2010～2011学年第一学期生技10-1班《植物组织培养技术》期末考试（答案题解）
1.通过《植物组织培养》这门课程的学习，简单说明组织培养在农业生产实践中的应用。（6分）
解题思路：
本题为客观题，主要考察学生对组织培养技术应用的掌握程度。正确答案：
(1)种苗快速繁殖；（1.5分）(2)苗木脱毒；（1.5分）(3)培育新品种；（1分）
(4)保存和交换植物种质资源；（1分）(5)生产植物性药物和生物制品。（1分）
2.举例说明灭菌和消毒有何区别？（6分）解题思路：
组织培养经常进行环境、材料、培养基、工具等消毒或灭菌。消毒或灭菌质量直接关系到组培的成功与否。本题主要从处理结果、范围、处理程度等方面进行比较。此外，应明确双方之间的关系。正确答案：
(1)灭菌杀菌强烈，能杀死所有材料表面的有害微生物；（2分）
(2)消毒作用缓和，主要杀死或抑制附在植物材料表面的微生物，芽胞、厚坦孢子等一般不会死亡。（2分）
(3)消毒与灭菌是相对的，如果消毒时间过长或消毒剂浓度过高，也可杀死全部活的细胞，消毒就成为灭菌。反之，灭菌剂只能起到消毒作用。（2分）
3.某企业新购一批组培用果酱瓶，请你指导工人进行清洗，并告知工人洗涤标准。（8分）解题思路：
本题考察学生对“玻璃器皿洗涤”这部分知识技能的掌握程度，具体涉及新购玻璃器皿的清洗方法和洗涤标准两方面。正确答案：
(1)新购果酱瓶的洗涤方法(4分)
可以采用酸洗法或碱洗法(可二选一)。
酸洗法：1%稀盐酸浸泡4h以上，然后用自来水冲洗1次，蒸馏水漂洗1次，倒扣在晾干架或工作台上自然晾干，或用烘干箱烘干。
碱洗法：先用10～20%洗衣粉液刷洗，然后用60～70度热水或自来水冲洗1次，最后用蒸馏水漂洗1次，倒扣在晾干架或工作台上自然晾干，或用烘干箱烘干。
(2)洗涤标准(4分)：
果酱瓶透明锃亮，内外壁水膜均一，不挂水珠，无油污和有机物残留。4.请你说明配制30ml浓度为1mg/ml 6-BA母液的配制操作过程(8分)
解题思路：
本题考察激素母液配制方法。首先，根据已知条件，确定6-BA的称取量，其次，选择何种助溶剂，最后是配制操作流程。正确答案：
用分析天平称取30mg6-BA(2分)，置于烧杯内，加入0.1M HCl加热助溶(2分)，然后加入蒸馏水或去离子水(1.5分)，使烧杯内溶液达到30ml(1.5分)，用玻璃棒搅匀，最后倒入棕色瓶，放入冰箱冷藏室内保存(1分)。
5.张三作为企业组培室接种人员，请你替他说出10台双人单面超净台需要准备的接种用具及数量。(4分)解题思路：
本题考察学生对接种用具准备情况的了解程度。首先，明确需要准备哪些用具，其次，根据接种室内双人单面超净台数量计算出应准备的接种用具的数量。
正确答案(每答错或少答一种用具名称及数量各扣0.5分)：
酒精灯，20盏；火柴，10盒；酒精缸，20个；酒精棉球缸，10个；接种工具(手术镊、手术剪、手术刀)至少20套；接种盘至少20个；接种器具消毒器，20台；器具搁置架，20个。
6.某企业组培室进行马铃薯增殖培养时，进行了固体培养与液体培养的对比试验。请你说说固体培养与液体培养有何区别？(8分)解题思路：
本题考察培养基的相态对植物材料离体培养的影响。答题时首先应明确固体培养基和液体培养基在成分上的本质差别，其次再考虑因相态的不同所带来的培养基特点上的差异。正确答案：
固体培养与液体培养主要通过培养基中是否加入了琼脂等固化剂来区分（2分）；固体培养通气性较好，便于操作，但营养分布不均，生长发育不一致（3分）；液体培养则营养分布均匀，生长发育整齐一致，但通气性差（3分）。
7.作为组培主管，请你为新员工培训自动高压灭菌锅的操作程序及注意事项? (15分)
解题思路：
本题考察高压灭菌锅的使用方法。高压灭菌锅有便携式和自动化两种灭菌锅，其操作程序有差异。本题特指自动高压灭菌锅，答题前要搞清这两种灭菌锅在操作流程上的不同点，答问时先介绍操作程序，再介绍注意事项。正确答案：
操作程序（7分）：
通电加水――装锅――设定灭菌温度与灭菌时间――升温，排冷空气――保压灭菌――断电降压――出锅冷却。
注意事项（8分，除第4、5项满分为2分外，其它为1分）：
①装锅时严禁堵塞安全阀的出汽孔，锅内必须留出空位，以保证水蒸汽畅通。
②采用耐热玻璃瓶灌装待灭菌液体，液体体积不超过容器体积的3/4，切勿使用未打孔的橡胶或软木瓶塞。
③灭菌结束后，不可久不放汽。④灭菌时应彻底排净锅内冷空气。
⑤防止出现超高热蒸汽，控制加热速度，严格保证灭菌温度和灭菌时间。⑥定期检查和保养灭菌锅，保证压力表和安全阀正常。8.新员工要到室外采集外植体，应该注意哪些问题？后期如何进行材料预处理？
