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有关逆转录发展的综述

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有关逆转录研究发展的综述

摘 要:逆转录是在研究病毒致癌过程中提出的一种假说——前病毒假说。1970年H.Temin和D.Baltimore分别从RNA病毒中发现了一种酶,能催化以单链RNA为模板合成双链DNA的反应,从而证明了逆转录现象的存在。逆转录的发现使人们对生命信息的传递有了更充分地认识,补充并完善了中心法则;逆转录病毒与癌症的关系,使人们对这种疾病有了更清晰的理解,为癌症的治疗奠定了基础;逆转录酶的作为分子生物学和生物技术中应用最广泛的酶之一,推动着生命科学迅猛发展。随着科学技术的不断进步,人们对逆转录机制、逆转录酶、逆转录病毒载体以及逆转录抑制因素的了解更加透彻,并越来越多的将其与一些疾病的治疗(如癌症)相结合。

关键词:逆转录;逆转录酶;逆转录病毒载体;逆转录病毒

Abstract:Reverse transcription is a hypothesis----provirus hypothesis that was suggested in the process of researching how virus causes cancer.In 1970,both H.Temin and D.Baltimore found a kind of enzyme from the RNA virus,it can catalytic the reaction of making single-strand RNA as template to synthesis double-strand DNA.Then proved that the existence of the Reverse transcription(short for RT). The discovery of RT make people know more about the delivery of the life information and perfect the central dogma.The relationship between retrovirus and cancer,makes a foundation for the treatment of the cancers.The reverse transcriptase works as one of the most extensive enzymes in the life since filed, driving the rapid development of the life since.With the development of the since and technology,people now know more about the retrovirus mechanism,the reverse transcriptase,the retrovirus vectors and the factors suppressing the RT.People also combine them to the treatment of some disease,such as the HIV.

Key words:Reverse transcription;Reverse transcriptase;Retrovirus vector; Retro- virus

一、逆转录的发现

1、1逆转录的发现

逆转录(reverse transcription)是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成。是RNA病毒的一种复制形式,需要逆转录酶的参与。HIV病毒就是一种典型的逆转录病毒。

1910年,美国病理学家劳斯在研究一种肌肉瘤的过程中发现:病毒可以致癌,并由此获诺贝尔奖。随后,人们开始深入的探索病毒转化的机理,意大利裔美国病毒学家杜尔贝科(Renato Dulbecco)发现了DNA病毒整合得机理。但RNA病毒的转化机理并不明了。1956年,特明在对一种RNA病毒致癌机理的研究中,提出了前病毒假说,指出:RNA病毒进入宿主细胞后,首先将RNA复制DNA(此时称为前病毒),然后病毒DNA与宿主细胞发生整合形成宿主的一部分,而增殖由病毒DNA通过转录过程来完成。但这一假说的问世,违反了由克里克在1958年提出的中心法则,被多数人所拒绝。直至1970年,特明和他的助手从RSV中分离得到一种RNA依赖的DNA聚合酶与此同时麻省理工学院的巴尔的摩(David Baltimore)也从小鼠白血病病毒中分离得到这种酶。病毒内酶的存在证明了前病毒假说的正确性,逆转录得到认可,中心法则被重新修正。

1、3逆转录发现的意义

逆转录过程的发现有其重要的意义:(1)对分子生物学的中心法则进行了修正和补充,修正后的中心法则表示为:遗传信息可以经逆转录过程从RNA传递给DNA,再从DNA传递给RNA,然后传给蛋白质,完成遗传信息的转录和翻译的过程。(2)在致癌病毒的研究中发现了癌基因,在人类一些癌细胞如膀胱癌、小细

胞肺癌等细胞中,分离出与病毒癌基因相同的碱基序列,称为细胞癌基因或原癌基因。癌基因的发现为肿瘤发病机理的研究提供了很有前途的线索。(3)在实际工作中有助于基因工程的实施。由于目的基因的转录产物易于制备,可将mRNA反向转录形成DNA,用以获得目的基因。

二、逆转录酶

逆转录酶(RT)是一种依赖于RNA的DNA聚合酶,是逆转录病毒(如艾滋病病毒、乙肝病毒等)特有的酶,用于实现RNA到DNA的逆转录过程。

2、1逆转录酶的结构与功能

逆转录酶是异二聚体酶,它包含有2个多肽:51一kDa和66一kDa。这些多肽有相同的N端,其中较小的P51肽来源于被蛋白质分解酶所分解的较大的P66肽。

逆转录酶有3种不同的催化功能:(1)RNA依赖性DNA聚合酶活性:实现以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。(2)RNaseH活性:从RNA5′端水解掉由反转录酶催化合成的cDNA与模板RNA形成的杂交分子中的RNA分子。(3)DNA依赖性DNA聚合酶活性:实现以反转录合成的第一条DNA单链为模板,以dNTP为底物,合成第二条DNA分子的过程。除此之外,有些逆转录酶还有DNA内切酶活性,这可能与病毒基因整合到宿主细胞染色体DNA中有关。由于具有这样的功能,RT可以将原病毒RNA转录成双链DNA,DNA再整合到宿主细胞的染色体中。

2、2逆转录酶的抑制剂

在逆转录过程中,逆转录酶的活性会受到多种因素的调节,如反应时的温度,PH值,RNA的纯度等,都会影响酶的活性。同时,酶抑制剂的存在也会影响酶的活性。逆转录酶的抑制剂主要有核酸类抑制剂和非核酸类抑制剂。

2、2、1核苷类抑制剂

有关逆转录发展的综述

有关逆转录研究发展的综述摘要:逆转录是在研究病毒致癌过程中提出的一种假说——前病毒假说。1970年H.Temin和D.Baltimore分别从RNA病毒中发现了一种酶,能催化以单链RNA为模板合成双链DNA的反应,从而证明了逆转录现象的存在。逆转录的发现使人们对生命信息的传递有了更充分地认识,补充并完善了中心法则;逆转录病毒与癌症的关系,使人们对这种疾病有
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