CTC、CTA、CTG的第3位碱基互相替代后其编码表达的产物均为亮氨酸,因此这种突变不产生突变效应。
36错义突变：是指碱基序列的改变引起了产物氨基酸的序列改变。有些错义突变严重影响到蛋白质活性甚至完全失去活性，从而影响了表型。如果该基因是必需基因，则该突变为致死突变。 37.无义突变：某个碱基的改变可使某种氨基酸的密码子突变为终止密码子。如赖氨酸的密码子AAG突变为终止密码子TAG,使肽链合成过早终止,因而蛋白质产物壹般没有活性。若是发生在基因DNA的3’末端处,它所表达产生的多肽常有壹定活性或有部分活性,这种突变又称为渗漏变型（leakymutation）。
38限制性核酸内切酶：是壹类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列，且由此切割DNA双链结构的核酸内切酶
39基因拼接：将有共同限制性内切酶切点的基因连接起来形成多种基因杂合体，这个过程称为基因拼接。此外，也可根据需要将具有协同效应的不同基因进行接拼。
40基因缺失：将原基因中的非功能区域的编码子人为地使之缺失的过程称为基因缺失，所表达的产物相对分子质量虽然小了，但有时可提高表达效率，有时仍可降低壹些毒性作用。 41重组病毒载体：以SV40病毒为基础，经设计改造后的克隆载体。主要由俩种类型：取代型的重组病毒载体和重组的病毒-质粒载体。
42重组质粒型载体：即重组病毒-质粒载体，这类载体只取病毒基因组中维持在哺乳动物中进行复制的有关序列，使它和壹个细菌质粒融合，这样的重组体也能够在大肠杆菌中进行复制和增殖，不过这种载体（重组体）不能够被包装成病毒颗粒，不能出现裂解感染的情况，它实际上是壹种类似于质粒的DNA分子载体。
43基因工程多肽疫苗：使微生物对人体具保护作用的抗原基因经体外重组表达后所制备的生物
活性多肽类疫苗称基因工程多肽或亚单位疫苗。其表达系统能够是酵母，也能够是哺乳动物细胞，若无需糖基化的多肽疫苗甚至可在大肠杆菌等原核细胞中表达。
44基因置换(genereptacement)：是指将致病基因整个地被有功能的正常基因所置换，使致病基因永久地得到更正。但操作难度大，有伦理学问题。
45基因修正(genecorrection)是指将致病基因的突变碱基序列得以纠正，而正常序列部分予以保留，使突变的致病基因恢复正常功能。即使致病基因的突变序列纠正为正常序列（用碱基点突变技术）。
46基因修饰(geneaugmentation)则是指将目的基因导入缺陷细胞或其它细胞，目的基因的表达产物可修饰和改变缺陷细胞的功能或使原有的功能得到加强。
47基因失活(geneinactivation)就是应用反义技术(antisensetechnology)特异封闭某些基因的表达，以达到抑制或阻止某些有害基因的表达。SiRNA的基因干扰可造成靶基因（异常基因）的失活（或沉默）。
48转基因动物：就是把外源性目的基因导入动物的受精卵或其囊胚细胞中，后改用注入受精卵的任何壹个前核，且在细胞基因组中稳定整合，再将合格的重组受精卵或囊胚细胞筛选出来，采用借腹怀孕法寄养在雌性动物（fostermother）的子宫内,使之发育成具表达目的基因的胚胎动物,且能传给下壹代。这样，生育的动物为转基因动物。这类动物由于外源性目的基因的稳定存在而赋于子代动物个体。
49动物克隆：动物克隆是壹种通过核移植过程进行无性繁殖的技术。发育早期的动物胚胎细胞，或成年动物的体细胞，经显微手术移植到去掉细胞核的卵母细胞中之后，在适当的条件下，能够重新发育成正常胚胎。这种胚胎被移植到生殖周期相近的母体之中，能够发育成为正常动物个体。经过核移植而产生的动物，其遗传结构和细胞核供体完全相同。这种不经过有性生殖过程，而是
通过核移植生产遗传结构和细胞核供体相同动物个体的技术，就叫做动物克隆。
50基因敲除：是向正常生物个体内引入某个突变基因位点而选择性地使某特定基因功能失活的技术，可培养出靶向性剔除某基因的小鼠，而导致行为特性改变。
51ES细胞：胚胎肝细胞，不仅具有全能分化能力，而且能够在体外培养建立细胞株
52基因组：表示某物种单倍体的总DNA。对于二倍体高等生物其配子的DNA总和即为壹组基因组不同生物基因组数目不同。
53基因表达：是目的基因DNA在导入的细胞内转录成mRNA,再以mRNA指导翻译成蛋白质。 54RT-PCR：即逆转录PCR，先在逆转录酶的作用下以mRNA为模板合成DNA,再以cDNA为模板进行PCR反应。这样低浓度的mRNA被扩增放大易于检测。是壹种快速、简便且敏感性极高的检测RNA的方法，可用于分析基因的转录产物、克隆cDNA及合成cDNA探针、改造cDNA序列等。
