1.3.2灭菌 sterilization
杀灭或清除传播媒介上一切微生物的处理。 1.3.3化学指示物 chemical indicator
利用某些化学物质对某一杀菌因子的敏感性，使其发生颜色或形态改变, 以指示杀菌因子的强度(或浓度)和作用时间是否符合消毒或灭菌处理的要求。 1.3.4生物指示物 biological indicator
将适当载体染以一定量的特定微生物, 用于指示消毒或灭菌效果的制品。 1.3.5消毒剂 disinfectant
用于杀灭传播媒介上的微生物使其达消毒或灭菌要求的制剂。 1.3.6灭菌剂 sterilant
可杀灭一切微生物(包括细菌芽孢)使其达到灭菌要求的制剂。 1.3.7 高效消毒剂 high-efficacy disinfectant
指可杀灭细菌芽孢达到高水平消毒的消毒剂。其中延长作用时间，可达到灭菌要求者，称为灭菌剂。
1.3.8中效消毒剂 intermediate-efficacy disinfectant
指仅可杀灭分枝杆菌、真菌、病毒及细菌繁殖体等微生物，达到消毒要求的制剂。 1.3.9低效消毒剂 low-efficacy disinfectant
指仅可杀灭细菌繁殖体，达到消毒要求的制剂。 1.3.10高水平消毒 high-level disinfection
指使用高效消毒剂，在未达到灭菌剂量的条件下（即用某一高效消毒剂的灭菌浓度，但作用时间比灭菌所用者短），可达到杀灭除了一些高抗力的细菌芽孢以外的所有微生物, 此消毒剂量虽不能完全杀灭所有的细菌芽孢，但可杀灭细菌繁殖体（包括结核分枝杆菌）、真菌和亲水性病毒（如脊髓灰质炎病毒）等致病微生物。 1.3.11植物消毒剂 herbal disinfectant
指具有杀灭微生物作用的植物(包括中草药)及其提取物。 1.3.12有效氯 available chlorine
有效氯是衡量含氯消毒剂氧化能力的标志,是指与含氯消毒剂氧化能力相当的氯量 (非指消毒剂所含氯量),其含量用mg/L、g/100g表示。 1.3.13中和剂 neutralizer,inactivator
在微生物杀灭试验中,用以消除试验微生物与消毒剂的混悬液中和微生物表面上残留的消毒剂, 使其失去对微生物抑制和杀灭作用的试剂。 1.3.14中和产物 product of neutralization
指中和剂与消毒剂作用后的产物。
1.3.15菌落形成单位 colony forming unit,cfu
在活菌培养计数时, 由单个菌体或聚集成团的多个菌体在固体培养基上生长繁殖所形成的集落, 称为菌落形成单位, 以其表达活菌的数量。 1.3.16自然菌 natural bacteria
在消毒试验中, 指存在于某一试验对象上非人工污染的细菌。 1.3.17存活时间 survival time, ST
用于生物指示物抗力鉴定时,指受试指示物样本，经杀菌因子作用不同时间,培养后的全部样本均有菌生长的最长作用时间 (min)。 1.3.18杀灭时间 killing time, KT
用于生物指示物抗力鉴定时, 指受试指示物样本，经杀菌因子作用不同时间后, 培养后的全部样本均无菌生长的最短作用时间 (min)。 1.3.19 D 值 D value
杀灭微生物数量达90%所需的时间(min)。 1.3.20杀灭对数值 killing log value
微生物数量以对数表示时，消毒后与消毒前比较, 以其减少的对数值来表达杀灭效果。 1.3.21杀灭率 killing rate, KR
在微生物杀灭试验中，用百分率表示微生物数量减少的值，以其表达杀灭效果。
1.3.22灭菌保证水平 sterility assurance level,SAL
