堆型艾美耳球虫早熟株对常用抗球虫药的敏感性测定
刘瑞丽，王丽，张李琦，蔡秀敏，郑明学，古少鹏，白瑞
【摘 要】摘要：本试验旨在研究堆型艾美耳球虫（E.acervulina）早熟株对常用抗球虫药（地克珠利、妥曲珠利、磺胺间甲氧嘧啶、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜米星、盐霉素和土霉素）的敏感性。通过测定人工试验鸡的抗球虫活性百分比（POAA）、病变记分减少率（RLS）、相对卵囊产量（ROP）和抗球虫指数（ACI）4项指标，综合评定该虫株的药物敏感性。结果显示，妥曲珠利、磺胺间甲氧嘧啶、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、盐霉素和土霉素组的POAA、RLS、ROP、ACI 4项指标均为阴性；地克珠利组除ROP指标为阳性，POAA、PLS、ACI 3项指标均为阴性；马杜米星组的ROP和ACI为阳性，POAA和RLS为阴性。结果表明，堆型艾美耳球虫早熟株对地克珠利、妥曲珠利、磺胺间甲氧嘧啶、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、盐霉素和土霉素敏感，对马杜米星轻度敏感。 【期刊名称】中国畜牧兽医 【年(卷),期】2014(041)002 【总页数】4
【关键词】堆型艾美耳球虫早熟株；抗球虫药；药物敏感性
鸡球虫病是由1种或数种艾美耳属球虫寄生于鸡肠道上皮细胞内而引起的原虫病，病鸡以血痢、贫血、消瘦和生长发育受阻为特征，是威胁养鸡业较为严重的一种寄生虫病（蔡皓瑶等，2010）。该病发病率高达50%～70%，病死率为20%～80%，全球每年因球虫病造成的经济损失高达6～18亿元（潘留清，2011；黄翠娇，2009；卢福庄等，2007）。目前，由于球虫耐药性的普遍存在，
加上人们对禽产品药物残留问题的关注，采用疫苗防制球虫病为人心所向（吴绍强等，2005）。早熟选育方法是研制鸡球虫弱毒活疫苗的最佳致弱方法，国外已成功研制出多种商品化早熟株弱毒疫苗，即英国的Paracox和捷克的Livocax。早熟株弱毒球虫苗的安全性较高，免疫效果佳，堆型艾美耳球虫早熟株与母株相比，致病力明显减弱，且具有良好的免疫原性和遗传稳定性（李玉剑等，2009）。
山西农业大学病理实验室分离诱导获得1株堆型艾美耳球虫早熟株，该早熟株具有一般早熟株特性。其对地克珠利、妥曲珠利、磺胺间甲氧嘧啶、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜米星、盐霉素和土霉素等常用的种抗球虫药的敏感性还未曾有研究，因此，笔者开展了本研究，为研制对常用抗球虫药敏感的球虫活疫苗提供依据，同时也为因超剂量误用该疫苗引起的球虫病提供敏感药物。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 虫株 堆型艾美耳球虫早熟株（Ea P）由山西农业大学兽医病理实验室保存和提供。
1.1.2 试验动物 110只1日龄雏鸡由山西省太谷县康牧禽业提供。
1.1.3 主要试剂及器材 地克珠利购自湖北盛天恒创生物科技有限公司；妥曲珠利购自武汉众诚医药有限公司；土霉素购自济南恒吉动物药业有限公司；二硝托胺购自济南德诚医药科技有限公司；癸氧喹酯购自浙江金伯士药业有限公司；尼卡巴嗪购自武汉大华伟业医药化工有限公司；盐霉素购自浩化实业有限责任公司；磺胺间甲氧嘧啶购自湖北鑫润德化工有限公司；马杜米星购自湖北巨龙堂生物科技发展有限公司。电子计数秤购自奥豪斯仪器公司；Y96000型电子
分析天平购自赛多利斯股份有限公司；麦克马斯特虫卵计数板购自重庆滴水仪器有限责任公司；血球计数器购自新康医疗器械公司。 1.2 方法
1.2.1 试验动物分组与处理 适应性饲养2周后，将体重相近的14日龄雏鸡逐只空腹称重后分为T1～T9、T0和C组11个组（每组鸡的总重相差不超过5g），每组10只，其中T1～T9组为感染用药组，T0组为感染不用药组，C组为不感染不用药组。感染用药组于接种前1d开始饲喂含待试药物的饲料，15日龄用堆型艾美耳球虫早熟株对各感染组（T1～T9、T0组）进行接种，连续饲喂含待试药物的饲料至试验结束，各试验组具体信息见表1。感染后4～6d，每天收集粪便称重，用麦氏虫卵计数板或血球计数板记数，计算每克粪便卵囊数（OPG），统计每天每只鸡排出的卵囊量。感染后第7天结束试验，逐只空腹称重、剖解，取十二指肠，参照Johnson等（1970）的方法进行十二指肠病变记分。试验期间观察记录各组鸡的精神状况、食欲、饮水及粪便状况。 1.2.2 测定指标与判定标准 参照球虫抗药性判定指标与标准（黄兵等，2001）综合判定以下4项指标：最适抗球虫活性百分比（POAA）＞50%为阴性，POAA≤50%为阳性；病变记分减少率（RLS）≥50%为阴性，RLS＜50%为阳性；相对卵囊产量（ROP）＜15%为阴性，ROP≥15%为阳性；抗球虫指数（ACI）≥160为阴性，ACI＜160为阳性。这4项指标有0～1个阳性为敏感，2个阳性为轻度敏感，3～4个阳性为不敏感（耐药）（李婷等，2011）。
2 结果与分析
2.1 抗球虫药对E.acervulina感染鸡增重和POAA的影响 感染用药的T7、T8组鸡体增重和相对增重率最高，T2组最低。感染用药组的POAA均高于50%，
堆型艾美耳球虫早熟株对常用抗球虫药的敏感性测定
