正交试验优选槐角蜜炙炮制工艺
方艳夕，何小菲，路晓娟
【摘 要】摘要：目的：优化蜜槐角的炮制工艺。方法：以槐角苷含量为考察指标，利用正交试验设计，筛选蜜炙槐角的最佳炮制工艺。采用高效液相色谱法测定槐角苷的含量，色谱条件：色谱柱为VP-ODS C18 (4.6mm×250mm，5μm)；流动相为乙腈- 0.07%磷酸水溶液(3268)；流速0.9mL·min-1；检测波长260nm；柱温30℃。结果：槐角蜜炙的最佳炮制工艺为：蜜炙温度120℃，蜜水体积比12 ，蜜炙时间6min。结论：该炮制工艺具有一定可控性、操作简单，为蜜槐角的炮制提供参考。 【期刊名称】齐齐哈尔大学学报（自然科学版） 【年(卷),期】2017(033)001 【总页数】5
【关键词】槐角；槐角苷；蜜炙；正交设计
中药槐角为豆科植物槐(Sophora japonica L.)的干燥成熟果实[1]。槐角性味苦、寒；归肝、大肠经；有清热泻火，凉血止血的功效，可用于治疗肠热便秘、痔肿出血、肝热头痛、眩晕目赤。经蜜炙后可减缓寒性，增强润肠通便作用[1-3]。槐角中含有多种具有生物活性的黄酮类化合物，其中槐角苷具有抗炎和抑制免疫等作用，目前《中国药典》记载槐角和蜜槐角的质量控制项目含量测定指标为槐角苷[1]。本文以槐角苷含量为考察指标优化蜜炙槐角的炮制工艺，提供可控性的最佳炮制工艺参数，为中药饮片蜜槐角的生产过程控制提供依据。
1 仪器与材料
1.1 仪器
LC-20AT型高效液相色谱仪（日本岛津）；SPD-M20A二极管阵列检测器（日本岛津）；JK-500DB 型数控超声波清洗器（合肥金尼克机械制造有限公司）；CPA225D准微量天平（德国赛多利斯）；GZX-9146MBE数显鼓风干燥箱（上海博迅实业有限公司）。 1.2 药品与试剂
槐角苷对照品（批号：20100808，国药集团化学试剂有限公司）；槐角药材（产地：河北，批号140927，购自安徽亳州药材市场，由安徽科技学院方艳夕老师鉴定）。乙腈、甲醇（美国 TEDIA）为色谱纯，其余试剂均为分析纯。水为超纯水。
2 方法与结果
2.1 槐角的蜜炙工艺研究 2.1.1 预备试验
对槐角蜜炙的3个炮制因素即炮制温度、蜜水比、炮制时间进行考察。称取干燥槐角适量，将其放入锅内在一定温度下炒至变色，稍鼓起后，喷洒按照一定比例配制的蜜水，再炒到颜色加深、外皮光亮、不粘手、鼓起的程度，出锅放凉（每100 kg槐角，用炼蜜5 kg）。在“炮制温度”的预试验中，其它条件保持不变的情况下，炮制温度高于130℃时槐角容易炭化。在“蜜水比”预试验中，当蜜与水的比例大于1∶2时，槐角过于潮湿不宜炒干。在“炮制时间” 预试验中，炮制7 min以后的蜜槐角中槐角苷含量明显下降。故确定本次试验的炮制温度、蜜水比、炮制时间3个因素的最大水平为130℃, 1∶2, 7 min[1,4]。
2.1.2 正交设计试验
根据预备试验结果，确定的因素水平见表1。 2.2 槐角苷含量测定 2.2.1 色谱条件
色谱柱：VP-ODS C18 (4.6 mm x 250 mm，5 μm)；流动相：乙腈- 0.07%磷酸水溶液(32∶68)；流速：0.9 mL·min-1；检测波长：260 nm；柱温：30℃。在上述色谱条件下，槐角苷峰形良好，对照品及样品的色谱图见图1。 2.2.2 对照品溶液的制备
取槐角苷对照品适量，精密称定，加色谱甲醇溶解制成浓度为0.04 mg·mL-1的对照品溶液，置4℃条件下保存备用，临用时用0.45 μm的微孔滤膜过滤即可。
2.2.3 供试品溶液的制备
取槐角蜜炙品粉碎(过三号筛)，称取粉末各2 g，并精密称定，置入100 mL具塞锥形瓶中，精密加入50 mL 70%乙醇，称定总重量，超声提取45 min (功率为300 W，频率为25 kHz)， 待提取液冷却后，再用70%乙醇补足失重，摇匀，过滤，精确量取续滤液2.5mL，置干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸发至无醇味。然后用甲醇溶解置100 mL容量瓶中并定容至刻度，摇匀，即得供试品溶液，临用时用0.45 μm滤膜过滤。 2.2.4 标准曲线的制备
分别精密吸取槐角苷对照品溶液5，10，15，20，25，30 μL注入高效液相色谱仪，按“2.2.1”项下色谱条件进行测定，结果见表2。以进样量(x)为横坐标，峰面积(y)为纵坐标，进行线性回归，绘制标准曲线，得回归方程为：Y =4 145 522 X+28 099.73，r =0.9997，槐角苷进样量在0.2～1.2 μg范围内，进样量
正交试验优选槐角蜜炙炮制工艺