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指灭菌处理后单位产品上存在活微生物的概率。SAL通常表示为10。如，SAL为10，即在百万件物品中最多只允许有一件物品仍存在活微生物。 1.3.23医院消毒disinfection in hospital
杀灭或清除医院环境中和物体上污染的病原微生物的过程。 1.3.24疫源地消毒 disinfection of epidemic focus
对存在或曾经存在传染源的场所进行的消毒。其目的是杀灭或清除传染源排出的病原体。
1.3.25随时消毒 concurrent disinfection
疫源地内有传染源存在时进行的消毒。目的是及时杀灭或清除病人排出的病原微生物。 1.3.26终末消毒 terminal disinfection
传染源离开疫源地后进行的彻底消毒。 1.3.27预防性消毒preventive disinfection
对可能受到病原微生物污染的物品和场所进行的消毒。 1.3.28无菌检验 sterility testing
证明灭菌后的物品中是否存在活微生物所进行的试验。 1.3.29载体 carrier
试验微生物的支持物。 1.3.30生物负载 bioburden
被测试的一个单位物品上存在活微生物的总数。 1.3.31暴露时间 exposed time
消毒或灭菌物品受到消毒因子作用的时间。又称作用时间、处理时间。 1.3.32人员卫生处理 personnel decontamination
对污染或可能被污染人员进行人体、着装、随身物品等的消毒与清洗等除污染处理。 1.4 基本原则
1.4.1对消毒检验技术的要求 1.4.1.1对消毒实验室条件的要求
检验机构的微生物实验室应采取封闭式布局，人流、物流分开，建筑应便于清洁、消毒。为避免污染应在相对正压洁净条件下进行，但有时因特殊需要，用致病菌作指示菌时，则应在生物安全柜（负压）内进行。对无菌产品的无菌检查试验, 必须在100 级洁净度的实验室,或100 级层流操作箱中进行。 1.4.1.2 对无菌操作的要求
（1）试验开始前, 应以湿式方法清洁台面和打扫室内地面，然后以紫外线或其他方法对实验室内空气进行消毒；
（2）实验人员应穿戴工作服、口罩、帽子；进行无菌检验时,需经风淋后进入实验室, 然后, 正确穿戴好无菌隔离衣、帽和口罩；
（3）每吸取一次不同样液应更换无菌吸管, 接种环（针）需在火焰上烧灼灭菌后，才可再次使用；
（4）要求无菌的试剂, 如蒸馏水、生理盐水、磷酸盐缓冲液、培养基、中和剂等, 均需经灭菌或滤过除菌；
（5）无菌器材和试剂,使用前检查容器或包装是否完整, 有破损者不得使用； （6）正在使用的无菌器材和试剂不得长时间暴露于空气中；
（7）移液或接种时, 应将试管口和琼脂平板靠近火焰，防止污染；
（8）所有用过的污染器材, 应立即放入盛有消毒液的容器中, 以防止对周围环境和清洁物品造成污染；
（9）若不慎发生微生物培养物摔碎或其他试验微生物泄漏事故时, 不论是否具有致病性, 均应立即对污染及可能波及的区域进行消毒处理；
（10）全部试验结束后, 应按常规对室内空气和环境表面进行消毒处理。 1.4.1.3对试验的要求
（1）试验前，应详细阅读由申请检验单位提供的产品研制报告和产品使用说明书。根据产品的适用范围、用途和使用方法，充分了解检测对象的特性、用途。依据《卫生部消毒剂、消毒器械卫生许可批件申报与受理规定》，按照科学性、准确性、实用性和安全性等要
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求, 作出完整的试验设计，以求得对该产品全面、准确的评价。
