SERCA2表达对哮喘大鼠气道平滑肌细胞分泌IL-8的影响
俞珍惜 沈剑 黄先玫 李小莉 刘占利 蒋春明
【摘 要】【摘要】 目的 探讨哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)中肌浆/内质网Ca2+-ATP酶(SERCA2)的表达对IL-8分泌的影响。方法 建立卵清蛋白(OVA)诱导的哮喘大鼠模型,分离原代ASMCs,分别用qRT-PCR及Western blotting、Fura PE-3/AM和ELISA法检测各组ASMCs中SERCA2表达、细胞内Ca2+浓度([Ca2+] i)和IL-8,利用siRNA技术下调SERCA2、毒胡萝卜素(TSG)抑制SERCA2以及吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)抑制NF-κB活化,检测不同状态下IL-8的变化。结果 与正常组比较,哮喘组SERCA2的表达减少,经缓激肽(BK)刺激的钙瞬变峰值明显下降,需更长时间重新摄取钙使[Ca2+] i恢复至基线水平,IL-8基础值和经IL-17刺激后的诱导值均增加(P<0.05或0.01)。无论有无IL-17刺激,基因下调组IL-8 mRNA表达和分泌均显著增加(均P<0.01),与哮喘对照组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。哮喘组IκBα磷酸化和NF-κB p65核转位均较正常组增加(P<0.05或0.01),基因下调组和TSG抑制组的NF-κB p65核转位亦增加(P<0.05或0.01),而使用PDTC后,基因下调组、哮喘对照组和正常对照组在IL-17刺激诱导下的IL-8 mRNA表达和分泌均减少(P<0.05或0.01)。结论 哮喘大鼠ASMCs中SERCA2表达减少,导致钙稳态的改变,可能通过增强NF-κB活化来介导IL-8分泌亢进。 【期刊名称】浙江医学 【年(卷),期】2024(041)011 【总页数】6