XXXXXX 医院 检验科免疫室 分析项目作业指导书 1. 分析原理 Elecsys E 170/E 411 甲状腺素结合力测定(T-Uptake) 文件编号：LAB－OP－MY020 1 页，共 第 3 页 版本：A/0 生效日期：2008-02-01 采用改良的竞争法原理，整个过程18分钟完成。 · 第1步：15μl标本，外源性T4与生物素化的T4-聚半抗原混匀。T4占据血清标本中的游离的结合位点。 · 第2步：加入钌（Ru）标记的抗T4抗体和链霉亲和素包被的微粒。T4-聚半抗原与抗T4抗体结合形成免疫复合物，其数量与剩余的外源性T4含量成反比。形成的免疫复合物通过生物素、链酶亲和素之间的反应结合到微粒上。 · 第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行测定。检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫入仪器的原版标准曲线而得。 2. 标本要求 血清：按标准常规方法采集。 血浆：肝素、EDTA-K3、枸橼酸盐或草酸-K抗凝均可。标本在2－8度可稳定8天，-20℃至少可稳定3个月。标本只可冻融1次。有沉淀的标本使用前需离心。加热灭活的标本不可使用。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。 标本、定标液和质控品在测定前应预温到室温。放入仪器后应在2小时内测定以避免蒸发的影响。 3. 试剂、校准品、质控品和其他所需材料 采用罗氏原装配套试剂。 试剂： M： 链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。粒子浓度0.72mg/ml，生物素结合能力： 470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。 R1：生物素化的T4-聚半抗原（灰盖），1瓶，18ml，浓度70 ng/ml；甲状腺素60ng/ml；磷酸缓冲液0.1mol/l，pH7.0含防腐剂。 R2：Ru(bpy)32+标记的羊抗T4抗体（黑盖），1瓶，18ml。浓度120ng/ml，磷酸缓冲液0.1mol/l，pH 7.0含防腐剂。 校准品（货号11731505）： Cal 1 阴性定标液（白盖），2瓶，1.0 ml/瓶，T-Uptake浓度约为0.5 TBI,人血清，含防腐剂 Cal 2 阳性定标液（黑盖），2瓶，1.0 ml/瓶，T-Uptake浓度约为1.3 TBI,人血清，含防腐剂 质控品： Elecsys 通用质控品（PreciContorl Universal）1和2 ,货号11731416 其他所需材料： Elecsys 2010、E170、E601或 E411分析仪 Elecsys 2010和 E411分析仪需要： Elecsys 系统缓冲液（ProCell）货号11662988 Elecsys测量池清洗液（CleanCell）货号11662970 Elecsys 添加剂液（SysWash）货号11930346 Elecsys 系统清洗液（SysClean）货号11298500 Elecsys E170和 E601分析仪需要： Elecsys 系统缓冲液（ProCell）货号12135019 Elecsys测量池清洗液（CleanCell）货号12135027 Elecsys 系统清洗液（SysClean）货号11298500
XXXXXX 医院 检验科免疫室 分析项目作业指导书 4. 仪器和校准 Elecsys E 170/E 411 文件编号：LAB－OP－MY020 2 页，共 第 3 页 版本：A/0 生效日期：2008-02-01 使用仪器：生产Elecsys 2010/E 170/E 601/E 411全自动电化学发光免疫自动分析仪 仪器校准：每批T-Uptake试剂盒必须用新鲜试剂和T-Uptake Cal 1,Cal 2定标一次。另外，以下情况需要再次定标： Elecsys2010/E 170/E601/E 411： · 一个月（同一批号试剂） · 7天（放置仪器上的同一试剂盒） 各种分析仪均适用的情况：根据要求进行定标：如质控结果超出范围时；根据规定进行多次定标。 5. 操作步骤（以E 170为例） 5.1 校准操作步骤： 在编缉各项目的参数时，已经在Application—Calib菜单中定义好了定标类型和几点定标。