科学性是指检测项目和方法合理，符合有关规定，并足以说明该产品的特性。准确性是指试验所得数据准确可靠，重复性好，误差限制在规定范围内。实用性是指检测条件紧密结合实际，符合实用要求。安全性是指设计试验剂量时，在保证消毒效果的同时应考虑其对人体安全，对环境无污染以及对物品无损害。
(1)消毒产品应由申报单位或委托有关机构检验提供产品研制报告和产品使用说明书。检验单位应根据该产品的特性和用途，对其应检测评价的项目作出全面的试验设计。
(2)用于评价消毒剂消毒效果的实验室试验应以悬液定量法为主,试验须重复三次。试验
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用指示菌悬液的菌量为1×10cfu/ml～5×10cfu/ml(与消毒剂作用的菌量为1×77
10cfu/ml～5×10cfu/ml)，以牛血清白蛋白作为干扰物，消毒剂溶液用无菌硬水配制。对反复用于浸泡消毒的消毒剂应做能量试验。
(3) 用于评价医疗器械灭菌的消毒剂和消毒器械的实验室试验应用载体定性法，试验应重复五次。在无特殊要求的情况下,以不锈钢圆片为载体。污染载体的指示菌悬液量为10μ
56
l/片,回收菌量为5×10cfu/片～5×10cfu/片。
(4)对不宜用悬液定量法评价的消毒剂，如黏稠的消毒剂和冲洗消毒的消毒剂等的实验室试验用载体定量法，试验应重复三次。在无特殊要求的情况下, 以布片为载体。污染载体
56
的指示菌悬液量为10μl/片,回收菌量为5×10cfu/片～5×10cfu/片。
(5)评价消毒剂消毒效果的实验室试验,试验浓度要用产品说明书规定的该消毒剂对某一有代表性消毒对象的最低使用浓度。试验设三个不同作用时间，原则上第一时间为最低有效时间的0.5倍，第二时间为最低有效时间，第三时间为最低有效时间的2倍。
(6)在对消毒剂进行监督监测时, 定量杀菌试验的消毒剂浓度和作用时间选择消毒对象中抗力最强的微生物, 以说明书规定的最低浓度和最短时间验证其消毒效果。对于灭菌剂则以说明书中规定的使用浓度和其0.5倍的作用时间验证其灭菌效果。 (7)鉴定和监测多用途消毒剂与消毒器械消毒效果时，现场或模拟现场试验的消毒对象原则上是在类似物品中最难达到消毒合格者，如医疗器械消毒或灭菌选用止血钳；皮肤消毒选择人体前臂屈面皮肤；织物消毒选择棉布；一般物品表面（包括木质、塑料、橡胶、玻璃）消毒选择木质油漆表面；餐具消毒选用竹(木)筷，不用于筷子消毒的可选用瓷质碗盘；地面消毒选择水泥地面；手消毒选择五指屈面；对于特指消毒对象而又在上述物品中不能选出有代表性物品时，则需用该特指对象进行试验。
(8)对于经过充分清洗的消毒对象专用的消毒剂，可按其使用方法，在杀菌试验时可减低干扰物的浓度。
1.4.1.4消毒剂鉴定测试项目的确定
(1) 有效成分含量的测定：有效成分系指具有杀菌作用的成分。所有化学消毒剂均应进行本项检测。复方化学消毒剂测其杀菌主要成分的含量。植物消毒剂和用其提取物配制的消毒剂可不测定有效成分。
(2) pH 值的测定：所有消毒剂需测定消毒剂原液的pH 值，固体消毒剂应测定应用浓度的pH值。对于需调节pH后使用的消毒剂则应在pH调节剂加入前后分别测定pH值。
(3) 稳定性试验：所有消毒剂均应进行稳定性试验，可用经验法37℃，90d和/或54℃,14d；也可选用自然留样法。能测定有效成分的消毒剂用化学法进行试验，不能测定有效成分的消毒剂用微生物法进行试验。
(4) 金属腐蚀性试验：用于金属物品消毒的消毒剂应进行本项检测，试验浓度应选择最高使用浓度。
