XXXXXX 医院 检验科免疫室 分析项目作业指导书 1. 分析原理 Elecsys E 170/E 411 甲状腺素结合力测定(T-Uptake) 文件编号:LAB-OP-MY020 1 页,共 第 3 页 版本:A/0 生效日期:2008-02-01 采用改良的竞争法原理,整个过程18分钟完成。 · 第1步:15μl标本,外源性T4与生物素化的T4-聚半抗原混匀。T4占据血清标本中的游离的结合位点。 · 第2步:加入钌(Ru)标记的抗T4抗体和链霉亲和素包被的微粒。T4-聚半抗原与抗T4抗体结合形成免疫复合物,其数量与剩余的外源性T4含量成反比。形成的免疫复合物通过生物素、链酶亲和素之间的反应结合到微粒上。 · 第3步:反应混和液吸到测量池中,微粒通过磁铁吸附到电极上,未结合的物质被清洗液洗去,电极加电压后产生化学发光,通过光电倍增管进行测定。检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正,由从试剂条形码扫入仪器的原版标准曲线而得。 2. 标本要求 血清:按标准常规方法采集。 血浆:肝素、EDTA-K3、枸橼酸盐或草酸-K抗凝均可。标本在2-8度可稳定8天,-20℃至少可稳定3个月。标本只可冻融1次。有沉淀的标本使用前需离心。加热灭活的标本不可使用。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。 标本、定标液和质控品在测定前应预温到室温。放入仪器后应在2小时内测定以避免蒸发的影响。 3. 试剂、校准品、质控品和其他所需材料 采用罗氏原装配套试剂。 试剂: M: 链霉亲和素包被的微粒(透明瓶盖),1瓶,6.5ml。粒子浓度0.72mg/ml,生物素结合能力: 470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。 R1:生物素化的T4-聚半抗原(灰盖),1瓶,18ml,浓度70 ng/ml;甲状腺素60ng/ml;磷酸缓冲液0.1mol/l,pH7.0含防腐剂。 R2:Ru(bpy)32+标记的羊抗T4抗体(黑盖),1瓶,18ml。浓度120ng/ml,磷酸缓冲液0.1mol/l,pH 7.0含防腐剂。 校准品(货号11731505): Cal 1 阴性定标液(白盖),2瓶,1.0 ml/瓶,T-Uptake浓度约为0.5 TBI,人血清,含防腐剂 Cal 2 阳性定标液(黑盖),2瓶,1.0 ml/瓶,T-Uptake浓度约为1.3 TBI,人血清,含防腐剂 质控品: Elecsys 通用质控品(PreciContorl Universal)1和2 ,货号11731416 其他所需材料: Elecsys 2010、E170、E601或 E411分析仪 Elecsys 2010和 E411分析仪需要: Elecsys 系统缓冲液(ProCell)货号11662988 Elecsys测量池清洗液(CleanCell)货号11662970 Elecsys 添加剂液(SysWash)货号11930346 Elecsys 系统清洗液(SysClean)货号11298500 Elecsys E170和 E601分析仪需要: Elecsys 系统缓冲液(ProCell)货号12135019 Elecsys测量池清洗液(CleanCell)货号12135027 Elecsys 系统清洗液(SysClean)货号11298500
XXXXXX 医院 检验科免疫室 分析项目作业指导书 4. 仪器和校准 Elecsys E 170/E 411 文件编号:LAB-OP-MY020 2 页,共 第 3 页 版本:A/0 生效日期:2008-02-01 使用仪器:生产Elecsys 2010/E 170/E 601/E 411全自动电化学发光免疫自动分析仪 仪器校准:每批T-Uptake试剂盒必须用新鲜试剂和T-Uptake Cal 1,Cal 2定标一次。另外,以下情况需要再次定标: Elecsys2010/E 170/E601/E 411: · 一个月(同一批号试剂) · 7天(放置仪器上的同一试剂盒) 各种分析仪均适用的情况:根据要求进行定标:如质控结果超出范围时;根据规定进行多次定标。 5. 操作步骤(以E 170为例) 5.1 校准操作步骤: 在编缉各项目的参数时,已经在Application—Calib菜单中定义好了定标类型和几点定标。因此在对各项目进行定标时,只需在定标菜单Calibration中进行即可。