（15分）解题思路：
本题考察外植体采集与处理相关知识与技能。室外采集外植体应遵循外植体选择原则，并且采集环境、采集的外植体种类、取材部位等都与后期材料灭菌方案制订有直接关系，因此外植体采集时对上述事项需做出说明；对于后期材料的预处理方法，由于本题未明确采集对象与部位，应罗列出预处理方法。正确答案：
外植体采集应注意的问题（7分）：
（1）严格遵循外植体选择原则：①优良的、具有代表性的基因型；②选择幼嫩、生长健壮、长势强的植物材料；③在其生长开始的季节选取；④材料来源有保证，容易成苗，不易变异；⑤根据培养目的来确定外植体及其大小。
（2）外植体识别要准确，保证所采集的外植体与培养方案的要求相符。（3）注意观察采集对象及其生态环境，评估材料及环境带菌程度；（4）室外采集外植体，注意做好必要的保护措施。
（5）外植体采集后不宜久放，应及时清洗或作必要的预处理。材料预处理方法：
（1）喷杀虫剂、杀菌剂和套袋
提前选定枝条等取材部位，对取材部位喷施杀虫剂、杀菌剂，然后套上白色塑料袋，并用线绳扎住，待长出新枝条后再采样
（2）材料预培养
挖取小植株，剪除一些不必要的枝条后，改为盆栽，喷杀虫剂和杀菌剂，在室内或置于人工气候室内培养。也可将一些植株的枝条插入水中或低浓度的糖液中培养，后期选取新抽生的新梢或芽进行接种。为了加快外植体的诱导与分化，对一些材料(如花药)需要进行高低温处理、药剂处理或辐射处理等。
（3）外植体初次修整
表1 外植体修整方法
外植体类型茎尖、茎段修整方法剪或切除枝条上的叶片、叶柄及刺、卷须等附属物；软质枝条用软毛刷蘸肥皂水刷洗，硬质枝条用刀刮除枝条表面的蜡质、油质、茸毛等；枝条剪成带2～3个茎节的茎段，长约4～5cm。叶片带油脂、蜡质、茸毛，可用毛笔蘸肥皂水刷洗；较大叶片可剪成若干带叶脉的叶块，大小以能放入冲洗用容器即可。 一般不用修整，直接冲洗消毒。对于种皮较硬的种子可去除种皮、预先用低浓度的盐酸浸泡或机械磨损。叶片果实、种子、胚乳（4）流水冲洗根据材料的性质、性状和采集环境的特点，确定流水冲洗的时间，一般要在材料灭菌前流水冲洗至少30min以上。
9.小王在岗前培训课上，请教组培主管王主任有关组培接种的注意事项，请你代王主任回答小王的提问。(10分)解题思路：
本题主要考察无菌操作相关技能要求。组培接种涉及若干步骤和技术环节，在回答接
种注意事项时，最好以接种操作流程及各操作环节为主线来逐一介绍。
正确答案：（1）材料灭菌
接种材料充分灭菌后，将相关器皿和药剂清理出台面，然后再接种。（2）摆台
酒精灯、接种盘、酒精缸、手术镊、手术剪和手术刀等摆放合理。（3）操作
无菌操作要规范、准确、迅速，动作协调。具体要做到以下几点：①接种工具使用前要充分灼烧灭菌，同时充分冷却；②接种工具不能碰到台面、管（瓶）的外壁、封口材料；③接种时夹取外植体时用力要适当，外植体和手指不能触及瓶口；④开瓶时解绳或去除橡皮筋的动作要轻又快，接种的培养瓶拿成斜角，防止灰尘落入瓶中；⑤双手不要超出超净工作台边缘，头部不要探入超净工作台内，手及手臂尽量避免或减少从接种盘上方经过；离开超净工作台后再接种时要重新擦手；⑥封口时线绳不能碰到培养皿和接种工具；封口材料接触管（瓶）内的部分不要用手触摸或接触台面；⑦无菌操作时戴上口罩，尽量不讲话防止呼吸、说话或咳嗽所引起的污染；⑧必须在酒精灯（或煤气）火焰的有效范围（?10cm的半圆区域）内操作，如修剪材料、开瓶、接种等。
（4）外植体二次修整
①接种材料灭菌后要用无菌滤纸吸干水分，并剪除触及培养皿外沿或伸出培养皿外的接种材料；②修剪后的外植体不能重叠放置；③每切割完1瓶母种材料或无菌滤纸较湿、有较多破损之处时应及时更换滤纸；④外植体二次修整的结果符合外植体最终要求。
（5）注意个人卫生
接种人员注意个人卫生，要经常洗澡、剪指甲，实验服、口罩和帽子应经常清洗和严格灭菌。
10、请你为小赵的公司设计一个120m2的组培快繁实验室。要求按大致比例画出组培室平面设计简图，标清各分室组成，并按各分室列出应该配置的主要仪器设备与用品。（20分）
解题思路：
本题考察实验室设计方面的知识与技能。首先明确实验室及各分室的大小及相对比例，其次考虑各分室的结构布局，然后再按照组培实验室平面设计图的体例要求先后画出设计草图、正式设计简图，最后再按各分室的功能与内部布局确定主要仪器设备与用品。评价标准：
（1）设计图格式正确，比例适当，美观大方(6分)。
（2）实验室各分室大小与结构布局科学合理，经济实用，针对性强。(10分)（3）各分室主要仪器设备与用品罗列齐全(4分)
植物组织培养技术(4)--植物组织培养技术课程期末考试（答案） - 图文