55载体能够插入核酸片段、能携带外源核酸进入宿主细胞，且在其中进行独立和稳定的自我复制的核酸分子
56基因基因就是指编码有功能蛋白质多肽链或RNA分子所必须的全部核酸序列。
1什么叫做基因？何谓基因的新概念？基因的主要功能是什么?答：基因就是指编码有功能蛋白质多肽链或RNA分子所必须的全部核酸序列。所谓基因的新概念是随着近年分子生物实验技术的发展从分子水平上研究基因的结构和功能，提出的移动基因，断裂基因，重叠基因，假基因等基因的新概念。功能：编码蛋白质或者RNA分子基本遗传信息的基本遗传单位，是构成DNA的功能单位。
2真核细胞基因组中的基因常有内含子存在，能否在原核细胞中表达？能，为什么？不能，为什么？
不能，因为原核细胞缺乏对真核基因中内含子的剪接功能和转录后加工系统。原核生物必须有相应的原核RNA聚合酶可识别原核细胞的启动子,以催化RNA的合成。
基因表达是以操纵子为单位，操纵子由数个相关的结构基因和调控功能的部位组成的。因此在构建原核表达载体时必须有1个强的原核启动子及其俩侧的调控序列。 3试述DNA分子的结构及其意义。
答：DNA是壹反向平行的互补双链结构，DNA是右手螺旋结构。
DNA双螺旋结构的稳定横向靠俩条链间互补碱基的氢键维系，纵向则靠碱基平面的疏水性堆积力维持。意义：双链碱基互补特点揭示了DNA复制时俩条链可分别作为模板生成新的子代互补链，从而形成遗传信息稳定传递的半保留复制的机制。 4构建cDNA文库的意义？常用载体及构建过程如何？
答：意义：通过构建cDNA文库能直接分离到生命活动过程中的壹些调控基因及了解这些基因所编码的蛋白质的相互作用关系．因此cDNA文库的构建是基因克隆的重要方法之壹，从cDNA文库中能够筛选到所需的目的基因，且直接用于该目的基因的表达。它是发现新基因和研究基因功能的工具。常用载体是质粒（λ噬菌体）。过程：1.制备mRNA1)取材：mRNA约占总RNA的1－5％，所以应选用目的基因mRNA表达最丰富的组织细胞为材料来源，如获胰岛素基因，由应以胰岛β细胞为原始生物材料，细胞因子基因应选用经抗原或丝裂原刺激培养的淋巴细胞为材料；2)从总的RNA中分离mRNA：将提取的mRNA在寡聚脱氧胸苷酸[oligo(dT)]纤维素中进行亲和层析2.第壹股cDNA合成1）以Oligo(dT)为引物：从模板3’末端开始，沿模板的3’→5’方向合成,对于较长的mRNA分子很难得到全长cDNA；2）随机引物：以6～8个核苷酸为随机引物，从mRNA的不同结合点合成全长cDNA第壹链（RNA-DNA）3.第二股cDNA的合成⑴自身引导法；⑵置换合成法；⑶外加引物合成法4.cDNA和载体连接和导入宿主细胞
5构建基因组文库的意义及构建过程如何？
答：意义：提供全套遗传信息,即完整的基因组DNA,能够研究基因组中5’端控制基因转录的调控序列,内含子的分布和作用,以及重复序列的数量分布及大小
过程：⑴分离纯化基因组DNA,提取哺乳动物细胞染色体DNA；⑵制备全部基因组的DNA片断。①机械断裂法:用超声波或高速搅拌DNA溶液断裂片段俩端没有和克隆载体匹配的粘末端，因此插入载体之前仍需要进行修饰加工，少用②限制性内切酶降解（鸟枪法）过去用EcoRⅠ,当下用Sau3A断裂片段俩端有和克隆载体匹配的粘末端，能够直接和处理过的载体连接。⑶DNA片断和载体的连接包装常用载体：粘性质粒λ噬菌体酵母人工染色体 ①基因组DNA+粘性质粒——重组DNA——转化细菌——菌落
②基因组DNA+λ噬菌体——重组DNA—包装成噬菌体——感染细菌——噬菌斑 1个克隆含有基因组的某个片段，整个克隆群体就包含基因组的全部基因片段总和。 6什么是限制性核酸内切酶？
限制性核酸内切酶是能够识别DNA的特异序列，且在识别位点或其周围切割双链DNA的壹类内切酶，简称限制酶。根据限制酶的结构,辅因子的需求切位和作用方式，可将限制酶分为三种类型，分别是第壹型（TypeI）、第二型（TypeII）及第三型（TypeIII）。Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA的甲基化，又催化非甲基化的DNA的水解；而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解。III型限制性内切酶同时具有修饰及认知切割的作用
7.链终止DNA测序法基本原理是，聚丙烯酰胺凝胶能把长度只差壹个核苷酸的单链DNA分子区分开，这意味着在长10-1500个核苷酸的范围内，所有分子经电泳后可成为壹系列可分辨的条带，单链DNA分子的序列由和之互补的多核苷酸链的酶促合成来判定，互
2020年(生物科技行业)分子生物学考点答案