3.2进入Calibration—Status菜单,用鼠标选择需定标的项目,再根据需要点单点定标(BLANK键)或两点定标(TWO POINT键)、跨距定标(SPAN键)、多点定标(FULL键),再选择其它项目进行相应选择,最后点SAVE,将定标物放入在Calibration—Calibrator中定义好的位置,点Start,再点Start,仪器开始定标。 在Calibration—Status菜单中看定标结果,点Calibration Result键看定标结果,点Reaction Monitor键看每个定标物的反应曲线。 5.2 样本检测程序: 单个样本输入,在主菜单下选择Workplace- Testslection,在Sequence No栏输入标本号,然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目,点SAVE键,样本号自动累加。 批量常规标本的输入,在主菜单下选择Workplace- Testslection,在Sequence No栏输入起始标本号,然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目,点REPEAT,输入该批标本的最后一个标本号,点OK即可。 进样分析,将标本按在Workplace菜单中输入的标本号顺序在样本架上排好,放入进样盘内,按START键,输入该批上机标本的起始标本号,再点START键,仪器自动开始推架检测标本。 6. 质量控制 用Elecsys 通用质控品(PreciContorl Universal)1和2。质控品1和质控品2至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内,如出现质控值落在范围以外,应采取校正措施。 7. 计算方法 对每一个标本,仪器会自动计算T-Uptake(TBC)含量。报告形式是TBI。为了进一步获取甲状腺功能的信息(包括T4值),应测定游离甲状腺指数:FT4I=T4:TBI 8. 参考范围 TBI:中位数1.0(范围:第2.5至97.5百分位n=974):0.8-1.3。 FT4指数(T4/TBI):62-164nmol/l或4.8-12.7mg/dl(范围:范围:第2.5至97.5百分位n=825)。 9. 分析性能 TBI:0.200-1.90 10. 干扰因素 该方法不受黄疸(胆红素<41mg/dl)、溶血(血红蛋白<2g/dl)、脂血(脂质<2000mg/dl)和生物素<100ng/ml等干扰。接受高剂量生物素(>5mg/天)治疗的病人,至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰(<=339U/ml)。26种常用药物经试验对本测定无干扰。 使用含D-T4降血脂制剂的病人不适合本项试验。 假如要检查甲状腺功能,须停药4-6周,等恢复生理状态后再进行T-Uptake测定。甲状腺激素的自身抗体会干扰试验。 偶尔会遇到抗链酶亲和素抗体和抗钌抗体的干扰。
XXXXXX 医院 检验科免疫室 分析项目作业指导书 11. 临床意义 Elecsys E 170/E 411 文件编号:LAB-OP-MY020 3 页,共 第 3 页 版本:A/0 生效日期:2008-02-01 Elecsys T-Uptake测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。 甲状腺素(T4)是甲状腺调节系统的组成部分,参与机体的整体代谢活动。 测定甲状腺素含量是鉴别甲状腺功能正常与否的重要实验室手段。由于甲状腺素的大部分与其运载蛋白质(TBG,前白蛋白和白蛋白)结合,因此仅在血清甲状腺素结合力正常的情况下,测定总甲状腺素才能提供有价值的信息。 血中游离的甲状腺素与结合的甲状腺素处于平衡状态。尽管游离的甲状腺素可能在正常范围,但TBG含量的变化仍可导致总甲状腺素测定值的改变。 甲状腺素结合力测定可了解甲状腺素的结合位点数。 由总甲状腺素T4和TBI(甲状腺素结合指数=甲状腺素结合力测定结果)的商得出的游离甲状腺素指数(FT4I)反映了TBG含量以及甲状腺素含量这两种变化因素。 Elecsys T-Uptake是采用免疫学方法定量测定人血清或血浆的甲状腺素结合力(TBC),其中加入了外源性的T4来饱和TGB。 12.参考文献 编写: 审核: 批准: 批准日期: 年 月 日
T-up作业指导书 - 图文
![](/skin/haowen/images/icon_star.png)
![](/skin/haowen/images/icon_star.png)
![](/skin/haowen/images/icon_star.png)
![](/skin/haowen/images/icon_star.png)