高考生物二轮复习（体验真题+考题切点+考点透析+考题预测，
含13年真题）专题突破十三 生物技术实践 新人教版
摘要：本专题的主干知识主要集中在微生物的培养与利用、传统发酵技术的应用即果酒和果醋的制作、酶技术、DNA的粗提取及鉴定和植物组织培养，植物成分的提取和血红蛋白的提取与分离。
这几个内容都比较贴近生活生产实际，不但可以与必修部分的内容相联系，也为培养学生的生物科学素养起到了一定的作用，因此高考的力度逐年加大，高考的立意重在对生物技术过程的研究和理解，更高的要求是根据有关内容进行实验设计和分析。
从命题角度看主要是以微生物的应用为考察对象，进行实验设计或者其他考察，考察的内容多种多样，考查方式和方向是更加密切的联系人们的生活生产实际。
一、专题知识突破
1.考纲要求
（1）微生物的分离和培养 （2）某种微生物数量的测定 （3）培养基对微生物的选择利用
（4）利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用 （5）酶的存在与简单制作方法 （6）酶活力测定的一般原理和方法 （7）酶在食品制造和洗涤等方面的应用 （8）制备和应用固相化酶
（9）从生物材料中提取某些特定的成分 （10）运用发酵加工食品的基本方法 （11）测定食品加工中可能产生的有害物质 （12）植物的组织培养 （13）蛋白质的提取和分离 （14）PCR技术的基本操作和应用 2.考点剖析
考点1：微生物的培养与应用 【体验真题】
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1. (2012年高考全国卷)关于细菌的叙述中，正确的是 A.不同种类细菌的生长均需要相同碳源 B.常用液体培养基分离获得细菌单菌落
C.细菌大量培养过程中，芽孢形成于细菌生长的调整期 D.培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选
【解析】自养型细菌可以利用无机碳源，异养型细菌只能利用有机碳源，A错误。分离细菌并获得单菌落需要固体培养基，B错误。芽孢是细菌为适应不利的环境而产生的休眠体，而调整期资源丰富，不会产生芽孢，C错误。金黄色葡萄球菌有耐高浓度盐的特点，D正确。
【答案】D
2.（2013新课标II卷） [生物—选修1：生物技术实践]
临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。
回答下列问题：
（1）为了从样本中获取致病菌单菌落，可用法或法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。
（2）取该单菌落适当稀释，用法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。
（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀至于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的。
（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素。 【解析】
（1）在微生物的培养过程中，常用来分离微生物方法是稀释涂布发或平板划线法。 （2）为了使微生物在培养基上能够均匀的分布，一般用涂布法来将微生物接种在培养基上。
（3）在抗药性检验过程中，如果在菌落周围出现透明的圆圈，说明此种抗生素可抑制该细菌；透明圈的大小表示着此种抗生素抗菌的强弱。据此可判断抗菌强弱依次是A、C、B；D的透明圈中出现了一个菌落，说明该菌落对此种抗生素具有耐药性。
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【答案】（1）划线 稀释涂布（或涂布） （2）涂布
（3）敏感 不敏感 该致病菌对C的敏感性比对A的弱 耐药菌 （4）A
【考题切点】微生物的利用在生物技术实践中占有比较重要的地位，包括微生物的分离和培养技术、特定微生物的数量测定等。本专题易考查培养基、消毒灭菌等有关微生物培养的基础知识，培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术，并运用相关技术解决生产生活中有关微生物计数、微生物分离与培养等实际问题。选修只以简单题或填空题形式出现。
【考点透析】 1．培养基及其种类
(1)成分：包含碳源、氮源、水分、无机盐(有些微生物还需在培养基中额外补充生长因子)。
(2)制备：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。 (3)种类 划分培养基特点 标准 种类 液体培不加凝固剂 养基 物理 半固体性质 培养基 加凝固剂 (如琼脂) 固体培养基 选择培养基 用途 鉴别培养基 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别不同种类的微生物 培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长 微生物的分离、鉴定、活菌计数、菌种保藏 培养、分离出特定微生物 观察微生物的运动、分类鉴定 工业生产 用途 3
2．微生物的纯化培养的方法 (1)平板划线法
①通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面
②在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的菌落。 (2)稀释涂布平板法
①将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
②在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。
3．微生物的分离和计数
(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 ①筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。 ②测定微生物数量的常用方法
统计菌落数目[公式：每克样品中菌株数＝(C÷V)×M]或显微镜直接计数。 ③过程：土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察。 ④设置重复组与对照组 a．设置重复组
统计某一稀释度下平板上的菌落数时，要至少涂布3个平板作重复组，增强实验结果的说服力与准确性。
b．设置对照组
判断培养基中是否有杂菌污染时，需将未接种的培养基与接种的培养基同时进行培养； 判断选择培养基是否具有筛选作用时，需将牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养，观察两种培养基上菌落数目，进行对比得出结论。
(2)分解纤维素的微生物的分离 ①实验原理
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即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
选择培养 涂布平板
②实验流程：土壤取样→→梯度稀释→→挑选菌落
选择培养基鉴别培养基4．测定微生物数量的方法
(1)直接计数法：常用的是显微镜直接计数。 (2)间接计数法：常用的是稀释涂布平板计数法。 【考题预测】
1．右图为不同培养阶段酵母菌种各数量，葡萄糖浓度和乙醇浓度的变化曲线，请回答下列问题：
（1）曲线AB段酵母菌呼吸发生的场所是；曲线BC段酵母呼吸的方式为。 （2）酵母菌种群数量从C点开始下降的主要原因除葡萄糖大量消耗外，还有、。 （3）在T1—T2时段，单位时间内酵母菌消耗葡萄糖量迅速增加的主要原因有、。 （4）某同学在T3时取样，统计的酵母菌种群数量明显高于D点对应的数量，原因可能有、和用血球计数板计数时出现错误等。
考点2：酶的应用 【体验真题】
3. (2012重庆高考)乙醇可部分替代石油燃料，利于纤维素酶、酵母菌等可将纤维素转化成乙醇、耐高温纤维素酶可以加速催化纤维素的水解，从而有利于酵母菌发酵产生乙醇。
（1）某研究小组将产纤维素酶的菌株，通过诱变和高温筛选获得新菌株，为探究新菌株所产纤维素酶能否耐受80℃高温，进行了以下实验。
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