好文档 - 专业文书写作范文服务资料分享网站

小鼠急毒实验标准操作LD50 SOP

天下 分享 时间: 加入收藏 我要投稿 点赞

标 准 操 作 规 程 (Standard Operating Procedure)

小鼠LD50毒性试验

编号: 制定日期: 起草人: 审核人:

BALB/c 小鼠LD50毒性试验

1. 实验目的

衡量化合物的毒性,寻找安全剂量范围,为进一步体内活性评价提供数据支持。

2. 实验原理

经口一次性给予或 24 h 内多次给予受试物后,在短时间内观察动物所

产生的毒性反应,包括致死的和非致死的指标参数,致死剂量通常用半数致死剂量 LD50来表示。

3. 实验内容

(1) 探测化合物的 LD50剂量范围。 (2) 确定组数并计算各组剂量。

(3)正式实验:给不同组的小鼠灌胃不同剂量的药物,并观察记录各组别

小鼠的行为变化及死亡情况。

(4)记录实验结果,并计算LD50。

4. 实验材料

试剂:化合物,生理盐水。

材料:电子天平,注射器,灌胃针。

实验动物:动物品系:BALB/c小鼠;性别:雌性;级别:SPF级;年龄:7周龄,实验周期内的动物年龄约为8-10周龄;体重,20±2g,实验前禁食12h。

5. 实验方法与步骤

1.预实验:取小鼠20只,以3只为一组,分成5组。单次口服固定剂量方法(Fixed-dose procedure)。选取一组剂量,进行化合物溶液灌胃给药。给药前禁食不禁水12小时,观察出现的症状并记录死亡数,找出引起0%及100%死亡率剂量的所在范围。

2.正式试验:在预试验所获得的0%和100%致死量的范围内,选用几个剂量(一般用5个剂量,按等比级数增减,相邻剂量之间比例为1:0.7或1:0.8)和生理盐水溶媒对照组,各组动物数为10只,分别用marker笔标记。动物的体重和性别随机分配,完成动物分组和剂量计算后灌胃给药最好先从中剂量组开始,以便能从最初几组动物接受药物后的反应来判断两端的剂量是否合适,否则可随时进行调整,尽可能使动物的死亡率在50%上下,死亡率为0%或100%时,不能用于计算。

6. 观察与记录

首日给药后4小时内每小时密切观察小鼠活动状态和死亡情况,每天对各组小鼠进行称重,统计死亡数量。连续观察1-2周。

日期: 剂量(mg/kg) 动物编号 1 0 2 3 1 50 2 3 1 150 2 3 1 450 2 3 1 1350 2 3 动物体重 0.2ml 灌胃体积 给药时间 出现中毒时间 中毒症状 死亡时间 解剖所见 备注:

7. LD50的计算

1. 改良寇氏法计算[2]

26jcy6yxl968ub00wtu64vbt01gdo5005fj
领取福利

微信扫码领取福利

微信扫码分享