YL-20240石榴皮原料检验操作规程

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检验操作规程

题目：石榴皮原药材检验操作规程 编号：TS-GC-YL-20240-02 制定人： 制定日期2024 年 月 日 版本：2 页数：1/4 审核人： 审核日期2024 年 月 日 颁发部门：质 量 部 批准人： 批准日期2024年 月 日 生效日期2024 年 月 日 目的：规范石榴皮原药材检验操作 范围：石榴皮原药材检验 分发部门： 质量部、 化验室、生产部 标 题 正 文 1 标准依据：《中国药典》2024年版一部及四部 2 【性状】 2.1 仪器：直尺。 2.2 方法：取本品,置日光下观察,并用直尺测量:本品呈不规则的片状或瓢 状，大小不一，厚1.5～3mm。外表面红棕色、棕黄色或暗棕色，略有光泽，粗糙，有多数疣状突起，有的有突起的筒状宿萼及粗短果梗或果梗痕。内 表面黄色或红棕色，有隆起呈网状的果蒂残痕。质硬而脆，断面黄色，略 显颗粒状。气微，味苦涩。 【鉴别】 3 （1）显微鉴别 3.1 仪器与试剂：生物显微镜、酒精灯，水合氯醛、稀甘油等。 3.1.1 方法：取本品适量，用水合氯醛装片，置显微镜下观察：（1）本品横 3.1.2 切面：外果皮为1列表皮细胞，排列较紧密，外被角质层。中果皮较厚， 薄壁细胞内含淀粉粒和草酸钙簇晶或方晶；石细胞单个散在，类圆形、长 方形或不规则形，少数呈分枝状，壁较厚；维管束散在。内果皮薄壁细胞 较小，亦含淀粉粒和草酸钙晶体，石细胞较小。 粉末红棕色。石细胞类圆形、长方形或不规则形，少数分枝状，直径 27～102μm，壁较厚，孔沟细密，胞腔大，有的含棕色物。表皮细胞类方 形或类长方形，壁略厚。草酸钙簇晶直径10～25μm，稀有方晶。螺纹导管 3.2 和网纹导管直径12～18μm。淀粉粒类圆形，直径2～10μm。 3.2.1 （2）理化鉴别 仪器与试剂：分析天平、水浴锅、1%三氯化铁乙醇溶液等 方法：取本品粉末1g，加水10ml，置60℃水浴中加热10分钟，趁热 3.2.2 滤过。取滤液1ml，加1%三氯化铁乙醇溶液1滴，即显墨绿色。 （3）薄层鉴别 3.3 3.3.1 仪器与试剂：分析天平、硅胶G薄层板、层析缸、三氯甲烷、超声仪、甲酸、甲醇等。 方法：（2）取本品粉末0.5g，加三氯甲烷20ml，超声处理30分钟，3.3.2 滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取齐墩果 酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色 谱法（通则0502）试验，吸取上述两种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸（40:1:1）为展开剂，展开，取出，晾干， 喷以10%硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在 与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 【检查】 4

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4.1 杂质：不得过6%（通则2301）。 4.1．1 仪器：分析天平、药筛。 4.1.2 方法：取本品适量,挑拣杂质、药屑合并称重杂质量。 4.1.3 计算公式: M1 杂质量= ×100% 式中: M0 M0-------供试品重(g) M1-------杂质重(g) 4.2 水分 不得过17.0％（通则0832第二法）。 4.2.1 仪器：电热鼓风干燥箱、分析天平、粉碎机、药筛等。 4.2.2 方法：取供试品2-5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过 5mm，疏松供试品不超过10mm，精密称定，打开瓶盖在100－105℃干燥5 小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30分钟，精密称定重量，再在上 述温度干燥1小时，冷却，称重至连续两次称重的差异不超过5mg为止。 根据减失的重量，计算供试品中的含水量（%）。 4.2.3 计算公式： W样+W0－W1 水分% = ×100% W样 式中： W0 称量瓶的重量（g）。 W1称量瓶与样品的重量（g）。 W样样品的重量（g）。 总灰分 不得过7.0％（通则2302）。 4.3 4.3.1 仪器：粉碎机、药筛、分析天平、坩埚、箱式电阻炉等。 4.3.2 方法：取供试品2～3g，过二号筛混合均匀后，置炽灼至恒重的坩埚中称定重量，缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500～ 600℃，使完全灰化至恒重。根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量（%）。 4.3.3 计算公式： W1-W0 总灰分% = ×100% W样 式中： W0 ----------- 坩埚重量(g)。 W1----------- 坩埚与灰分的重量(g)。 W样----------- 样品的重量(g)。 二氧化硫残留量：照二氧化硫残留量测定法（通则 2331)测定，不得过4.4 150mg/kg 4.4.1 仪器与试剂：两颈圆底烧瓶、电热套、竖式回流冷凝管、磁力搅拌器、分析天平、甲基红乙醇溶液指示剂、氢氧化钠滴定液滴、盐酸溶液（6mol/L) 等。 4.4.2 方法：测定法取药材或饮片细粉约10g(如二氧化硫残留量较髙，超过1000mg/kg，可适当减少取样量，但应不少于5g),精密称定，置两颈圆底烧 瓶中，加水300?400ml。打开回流冷凝管开关给水，将冷凝管的上端二氧 ---------------------------- --------------------------- --------------------------- 第 2 页 共 4 页