因此在对各项目进行定标时，只需在定标菜单Calibration中进行即可。3.2进入Calibration—Status菜单，用鼠标选择需定标的项目，再根据需要点单点定标（BLANK键）或两点定标（TWO POINT键）、跨距定标（SPAN键）、多点定标（FULL键），再选择其它项目进行相应选择，最后点SAVE，将定标物放入在Calibration—Calibrator中定义好的位置，点Start，再点Start，仪器开始定标。 在Calibration—Status菜单中看定标结果，点Calibration Result键看定标结果，点Reaction Monitor键看每个定标物的反应曲线。 5.2 样本检测程序： 单个样本输入，在主菜单下选择Workplace- Testslection，在Sequence No栏输入标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点SAVE键，样本号自动累加。 批量常规标本的输入，在主菜单下选择Workplace- Testslection，在Sequence No栏输入起始标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点REPEAT，输入该批标本的最后一个标本号，点OK即可。 进样分析，将标本按在Workplace菜单中输入的标本号顺序在样本架上排好，放入进样盘内,按START键，输入该批上机标本的起始标本号，再点START键，仪器自动开始推架检测标本。 6. 质量控制 用Elecsys 通用质控品（PreciContorl Universal）1和2。质控品1和质控品2至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。 7. 计算方法 对每一个标本，仪器会自动计算T-Uptake（TBC）含量。报告形式是TBI。为了进一步获取甲状腺功能的信息（包括T4值），应测定游离甲状腺指数：FT4I=T4：TBI 8. 参考范围 TBI：中位数1.0（范围：第2.5至97.5百分位n=974）：0.8-1.3。 FT4指数（T4/TBI）：62-164nmol/l或4.8-12.7mg/dl（范围：范围：第2.5至97.5百分位n=825）。 9. 分析性能 TBI:0.200-1.90 10. 干扰因素 该方法不受黄疸（胆红素<41mg/dl）、溶血（血红蛋白<2g/dl）、脂血（脂质<2000mg/dl）和生物素<100ng/ml等干扰。接受高剂量生物素（>5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰（<=339U/ml）。26种常用药物经试验对本测定无干扰。 使用含D-T4降血脂制剂的病人不适合本项试验。 假如要检查甲状腺功能，须停药4-6周，等恢复生理状态后再进行T-Uptake测定。甲状腺激素的自身抗体会干扰试验。 偶尔会遇到抗链酶亲和素抗体和抗钌抗体的干扰。
XXXXXX 医院 检验科免疫室 分析项目作业指导书 11. 临床意义 Elecsys E 170/E 411 文件编号：LAB－OP－MY020 3 页，共 第 3 页 版本：A/0 生效日期：2008-02-01 Elecsys T-Uptake测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。 甲状腺素（T4）是甲状腺调节系统的组成部分，参与机体的整体代谢活动。 测定甲状腺素含量是鉴别甲状腺功能正常与否的重要实验室手段。由于甲状腺素的大部分与其运载蛋白质（TBG，前白蛋白和白蛋白）结合，因此仅在血清甲状腺素结合力正常的情况下，测定总甲状腺素才能提供有价值的信息。 血中游离的甲状腺素与结合的甲状腺素处于平衡状态。尽管游离的甲状腺素可能在正常范围，但TBG含量的变化仍可导致总甲状腺素测定值的改变。 甲状腺素结合力测定可了解甲状腺素的结合位点数。 由总甲状腺素T4和TBI（甲状腺素结合指数=甲状腺素结合力测定结果）的商得出的游离甲状腺素指数（FT4I）反映了TBG含量以及甲状腺素含量这两种变化因素。 Elecsys T-Uptake是采用免疫学方法定量测定人血清或血浆的甲状腺素结合力（TBC），其中加入了外源性的T4来饱和TGB。 12．参考文献 编写： 审核： 批准： 批准日期： 年 月 日
T-up作业指导书 - 图文
