乳腺癌组织中ERα、ERβ蛋白表达
及其意义
【摘要】 ［目的］ 探讨雌激素受体亚型在乳腺癌发生和发展中的作用。［方法］ 应用免疫组化技术及医学图像分析仪检测正常乳腺组织、单纯性增生组织、不典型增生组织及乳腺癌组织中ERα、ERβ及Ki67的阳性细胞百分率及灰度值，分析相应抗体的表达量。［结果］ ①与正常乳腺组织比较，乳腺癌患者组织中ERα阳性细胞百分率及灰度值明显升高；②ERβ的阳性细胞百分率在正常乳腺组织中高于不典型增生组织，而后者又高于乳腺癌组织，ERβ的灰度值在正常乳腺组织中也高于不典型增生；③不典型增生周围组织及癌旁组织中ERβ的表达水平高于病变组织中；④Ki67的表达水平与ERβ的表达呈负相关，与ERα表达无显着性相关。［结论］ 在乳腺癌发生的不同病理阶段ERβ表达量是逐渐降低的，推测ERβ的表达降低与乳腺癌的发生有关。 【关键词】 乳腺肿瘤
随着乳腺癌中ERα、ERβ相继被发现，该受体得到了广泛的研究，但大多数是对mRNA水平的表达变化的研究。ERβ的表达水平比ERα低得多，获得高特异性的ERβ单克隆及多克隆抗体较为困难，因此，ERβ蛋白水平的研究相对缓慢，直到2000年才开始有零星的报道[1]。
近年来对ERβ研究的深入，人们认为受体真正发挥作用要有蛋白的表达和功能，因此ERβ蛋白水平的研究同样或更为重要。本研究应用免疫组化技术及图像分析仪检测正常乳腺组织、不典型增生及乳腺癌组织等不同病理变化过程中ERα和ERβ蛋白表达量的变化，以探讨ERα和ERβ在乳腺癌发生、发展中的作用及意义。 1 材料与方法 研究对象
收集2001年1月～2003年12月期间武汉大学中南医院妇科的手术标本，每例样本均作病理确诊。其中乳腺纤维瘤30例、乳腺增生26例、不典型增生22例、乳腺癌标本68例。组织经甲醛固定，石蜡包埋备用。所
有患者术前均未经过治疗。 方 法 主要试剂
单克隆抗体ERα和ERβ抗体：美国Sanata Cruz公司生产。常规免疫组化试剂盒SP及 Ki67抗体：福州迈新试剂公司生产。 实验方法
分别取手术切除的乳腺组织石蜡块，每块连续切取7张5μm厚的切片，1张HE染色，核实病理诊断，另2张应用SP试剂盒进行免疫组化染色。分别用兔抗大鼠ERα、ERβ及Ki67抗体，孵育切片，再用生物素化的鼠抗兔二抗孵育30min，37℃，DAB显色5～10min。每步骤间用/L PBS 充分洗涤，常规脱水、透明、封片、镜下观察、摄片。另一张不加抗体作为阴性对照。在显微镜下观察形态学变化，染色成棕黄色颗粒者为阳性，每张切片随机取5个视野，计算每视野中每100个细胞中阳性细胞数，其平均值为该张切片的表达水平。使用医学图像分析仪测定细胞灰度值，用OS-9数据分析软件分析相应抗体的表达量，每张切片随机取5个视野，
乳腺癌组织中ERα、ERβ蛋白表达及其意义
