五味子糖浆质量标准的研究
摘要:五味子糖浆收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》中药成方制剂第02册。原标准仅收载了对五味子的理化鉴别。根据国家中药品种申报的要求,在原标准的基础上,增加了五味子中五味子甲素的含量测定和五味子中五味子
甲素薄层鉴别。
关键词:高效液相色谱法;五味子糖浆;五味子甲素;含量测定
1 含量测定
1.1 仪器、试药及试剂
仪器:Waters2996高效液相色谱仪、HP1100高效液相色谱仪、AE-240电子天平、SK2200HP型超声波振荡仪。
色谱柱:YMC-Pack ODS-A (5μm.. 4.6mm×150mm)。
对照品:五味子甲素(中国药品生物制品检定所提供)(批号:11)
试剂:甲醇色谱纯
试药:五味子糖浆(哈药集团中药二厂)
1.2 检测条件的选择
波长选择:取五味子甲素对照品适量,加甲醇溶解,用Waters 2996检测器进行全波长扫描,在250 nm处有最大吸收,故其最大吸收峰位于250nm处,与《中国药典》2005年版一部五味子药材项下的含量测定标准一致,因此将检测波长定
为250nm。
流动相的选择:先后试用甲醇-水(50:50)、甲醇-水(60:40)、及甲醇-水(75:25)三种比例的流动相。流动相为甲醇-水(60:40)和甲醇-水(75:25)时,成品中五味子甲素峰分离不开;流动相为甲醇-水50:50)时,成品中五味子甲素与其它组分均能达到基线分离。
检测条件:根据上述考查的结果,确定流动相为甲醇-水(50:50),检测波长为250nm。
在上述条件上,样品中五味子甲素与其它成分能达到较
好的分离,分离度大于1.5。
阴性干扰试验:在处方中去五味子药材,按方中比例和制备工艺方法制成阴性制剂,用供试品溶液制备的方法,制成阴性对照溶液。用以上选定的测定条件进行吸收曲线绘制,观察在与五味子甲素相同的保留时间处是否存在吸收峰,结果表明:在选定条件下测得的阴性液吸收曲线在与五味子甲素相
同保留时间处不存在吸收峰,因此说明选定的条件测定五味
子甲素无干扰,具有较强的专属性。
1.3 提取方法确定
1.3.1 提取溶媒的选择
在供试品溶液制备中,分别选用了水、50%甲醇、甲醇进行超声提取,含量结果见表1:
结果表明:甲醇分离效果、峰形及含量均为最好,所以选择甲醇进行超声提取。
1.3.2 提取时间的选择
取供试品适量,用甲醇溶解,超声波振荡分别提取10、20、30分钟,制备供试品溶液,含量结果见表2:
结果表明:三种提取时间结果无明显差异,为保证提取完全并缩短处理时间,采用超声提取10分钟。
1.3.3 样品的取样量的选择
分别精密量取3ml、5ml、10ml,置50ml容量瓶中,加入甲醇溶液40ml,超声处理10分钟,放置至室温,用甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液。(见表3) 结果表明:三种提取结果无明显差异,取3ml、10ml的信噪比没有称取5ml的低,所以采用量取5ml样品。
由上述实验可以确定供试品溶液的制备方法为: 取本品装量差异项下内容物,精密量取5ml,置50ml容量瓶中,加入甲醇溶液40ml,超声处理10分钟,放置至室温,用甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液。
1.4 含量测定的方法学考察
1.4.1 仪器精密度试验
取本品装量差异项下内容物,精密量取5ml,置50ml容量瓶中,加入甲醇溶液40ml,超声处理10分钟,放置至室温,用甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液,连续进
样6次,结果见表4:
1.4.2 对照品的线性关系考察
精密称取五味子甲素对照品6.80mg,置100ml量瓶中,用甲醇溶解,稀释至刻度,摇匀。进样量分别为4、6、8、10、12、14、16μl,按含量测定方法测定峰面
五味子糖浆质量标准的研究
