诃子四柱散中没食子酸的含量测定

诃子四柱散中没食子酸的含量测定

常丽敏

【摘 要】摘要：目的 建立一种适于诃子四柱散中没食子酸含量测定的方法，为没食子酸的提取工艺和质量标准研究提供参考。方法 采用HPLC，考察色谱条件、供试品溶液制备方法、重现性、线形与范围、精密度、稳定性以及回收率等。结果确定色谱条件如下，检测波长为273nm，色谱柱（C18，5um，4.6mm×250mm），流动相为甲醇—0.3%磷酸缓冲液（1：9），流速为1.0mL/min，柱温30℃，进样量10uL。没食子酸在0.44ug～4.4ug范围内呈现良好的线性关系，其精密度、重复性、稳定性均较高，平均回收率为100.9086%，RSD为1.6522%。结论 该方法科学、合理、可行，符合简便、快速、准确的要求，为没食子酸的相关研究奠定了基础。 【期刊名称】世界最新医学信息文摘（电子版） 【年(卷),期】2015(000)011 【总页数】2

【关键词】诃子四柱散；没食子酸；高效液相色谱法；方法学考察；含量测定

0 引言

本品为中药人参、白茯苓、附子、木香和诃子五味药材组成的散剂，此方具有治疗脏腑虚怯，本气衰弱，脾胃不快，不进饮食，时加泄痢，昼夜不息的功效[1]。方中诃子具有良好的涩肠止泻、降火利咽、调和药性、解毒等功效[2]。诃子的主要成分为没食子酸[5],为做进一步的研究和开发，在综合文献的基础之上设计了一种用高效液相色谱测定诃子四柱散中没食子酸的含量测定的方法。结果表明,此法操作简便、灵敏度高、重现性好,为有效控制产品质量提供依据。

1 实验仪器与材料

1.1 试药

没食子酸标准品（中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用）、没食子酸供试品(20120605制备诃子四柱散)、色谱甲醇（天津市康科德科技有限公司）、超纯水。 1.2 仪器

大连依利特P-230高效液相色谱仪（大连依利特分析仪器有限公司）、AL204电子天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）、KQ-250DA型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）、ZTK-7型真空脱气仪(天津市天大天发科技有限公司)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件与系统适应性试验 2.1.1 色谱条件

通过对相关文献[2]的考察，再根据供试品的属性及实验的要求，选定的色谱条件为色谱柱(C18，5um，4.6mm×250mm)，流动相为甲醇-0.3%磷酸缓冲液(1：9)，检测波长为273nm，柱温为30℃，流速为1.0mL/min，进样量为10μ L。

2.1.2 对照品溶液制备

精密称取没食子酸对照品1.1mg，置5mL量瓶中,加50%甲醇溶液稀释至刻度,摇匀，制成每1mL含0.22mg没食子酸的溶液作为对照品溶液，按上述色谱条件进样，进样量为10uL。记录色谱图如图1。 2.1.3 供试品溶液的制备

精密称取诃子四柱散粉末1.6g,置于25mL量瓶中,加入50%甲醇稀释至刻度,密塞,超声处理10分钟,从中吸取4mL置于另一25mL量瓶中，加入50%甲醇稀释至刻度,继续密塞,超声处理10分钟,放冷后，用50%甲醇补液至刻度,摇匀放置片刻，取上清液用微孔滤膜（0.45μ m）滤过，取续滤液作为供试品溶液，按上述色谱条件进样，进样量为10uL。记录色谱图如图2。 2.2 线性范围考察

精密称取没食子酸照品约1.1mg，加流动相溶解定量稀释制成每1mL约含没食子酸0.44ug、0.88ug、1.32ug、1.76ug、2.2ug、3.3ug和4.4ug的溶液，进样量为10μ L，记录色谱图，各溶液的浓度（μ g/mL）与峰面积（AU×min）关系如表1所示。

以浓度（μ g/ml）为横坐标，峰面积（AU×min）为纵坐标绘制标准曲线，回归方程为：Y=2547.4X+54.477，相关系数r=1.0000，结果表明，没食子酸在0.4438μ g/ml～4.4320μ g/ml范围内，与峰面积呈良好的线性关系，标准曲线如图3所示。 2.3 精密度考察

精密称取没食子酸标准品1.1mg，置于5mL容量瓶中，用流动相定容，摇匀。进样量为10uL，重复进样6次，测得标准品中没食子酸峰面积的RSD为1.4%。精密称定诃子四柱散粉末1.6g，置于25mL容量瓶中，用50%纯甲醇溶液定容，摇匀，超声，吸取4mL液体至25mL容量瓶中，再加入50%纯甲醇至刻度，超声5min，过微孔滤膜并进样。进样量为10uL，重复进样6次，测得供试品中没食子酸峰面积的RSD为0.58%。结果表明本方法的精密度较好。