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4.4.3 化硫气体导出口处连接一橡胶导气管置于100ml锥形瓶底部。锥形瓶内加入3%过氧化氢溶液50ml作为吸收液（橡胶导气管的末端应在吸收液液面以下）。使用前，在吸收液中加人3滴甲基红乙醇溶液指示剂（2.5mg/ml),并用0.Olmol/L氢氧化钠滴定液滴定至黄色（即终点；如果超过终点，则应舍弃该吸收溶液）。开通氮气，使用流量计调节气体流量至约0.2L/min；打开分液漏斗的活塞，使盐酸溶液（6mol/L)10ml流入蒸馏瓶，立即加热两颈烧瓶内的溶液至沸，并保持微沸；烧瓶内的水沸腾1.5小时后，停止加热。吸收液放冷后，置于磁力搅拌器上不断搅拌，用氢氧化钠滴定（O.Olmol/L)滴定，至黄色持续时间20秒不褪，并将滴定的结果用空白实验校正。 计算公式： 6 （V供-V空）×C×0.032×10 二氧化硫残留量（mg/kg） = W供 式中： V供为供试品溶液消耗氢氧化钠滴定液的体积，ml； V空 为空白消耗氢氧化钠滴定液的体积，ml； C 为氢氧化钠滴定液的浓度，mol/L； W供为供试品的重量，g。 0.032为lml氢氧化钠滴定液（lmol/L)相当的二氧化硫的质量，g。 5 【浸出物】 照醇溶性浸出物测定法（通则2201）项下的热浸法测定，用乙醇作溶剂，不得少于15.0%。 5.1 仪器与试剂：电热鼓风干燥箱、分析天平、蒸发皿、数显恒温水浴锅等。 5.2 方法：取供试品约2～4g，称定重量，置100～250ml的锥形瓶中，精密加入乙醇50～100ml，塞紧，称定重量，静置1小时后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过。精密量取滤液25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，移置干 燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量，除另有规定外，以干燥品计算 供试品中醇溶性浸出物的含量（%）。 5.3 计算公式： （W1-W0）×V0 浸出物% = ×100% W样×（1－水分）×V1 式中： W0 ------- 蒸发皿的重量（g）。 W1 -------- 浸出物与蒸发皿的重量（g）。 W样------- 样品的重量（g）。 V0 ------- 加溶媒体积 （ml）。 V1------- 取续滤液的体积 （ml）。 【含量测定】 6 鞣质 照鞣质含量测定法（通则2202）测定 6.1 仪器与试剂：紫外-可见分光光度计、分析天平等 6.1.1 方法：取本品粉末（过三号筛）约0.4g，精密称定，照鞣质含量测定6.1.2 第 3 页 共 4 页

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6.2 6.2.1 6.2.2 6.2.3 6.2.4 6.2.5 6.2.6 6.2.7 法（通则2202）测定，即得。 本品按干燥品计算，含鞣质不得少于10.0%。 鞣花酸 照高效液相色谱法（通则0512）测定。本品按干燥品计算，含鞣花酸（C14H6O8）不得少于0.30%。 仪器与试剂：电子分析天平、高效液相色谱仪、甲醇、乙腈、鞣花酸对照品等。 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.2%磷酸溶液（21：79）为流动相；检测波长为254nm。理论板数按鞣花酸峰计算应不低于5000。 对照品溶液的制备 取鞣花酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含20μg的溶液，即得。 供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率150W，频率40kHz）40分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液5～10μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法计算，即得。 本品按干燥品计算，含鞣花酸（C14H6O8）不得少于0.30%。 计算公式： A样 × C对 ×f 含量% = ×100% m ×（1－水分）×A对 式中： A样 ------------------------- 样品的面积。 A对 ------------------------ - 对照品的面积。 C对 ------------------------- 对照品的浓度(mg/ml)。 m ------------------------- 样品的重量（g）。 f ------------------------- 稀释体积。

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