2.#1 大鼠大脑中动脉阻断实验的总结和心得
实验前准备
很专业了，不过现在基本上我能在15min左右完成手术，而且
很多前辈发了很多MCAO的很专业的贴子，不过我觉得比较凌
1.缺血再灌注后，主要的损伤区在纹状体，海马的A1区也会出现
麻醉剂：水合氯醛（应较好的控制大鼠体温）
的心得体会。衷心祝福大家能把实验做的成功、完美！！！！
象但是纹状体肯定有明显的缺血现象。缺血1.5小时再灌注后我
这方面的资料我查了一些，这个实验我也作了一段时间，不敢说
手术过程中不出一滴血，造模后缺血程度基本一致。虽然前面有
损伤。缺血再灌注损伤不是很严重海马区域就没有明显的缺血现
本人现在正在做线栓法大鼠大脑中动脉阻断实验（MCAO模型），
保温：60W白炙灯高度为37cm直接照射能使肛温保持在 37℃也做过尼氏染色，海马区没有见到缺血改变，但是纹状体很明显。
会有郁闷的时候，不过风雨之后总会见到彩虹的，这可以也是我
希望这会对将要做这个实验的朋友有一丝的帮助。虽然做实验总
乱，现在我把我的心得体会和以前的贴子的精华部分奉献给大家，
体重与栓线直径：
（pH7.5）,避光保存。
实验方法：
通的鱼线即可变成规相一致头端光滑圆钝的栓线。2.在鱼线18mm的位置用涂改液标记一个白色点。
250-300g。
总动脉（CCA）、颈外动脉（ECA）和颈内动脉（ICA），在CCA熔化。直径为o．24mm、长5cm的鱼线一端5mm长的一段，
栓线的制备：1.取熔点为56℃的固体石蜡一块，在瓷杯中加热
然后近心端结扎CCA、ECA。然后在距CCA分叉部4mm处剪一牢固地粘附在鱼线一端的表面，其直径为0.26mm。就这样，普TTC的配制：用0.2mol/L磷酸缓冲液（PBS）配成2%TTC溶液
颈正中线切口，沿胸锁乳突肌内缘分离肌肉和筋膜，分离左侧颈
远心端和近心端及ECA处挂线备用。用微动脉夹暂时夹闭ICA，
动物用10％水合氯醛（35mg/kg）腹腔注射麻醉。仰卧位固定，
小口，将拴线插入到ICA，这时用绕在CCA远心端的细线轻轻系
镊轻推拴线，从血管分叉处开始算距离，当插入深度在18 mm
线栓直径0.24mm采用的SD大鼠，体重
垂直在熔化的石蜡中迅速浸入并提起，立即凝固的一薄层石蜡可
牢拴线。（不可过紧，否则近线困难，但松了又会出血。）用眼科
的。注意事项：
脉环，结扎一侧颈总动脉大脑不会缺血的。
1．分离时要层次清楚：正中剪开SD大鼠颈部皮肤，分离皮下
时（一定要将血管放松至原来状态, 且保证标记点在分叉处,由于
标记的是白色的所以很容易看的），紧紧系牢CCA远心端的细线，
2.分离血管时，要尽量将血管剥离的干净些，这样在用眼科剪剪观察。如果需要再灌的话，就把拴线抽出即可，因为脑底有个动更不要缝在皮外，大鼠醒来后会自己拔出。缝合伤口，单笼饲养脱出ACA，可能会造成缺血失败。血管外的栓线不要留得过长，此时的关键是动作轻柔，不要使ICA有任何的牵拉，否则栓线会
了则要注意细致分离迷走神经，若损伤则可能影响其呼吸而死亡
并且能整块地向一侧牵开颈前肌群暴露颈动脉鞘。见到颈动脉鞘
块肌肉的肌纤维之间，虽然它们看起来很模糊，但这样能保证不
候要注意用小钳子作撑开分离动作要在左右肌肉块之间而不是一
群且不会损伤腺体造成过多出血。下一步是分开颈前肌群，这时
鼓泡腺体之间分离，这样能不接触胸锁乳突肌而直接暴露颈前颈
是甲状腺）结合紧密，因此不必分离过于太细，直接在正中两侧
结缔组织时会发现该组织与颈部两侧鼓泡腺体（很多人误认为那
会出现较多条索状细肌纤维条影响下一步颈内动脉的寻找与分离，
5.
4.
入。
3.注意尽量不要损伤在颈内颈外分叉下的交感神经节。
让其俯卧位，而且稍稍抬高其颈部，才能确保模型成功。
断了，要注意口子越小越好插线），且要剪一个斜行的切口（眼
口时就不会误剪外膜（误剪的话再剪就很容易把口剪大了或者剪
科剪与血管约成45度），这样在血液刚流出时仍能看上翻的断口
可能前端也经变形角度变了！颈内动脉的走向为内上方,可以用
栓线进入后颈内动脉后即可逐渐插入了，有时候很顺利一插如果你用的是中长效麻醉剂，插线成功后，固定丝线，然后
柔的使劲，一般都能进去，反复试几次还不行最好换根栓线，很
的动脉血流出，不必慌，只要顺着血管走行调整一下进线角度轻
伤血管。这时候正确的作法是往外抽出较多栓线，也许会有一定
一定不能盲目向前使力插，越插栓线前端变形越进不去且容易损
穿过颅骨时有一个狭窄或者角度。因此，碰上这种明显阻力时，
到底，但有时候在中间就怎么也进不去了，这是因为在血管入颅
然，切勿牵拉过猛，以免使血管发生痉挛，导致栓线不能顺利进
管壁，这样即容易插入栓线且血管受得了插线时一定的牵拉。当
眼科镊夹住鱼线插,但进去后要注意,别太用力,要不血管就要破了
9.
7.
6.
行实验。
内血栓形成。
8. 术后一定要注意保暖。
个人认为用4分制比较准些。
很明显，但并不是由于栓塞引起的
方向弯曲，一般都能将线插如颅内，决不会进入翼腭A。
血，，而且很容易误解为模型成功，因为这时的神经功能改变也
10．手术后评分的主观因素很大，有用4分制和11分制的，我
全伸展；2分，向手术对侧行走；3分，大鼠成追尾状运动。
舍去标准：
插入线拴要轻柔熟练，速度尽可能快，以避免时间长了血管
其标准是：0分，无神经损伤症状; 1分，手术对侧前指不能完
⑴栓线插入深度不足18 mm,且无明显神经功能缺损表现或症状
进线时，使栓线有一定程度的弯曲，且只要保证栓线向屋顶
栓线不能在血管里反复进退，否则及容易造成蛛网膜下腔出
11. 性激素对脑梗死面积有较大影响，应采用单一性别的动物进
[VIP专享]SD大鼠脑缺血模型建立