(5) 微生物杀灭试验：所有消毒剂均应进行本项检测。试验前, 必须先按不同种类的试验微生物分别进行相应的化学中和剂或其它残留消毒剂去除法的鉴定试验，选出适宜的中和剂用于各类微生物的杀灭试验。试验微生物包括细菌繁殖体的代表株金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)ATCC 6538、大肠杆菌(Escherichia coli)8099、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)ATCC 15442、白色葡萄球菌(Staphylococcus albus)8032；结核分枝杆菌的代表株龟分枝杆菌脓肿亚种(Mycobacterium chelonae subsp. abscessus)ATCC 93326 ；细菌芽孢的代表株枯草杆菌黑色变种芽孢(Bacillus subtilis var.niger)ATCC 9372；真菌的代表株白色念珠菌(Candida albicans)ATCC 10231和黑曲霉菌(Aspergillus niger)ATCC 16404；病毒的代表株为脊髓灰质炎病毒-Ⅰ型疫苗株(Poliovirus-Ⅰ)。
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不同用途的消毒剂和消毒器械，实验室杀灭微生物试验的代表微生物应按照表1-1所列者选择。若特指对某微生物有效时, 则需进行相应微生物的杀灭试验。
对于专用于灭菌,不作他用的消毒剂，只需做枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭试验，可不做病毒、真菌、分枝杆菌及细菌繁殖体杀灭试验,但对既用于灭菌, 又用于消毒的消毒剂则按上述要求选择相应微生物进行试验。
表1-1 杀灭试验中微生物的选择
微 生 物 的 种 类
消毒对象
金黄色葡萄球菌 + + + + + +
绿
脓 大肠 白色念杆杆菌 珠菌 菌 + + + + + +
+ + + +
+ +
黑
曲 白色葡萄霉球菌 菌 +
+
龟分枝杆菌脓肿亚种
+
枯草杆菌黑色变种芽孢
+
脊髓灰质炎病毒 + +
手
皮肤和粘膜 足 空气
医疗器械和用品(灭菌与高水平消毒)
医疗器械和用品 (中水平消毒) 医疗器械和用品 (低水平消毒) 一般物品表面 和织物 食(饮)具 饮水和游泳池水 瓜果、蔬菜
【注】表中‘+’为必做试验的微生物，消毒剂特指对某微生物具有杀灭作用者，则除按表中要求外，还需另选做该微生物杀灭试验。
(6) 模拟现场试验与现场试验：根据不同消毒对象按如下要求选择模拟现场或现场试验:
用于饮水、空气消毒的消毒剂须进行模拟现场与现场试验。
用于手、皮肤、一般物体表面消毒的消毒剂任选模拟现场试验或现场试验。粘膜消毒剂的模拟现场试验或现场试验可用皮肤代替。
用于食（饮）具、医疗器械和用品消毒的消毒剂进行模拟现场试验。其中医疗器械的模拟现场试验应区分消毒或灭菌。
1.4.1.5消毒器械鉴定测试项目的确定
消毒器械应根据产品功能与用途要求选择以下项目进行检测。对器械、耐压或电气性能及关键部件的使用寿命等的鉴定，由相关行业计量认证考核合格的检验机构按其标准进行检测,提供检验报告。
(1) 杀菌因子强度或浓度的测定
杀菌因子指消毒器械所产生的具有杀菌作用的物理或化学因子。物理因子包括热、微波、紫外线等。对物理杀菌因子应测定其规定杀菌条件下的强度,如对热力杀菌器械应测量其温度,对紫外线杀菌器材测定其辐照度值。化学因子则由消毒器械产生具有杀菌作用的化学物质,常见有次氯酸钠、臭氧、二氧化氯等，可测定所产生消毒液中有效成分的浓度。
(2) 金属腐蚀性试验
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主要检测杀菌器械所产生化学杀菌因子对金属的腐蚀性。其要求与消毒剂的金属腐蚀性试验相同。
(3) 实验室杀灭微生物试验
用于消毒的器械,应采用定量杀灭试验;用于灭菌的器械应做定性杀灭试验。试验要求与消毒剂鉴定试验相同[见2.1.2.4 (5)]。
(4) 安全性试验
