1 仪器与试药

1.1 仪 器

LC-10Avp高效液相色谱仪(日本岛津)；LC-A10vp泵；SPD-10Avp可见紫外检测器；FA2004分析天平(上海精密科学仪器厂)；MP200B电子天平(上海精

密仪器有限公司)；真空干燥箱(天津市光学仪器厂技术开发公司)；旋转蒸发仪(上海申生科技有限公司)；超声波提取器(北京医用设备厂). 1.2 试 药

五味子醇甲对照品为中国生物制品检定所产品，批号为110857—200406，供含量测定用；五味子购于延吉市成大医药公司(经吉林省延边大学药学院刘永镇教授鉴定为北五味子)，经鉴定符合《中国药典》(2005年版)标准；甲醇为色谱纯；水为重蒸水；其他试剂均为国产分析纯.

2 方法与结果

2.1 五味子醇甲含量测定 2.1.1 色谱条件

色谱柱为YMC-C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)，柱温为25 ℃，流动相为甲醇-水(6535)，流速为0.8 mL/min，检测波长为250 nm. 2.1.2 对照品溶液的制备

精密称取五味子醇甲标准品2.0 mg，置5 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，吸取0.8 mL置5 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液(0.064 mg/mL). 2.1.3 供试品溶液的制备

分别精密称取按正交试验方法提取后干燥的药粉0.5 g，置50 mL容量瓶中，加甲醇40 mL，超声处理20 min，取出，放冷，用甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液. 2.1.4 标准曲线的制作

精密吸取对照品溶液2.5、5、7.5、10、12.5、15、17.5、20 μL依次进样，

按上述色谱条件测定，以峰面积积分值为纵坐标，五味子醇甲对照品进样量为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程为y=145 811x+206 998，r=0.999 9，进样量在0.16～1.28 μg内与峰面积呈良好的线性关系. 2.1.5 精密度试验

精密吸取同一对照品溶液，重复测定5次，结果五味子醇甲峰面积的RSD为0.40%.

2.2 提取工艺的研究 2.2.1 溶媒的选择

取粉碎后的五味子6份，每份15 g，分别用8倍量80%乙醇和水提取(共2次，每次2 h)，滤过，滤液浓缩至干.取粉碎后浸膏0.5 g，精密称定，置50 mL容量瓶中，加甲醇40 mL，超声处理20 min，取出，放冷，加甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液.按样品含量测定项方法测定、计算，结果见表1[3-6]. 由表1可见：醇提液中五味子醇甲的含量显著高于水提液中五味子醇甲的含量，故决定用乙醇作为提取溶媒.

2.2.2 醇提工艺的正交试验设计及试验结果

通过预试验可知，乙醇用量对五味子醇甲含量无影响，故选用乙醇用量为药材量的8、6、6倍量进行提取，以乙醇浓度(A)、提取时间(B)、提取次数(C)作为影响因素，每个因素选三个水平，因素水平见表2，采用L9(34)正交表进行试验，正交试验安排见表3. 2.2.3 提取工艺

每组取五味子15 g，按表3正交试验方案提取后，滤过，滤液浓缩蒸干得干浸膏，粉碎，作为样品备用.按上述色谱条件进行测定、计算，结果见表4.