腺病毒介导的PTEN cDNA对子宫内膜癌细胞凋亡的影响
杨培丽;刘玉环;崔英;蔡在龙;毛积芳
【期刊名称】《中华妇产科杂志》 【年(卷),期】2006(041)008
【摘要】目的 研究外源性PTEN cDNA的表达对子宫内膜癌细胞凋亡的影响.方法 用细菌内同源重组法构建含野生型抑癌基因PTEN cDNA的复制缺陷型腺病毒Ad-PTEN,蛋白印迹法鉴定转染Ad-PTEN后,子宫内膜癌细胞系RL95-2细胞中PTEN蛋白的表达.将RL95-2细胞随机分成3组:(1)空白对照组:仅用培养基而不加腺病毒;(2)Ad-CMV组:转染复制缺陷型空载体腺病毒Ad-CMV;(3)Ad-PTEN组:转染复制缺陷型腺病毒Ad-PTEN.前两组均为对照组.采用细胞膜磷脂酰丝氨酸(PS)外翻检测、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)测定及染色体DNA片段化检测这3种方法,从不同角度检测PTEN蛋白的表达对RL95-2细胞凋亡的影响.结果 经Ad-PTEN介导的PTENcDNA能够在RL95-2细胞中持续有效地表达.Ad-PTEN组转染后24、48、72、96 h,RL95-2细胞中细胞膜PS外翻细胞分别占(6.09±1.01)%、(9.98±2.17)%、(11.74±2.65)%、(27.69±8.67)%,各个时间点分别与两个对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);RL95-2细胞中活化caspase-3细胞分别占(2.6±0.5)%、(18.0±4.4)%、(21.8±5.1)%、(33.7±9.9)%,各个时间点分别与两个对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).Ad-PTEN转染后48 h,RL95-2细胞中出现特异性的染色体DNA梯状条带.结论 腺病毒介导的PTEN cDNA能够有效地在RL95-2细胞中表达,并诱导其凋亡,为子宫内膜癌的基因治疗提供了理论基础.
腺病毒介导的PTEN cDNA对子宫内膜癌细胞凋亡的影响