包括电器安全试验和消毒器械产生的化学因子的毒理学试验。 (5) 模拟现场和现场试验
环氧乙烷灭菌器、微波消毒（灭菌）器、臭氧消毒柜（器）、红外线消毒器和紫外线灯管等消毒灭菌器械均须进行模拟现场试验。消毒器械产生的化学因子按消毒剂的要求进行模拟现场和现场试验。
1.4.1.6消毒剂有效成分含量表示方法
有效成分含量以法定计量单位表示。复方消毒剂以其杀菌主要有效成分含量表示；植物消毒剂以百分浓度表示，如1份原液加4份水即该消毒剂溶液的浓度为20%。 1.4.1.7对重复试验的要求
对所要求的重复性试验，并不是只在同次试验中增加菌片数,或多作几份样本，而是应分期分批进行。必要的器材和试剂应重新制备或灭菌，以防产生系统性误差。
中和剂鉴定试验,应将各组 3 次重复试验结果平行列出, 以便对比分析。 1.4.1.8判定标准
(1) 载体定性灭菌试验结果的判定:各次试验阴性对照无菌生长﹑阳性对照有菌生长,
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染菌样本回收菌数为5×10 cfu/样本～5×10cfu/样本,所有试验样本全部无菌生长的消毒剂浓度和作用时间为实验合格剂量，作为确定该消毒剂对医疗器械灭菌使用剂量的参考。
(2)消毒剂量:
1)在悬液定量杀灭试验中,各次试验阴性对照无菌生长,阳性对照回收菌数在77
1×10cfu/ml～5×10cfu/ml范围内,各次试验的杀灭对数值均≥5,为消毒合格。
2)在载体定量杀灭试验中,各次试验阴性对照无菌生长,阳性对照回收菌数在56
5×10cfu/片～5×10cfu/片范围内,各次试验的杀灭对数值均≥3,为消毒合格。
3)空气消毒实验室试验和模拟现场试验,各次试验阴性对照无菌生长,阳性对照菌数均
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在5×10 cfu/m～5×10cfu/m范围内，各次试验的杀灭率≥99.90%，现场试验各次自然菌消亡率≥90.00%,为消毒合格。 1.4.1.9 最终评价的要求
由于影响消毒与灭菌鉴定试验结果的因素很多，其中也包括试验的准确性和设计的科学性, 所以在根据试验结果进行最终评价时应综合分析。除反复推敲试验过程和结果的准确性外，还应和国内外文献报导该消毒剂（消毒器械）的性能和不同试验方法所得结果进行比较，以判断所下结论有无不妥之处。如有不同于通常规律的结果，应重新考虑实验设计。如试验组距设置,消毒剂(器械)浓度(强度)测定和计算,实验条件(温度、湿度、pH值等)是否符合规定,特别要注意中和剂的选择试验是否符合要求等。必要时,还需要经过多种试验，多个实验室重复，查阅国内外文献,从各个角度证明，才能做出可靠的结论。 1.4.1.10 对实用剂量的要求
日常消毒与灭菌中影响杀菌效果的因素较多，而实验室试验所规定的条件,均应控制在一个固定的范围之内，因此，需根据多种试验结果和实践经验确定。
杀菌剂量包含有两个参数，一是杀菌因子的强度，二是作用的时间。在确定实用剂量时需考虑的因素主要有：污染微生物的种类和数量；有机物的含量；杀菌因子的稳定性；环境的温湿度变化；腐蚀性的强弱；酸碱度；消毒对象的性质；允许使用的浓度；允许作用的时间；杀菌因子的穿透能力；对人体和环境的危害等。实用剂量应符合下列要求：
（1）申请检验单位应根据消毒产品的研制结果,针对不同用途,提出杀灭微生物有效、安全的实用剂量。
（2）实用剂量不低于模拟现场试验或现场试验所测得的结果。 （3）实用剂量应对人体和环境无危害,对物品无损害。 1.4.1.11 对试验记录的要求
实验室对所进行的试验，必须按计量认证要求认真观察试验结果，作好原始记录。为
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消毒技术规范
